A型流感病毒（influenza virus A）屬于正粘病毒科,流感病毒屬;基因組由大小不同的8個(gè)獨(dú)立的單股負(fù)鏈RNA片段組成,其中非結(jié)構(gòu)蛋白1（nonstructural proteinl,NSl）由NS基因編碼,NS1蛋白主要有兩個(gè)結(jié)構(gòu)域,N-末端的RNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域（RNA binding domain,RBD）參與RNA結(jié)合;C-末端的效應(yīng)結(jié)構(gòu)域（Effect domain,ED）,能夠同宿主細(xì)胞內(nèi)多種重要蛋白發(fā)生相互作用,是重要的功能結(jié)構(gòu)域。NS1是一種多功能蛋白質(zhì),其實(shí)現(xiàn)病毒逃逸天然免疫功能主要通過與宿主蛋白相互作用,抑制宿主相應(yīng)的通路或抗病毒蛋白功能;NS1能同病毒復(fù)制中間體RNA結(jié)合,阻斷宿主識別病原相關(guān)分子模式;NS1還具有抑制抗宿主蛋白轉(zhuǎn)錄翻譯,調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡等諸多功能。病毒與宿主相互作用,共同決定了病毒感染的進(jìn)程以及宿主的命運(yùn)。2009年流感病毒是一株重組病毒,由于其發(fā)生抗原漂移使人類缺乏免疫力,從而導(dǎo)致病毒大范圍傳播。2009年大流行流感病毒在傳染規(guī)律以及致病性和季節(jié)性流感以及以往的高致病性甲型流感存在差異,具體表現(xiàn)為感染重癥人群主要為青壯年,人群整體致死率較低等... 

【文章來源】：中國人民解放軍軍事科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
abstract
縮略詞表
前言
第一部分 流感病毒NS1蛋白參與的免疫應(yīng)答
    流感病毒
        1.1 A型流感病毒特性及致病機(jī)理
        1.2 流感病毒形態(tài)結(jié)構(gòu)
        1.3 宿主細(xì)胞對流感病毒感染的免疫應(yīng)答以及病毒參與的免疫逃逸
        1.4 本研究的立題依據(jù)以及擬解決的科學(xué)問題，研究思路以及研究方法
    材料與方法
        1 材料
            1.1 質(zhì)粒、菌株、病毒和細(xì)胞
            1.2 分子生物學(xué)試劑
            1.3 抗體
            1.4 主要實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備
        2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.1 重組質(zhì)粒的構(gòu)建
            2.2 細(xì)胞復(fù)蘇、傳代和凍存
            2.3 細(xì)胞的轉(zhuǎn)染
            2.4 免疫沉淀以及免疫印跡
            2.5 免疫熒光
            2.6 熒光素酶活性測定
            2.7 Duo-Link實(shí)驗(yàn)
            2.8 新城疫病毒（NDV-GFP）感染實(shí)驗(yàn)
                2.8.1 NDV-GFP病毒培養(yǎng)
                2.8.2 NDV-GFP感染實(shí)驗(yàn)
                2.8.3 NDV-GFP生物學(xué)效應(yīng)實(shí)驗(yàn)
            2.9 病毒增殖與純化
                2.9.1 流感病毒增殖
                2.9.2 流感病毒細(xì)胞感染
            2.10 RNA的提取
            2.11 RT-PCR
                2.11.1 RT反應(yīng)
                2.11.2 定量PCR擴(kuò)增以及結(jié)果分析
                2.11.3 定量PCR使用引物
            2.12 定點(diǎn)突變
            2.13 siRNA
            2.14 細(xì)胞凋亡檢測
            2.15 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        1. 2009 年大流行流感病毒NS1蛋白分析
            1.1 2009 年流感病毒NS1蛋白進(jìn)化分析
            1.2 2009 年流感病毒NS1蛋白序列分析
        2. NS1蛋白功能位點(diǎn)篩選
        3. NS1蛋白RIG-I信號通路
        4. NS1與蛋白酶體信號通路
        5. 反向遺傳學(xué)拯救流感病毒
        6. 位點(diǎn)突變對流感病毒致病性的影響
    討論
        NS1同源性分析
        NS1蛋白與病毒感染過程
        NS1蛋白與宿主蛋白之間的相互作用
    結(jié)論
第二部分 SARS-CoV病毒N蛋白抑制干擾素產(chǎn)生機(jī)制的研究
    SARS冠狀病毒概述
    結(jié)果
        1. N蛋白抑制干擾素產(chǎn)生
        2. N蛋白抑制RIG-I泛素化
        3. N蛋白抑制干擾素下游信號通路的激活
        4. TRIM25對SARS-Co V病毒復(fù)制的影響
        5. MERS-Co V N蛋白與TRIM25相互作用
    討論
    結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
個(gè)人簡介
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]新甲型H1N1流感病毒的分子遺傳進(jìn)化分析[J]. 趙麗,劉永宏,劉月煥,王鳳龍,林健,韓春華,馬明,丁玉林,丁旭娜,王金玲,楊龍峰,潘潔,韓婧雯.  病毒學(xué)報(bào). 2010(02)
[2]Molecular Advances in Severe Acute Respiratory Syndrome-associated Coronavirus （SARS-CoV）[J]. Raymond Kin Hi Hui,Raymond Tsz Yeung Wong,Chi Wai Yip,Frederick Chi Ching Leung.  Genomics Proteomics & Bioinformatics. 2003(04)



本文編號：3243453