微藻是具有多種經(jīng)濟價值的天然資源,微藻培養(yǎng)及其產(chǎn)物的開發(fā)利用為解決目前的糧食、能源、環(huán)境等問題開辟了新領域。然而,傳統(tǒng)自養(yǎng)培養(yǎng)方式因其細胞密度低、采收困難和成本過高等局限性制約著微藻的產(chǎn)業(yè)化進程。越來越多的研究證明,異養(yǎng)和兼養(yǎng)可以有效提高生長速率和生物產(chǎn)量,是實現(xiàn)微藻超高密度培養(yǎng)的有效途徑,也是促進微藻高附加值生物活性物質(zhì)積累的重要手段�；谖⒃遄陨淼臓I養(yǎng)特點,目前能夠?qū)崿F(xiàn)異養(yǎng)和兼養(yǎng)培養(yǎng)的微藻種類有限,且限制微藻利用有機碳進行異養(yǎng)和兼養(yǎng)生長的原因尚不明確。為加深對異養(yǎng)和兼養(yǎng)藻株生長特性、生理生化特征的認識,推進對微藻高附加值胞內(nèi)活性物質(zhì)的探索,有必要對更多的微藻開展相關(guān)研究。本文分別以生物產(chǎn)油模式種眼點微擬球藻（Nannochloropsis oculata）和典型餌料微藻朱氏四爿藻（Tetraselmis chuii）為代表,對它們進行了異養(yǎng)和兼養(yǎng)研究,驗證了利用平板劃線和抗生素法制備無菌化藻株的可行性；證實了兩種微藻均可利用合適的碳源分別進行異養(yǎng)和兼養(yǎng)生長,解決了一直以來對于微擬球藻是否可以進行異養(yǎng)生長的爭議；探明了兩種微藻可利用的最適碳源的種類和濃度；揭示了不同培養(yǎng)條件下微藻的顯... 

