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七株植物內(nèi)生菌的次生代謝產(chǎn)物及活性研究

發(fā)布時間:2020-06-10 01:13
【摘要】:植物內(nèi)生菌具有豐富的次生代謝產(chǎn)物,且次生代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)類型多樣,在醫(yī)藥先導化合物的發(fā)現(xiàn)中有重要的研究價值,是具有生物活性的單體化合物的重要來源。本文共對來源于不同植物的七株內(nèi)生菌的次生代謝產(chǎn)物及其生物活性進行了研究。它們分別是木霉屬真菌YIM莖-8、黑孢霉屬真菌E121、曲霉屬真菌T2-10及四株鏈霉屬放線菌(YIM66142、YIM66047、YIM66262、YIM67032)。采用多種分離技術(shù)手段和現(xiàn)代波譜技術(shù),從中共分離鑒定了118個化合物,其中不重復的化合物97個,新化合物7個。并對分離到的部分化合物進行了抑菌活性、光抑菌活性、腫瘤細胞毒活性、乙酰膽堿酶抑制活性、自由基清除、抑制植物種子萌發(fā)活性等實驗。主要完成內(nèi)容如下:分別從鼓槌石斛(Dendrobium chysotoxum)、箭葉秋葵(Abelmoschus sagittifolius)、彎錐香茶菜(Rabdosia loxothyrsa)、草玉梅(Anemone rivularis)中的4株鏈霉菌YIM66142、YIM66047、 YIM66262、YIM67032中共分離得到80個化合物,其中4個新化合物,化合物類型包含除莠菌素(herbicidin)類,nonactic acid類,大環(huán)酯肽類,蒽醌類,異黃酮類,環(huán)肽,核苷等;衔飉edelamine C、 herbicidin B對枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis表現(xiàn)出較好的抑菌活性,MICs均為32 μg/mL; desotamide對B. subtilis和大腸桿菌Escherichia coli表現(xiàn)出較好抑菌活性,MICs為64 μg/mL,還對金黃色葡萄球菌Staphylococcus aureus表現(xiàn)出微弱的抑制活性,MIC為128μg/mL。Herbicidins類化合物均表現(xiàn)出對甘藍種子發(fā)芽的抑制活性,首次對2'-O-demethylherbicidin F和8'-epi-herbicidin F的種子發(fā)芽的抑制活性進行研究,MICs均為12.5-50μg/mL。對分離到的部分蒽醌類化合物進行光動力抑菌活性研究,結(jié)果表明在光誘導下,蒽醌類化合物的抑菌能力有不同程度的增強,大黃酚對S. aureus的MIC從512μg/mL下降至32μgg/mL,對E. coli的MIC從128 μg/mL下降至8 μg/mL; kwanzoquinone G對E. coli的MIC從512μg/mL下降至8 μg/mL。分別從三七莖(Panax notoginseng)、鐕水鱉葉(Hydrocharis dubia)、天麻(Gastrodia elata)中的3株內(nèi)生真菌中分離到化合物38個,其中3個新化合物,其類型包括alternariols類化合物、腦酰胺、倍半萜、環(huán)肽、蒽醌等類型。莖-8菌株中的化合物alternariol、1-hydroxymethyl-alternariol monomethyl ether表現(xiàn)出良好的清除自由基的能力,IC_(50)為12 μg/mL;化合物1-hydroxymethyl-alternariol monomethyl ether, α-acetylorcinol和cerebroside C表現(xiàn)出了對甘藍種子萌發(fā)的抑制活性,對其發(fā)芽和生長產(chǎn)生了一定的影響,MICs均為小于3 μg/mL。 T2-10菌株中的questin表現(xiàn)出了對B. subtilis, S. aureus和E. coli的抑制活性,其MICs分別為128、64、64μg/mL。論文最后對近十年來陸地和海洋中的稀有放線菌的次生代謝產(chǎn)物的研究進行了綜述,文獻表明多數(shù)代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)復雜并顯示多種生物活性,為今后從稀有放線菌中尋找活性先導化合物提供參考。
【圖文】:

照片,次生代謝產(chǎn)物,化學


層析色譜分析,采用3個不同的展開劑系統(tǒng),,分別為石油憸/丙麗(4:1,V/V)、氯逡逑仿/甲醇(9:1和4:1,V/V)。在巧光燈下觀察化C分析結(jié)果后,用茵香醒-硫酸進行逡逑顯色,結(jié)果如圖1-2所示。從IXC的照片可得出,漢r邸卿罕:essp.YIM66142的逡逑茵香酵硫酸顯色結(jié)果與其他菌株有較大差別,因此將其作為目標菌株。逡逑[石被:刷>4;邋1邋1逡逑I逡逑I邐1巧:柿4;邋1逡逑焌涯I逡逑櫝銷銀.邐*化郵:1:;逡逑A嫌1^.如e唬叔義賢跡保泊紊徊锏幕稈〗峁義希疲椋紓酰潁邋澹保插澹裕瑁邋澹椋澹笊劍簦簀澹錚駑澹悖瑁澹恚椋悖幔戾澹螅悖潁澹澹睿椋睿玨澹猓澹裕蹋緬義希睳2代謝產(chǎn)物生物活性篩選結(jié)果逡逑將加入各菌株發(fā)酵液提取物和病原菌的培養(yǎng)皿放在28邋’C的培養(yǎng)室中恒溫培逡逑養(yǎng)2d,觀察各菌株提取物對指示菌的生長抑制情況,并記錄抑菌圈大小。結(jié)果表逡逑4逡逑

抑制活性,病原菌,菌株篩選,活性篩選


邐第一章鼓植石解內(nèi)生鏈霉菌YIM66142次生代謝產(chǎn)物及活性研巧邐逡逑明YIM66142對?和=七病原菌10090501和10090506具有一定的抑制活性。逡逑活性篩選結(jié)果見圖1-3和表1-1。逡逑表レl菌株篩選抑菌活性結(jié)果(單位:cm)*逡逑Table邋1-1邋The邋results邋of邋bioactivity邋screening邋(Scale:邋cm)逡逑病原菌邐YIM66142 ̄YIM66047逡逑Fusarium邋solani邐1.4邐-逡逑Fusarium邋oxysporum邐0.5邐-逡逑10090501邐1.9邐0.8逡逑10090504邐-邐-逡逑10090506邐0.8邐-逡逑100914-2邐-邐-逡逑29-3邐-邐-逡逑*注:表中數(shù)值為抑茜圈大小,包括了打孔鐵板所含孔徑,表示沒有抑制活性。逡逑
【學位授予單位】:云南大學
【學位級別】:博士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:Q936

【引證文獻】

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1 毛涵;陳婧;代飛;湯新慧;薛菲;;中華補血草內(nèi)生真菌發(fā)酵物的抑菌和抗氧化活性[J];江蘇農(nóng)業(yè)科學;2018年08期



本文編號:2705549

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