【文章來源】：中國海洋大學山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：142 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
0 前言
1 文獻綜述
    1.1 微藻及其概述
        1.1.1 微藻生物學及主要特點
        1.1.2 微藻的生化組成
        1.1.3 微藻的應用
    1.2 微藻營養(yǎng)方式
        1.2.1 微藻的自養(yǎng)方式
        1.2.2 微藻的異養(yǎng)方式
        1.2.3 微藻的兼養(yǎng)方式
    1.3 微藻無菌化
    1.4 主要研究內(nèi)容
        1.4.1 本研究所選用的藻種
        1.4.2 研究內(nèi)容
        1.4.3 擬解決的關(guān)鍵問題
2 眼點微擬球藻無菌化藻株的制備
    2.1 材料與方法
        2.1.1 儀器與藥品
        2.1.2 培養(yǎng)基、緩沖液和抗生素
        2.1.3 生物材料
        2.1.4 實驗方法
        2.1.5 實驗設計
        2.1.6 數(shù)據(jù)分析
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 兼養(yǎng)培養(yǎng)下的細胞形態(tài)
        2.2.2 兼養(yǎng)培養(yǎng)下的生長曲線
        2.2.3 共生菌的表型特征
        2.2.4 共生菌的分子系統(tǒng)學分析
        2.2.5 卡那霉素處理下微藻的自養(yǎng)生長
        2.2.6 氯霉素處理下的微藻自養(yǎng)生長
        2.2.7 卡那霉素處理下的微藻兼養(yǎng)生長
        2.2.8 氯霉素處理下的微藻兼養(yǎng)生長
        2.2.9 卡那霉素和氯霉素共同處理下的微藻兼養(yǎng)生長
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
3 不同有機碳源對眼點微擬球藻生長和油脂含量的影響
    3.1 材料與方法
        3.1.1 儀器與藥品
        3.1.2 培養(yǎng)基
        3.1.3 生物材料
        3.1.4 實驗方法
        3.1.5 實驗設計
        3.1.6 數(shù)據(jù)分析
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 不同蔗糖濃度對眼點微擬球藻生長的影響
        3.2.2 不同葡萄糖濃度對眼點微擬球藻生長的影響
        3.2.3 不同乙酸鈉濃度對眼點微擬球藻生長的影響
        3.2.4 不同甘油濃度對眼點微擬球藻生長的影響
        3.2.5 不同乙醇濃度對眼點微擬球藻生長的影響
        3.2.6 不同有機碳對眼點微擬球藻油脂含量的影響
        3.2.7 BODIPY染色后的兼養(yǎng)細胞形態(tài)
        3.2.8 異養(yǎng)與兼養(yǎng)轉(zhuǎn)換后的微藻生長
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
4 不同有機碳源對朱氏四爿藻生長的影響
    4.1 材料與方法
        4.1.1 儀器與藥品
        4.1.2 培養(yǎng)基和抗生素
        4.1.3 生物材料
        4.1.4 實驗方法
        4.1.5 實驗設計
        4.1.6 數(shù)據(jù)分析
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 形態(tài)學特點
        4.2.2 抗生素敏感性
        4.2.3 有機碳種類及濃度兼養(yǎng)
        4.2.4 有機碳異養(yǎng)測試結(jié)果
        4.2.5 有機氮異養(yǎng)測試結(jié)果
        4.2.6 Tetreselmis H20的分子系統(tǒng)學分析
    4.3 討論
    4.4 小結(jié)
5 不同碳氮比對朱氏四爿藻生長的影響
    5.1 材料與方法
        5.1.1 儀器與藥品
        5.1.2 培養(yǎng)基
        5.1.3 生物材料
        5.1.4 實驗方法
        5.1.5 實驗設計
        5.1.6 數(shù)據(jù)分析
    5.2 結(jié)果與分析
        5.2.1 異養(yǎng)和兼養(yǎng)朱氏四爿藻的形態(tài)特征
        5.2.2 異養(yǎng)和兼養(yǎng)朱氏四爿藻的生長曲線
        5.2.3 異養(yǎng)和兼養(yǎng)朱氏四爿藻的生物量
        5.2.4 總脂、蛋白質(zhì)、多糖和葉綠素a含量
        5.2.5 脂肪酸組成分析
    5.3 討論
    5.4 小結(jié)
6 結(jié)論與創(chuàng)新點
    6.1 結(jié)論與展望
        6.1.1 結(jié)論
        6.1.2 展望
    6.2 創(chuàng)新點
參考文獻
附錄1 培養(yǎng)基配方
附錄2 本研究所用基因序列
致謝
個人簡歷
發(fā)表的學術(shù)論文
博士研究生期間所獲獎勵


【參考文獻】：
期刊論文
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[3]碳源種類及碳氮比對眼點擬微綠球藻生長密度、油脂含量和脂肪酸組成的影響[J]. 竇曉,陸向紅,盧美貞,薛蓉,晏榮軍,計建炳.  生物工程學報. 2013(03)
[4]微藻規(guī)�；a(chǎn)的關(guān)鍵問題[J]. 孫麗英,何皓,田宜水,齊泮侖,趙立欣.  可再生能源. 2012(09)
[5]抗生素不良反應與合理用藥分析[J]. 姜慧敏.  臨床合理用藥雜志. 2012(25)
[6]微藻總脂含量測定方法概述[J]. 梁英,石偉杰,田傳遠.  中國海洋大學學報(自然科學版). 2012(05)
[7]6種微藻對氯霉素和硫酸新霉素敏感性研究[J]. 楊芳芳,李愛芬,萬凌琳,吳洪,尹順吉,張成武.  生物技術(shù). 2012(02)
[8]微藻的異養(yǎng)培養(yǎng)及應用研究[J]. 張帆,韓笑天,李巋然,冀曉青.  海洋科學. 2012(01)
[9]海洋交替單胞菌YTW-10的鑒定及抑菌活性分析[J]. 王磊,宿紅艷,楊潤亞,王曉杰,林文杰.  海洋科學. 2011(07)
[10]3種海洋微藻多糖提取工藝的研究[J]. 劉筱瀟,孫穎穎,管習超,王長海.  海洋通報. 2010(05)



本文編號：3274262