七株植物內(nèi)生菌的次生代謝產(chǎn)物及活性研究
發(fā)布時間:2020-06-10 01:13
【摘要】:植物內(nèi)生菌具有豐富的次生代謝產(chǎn)物,且次生代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)類型多樣,在醫(yī)藥先導化合物的發(fā)現(xiàn)中有重要的研究價值,是具有生物活性的單體化合物的重要來源。本文共對來源于不同植物的七株內(nèi)生菌的次生代謝產(chǎn)物及其生物活性進行了研究。它們分別是木霉屬真菌YIM莖-8、黑孢霉屬真菌E121、曲霉屬真菌T2-10及四株鏈霉屬放線菌(YIM66142、YIM66047、YIM66262、YIM67032)。采用多種分離技術(shù)手段和現(xiàn)代波譜技術(shù),從中共分離鑒定了118個化合物,其中不重復的化合物97個,新化合物7個。并對分離到的部分化合物進行了抑菌活性、光抑菌活性、腫瘤細胞毒活性、乙酰膽堿酶抑制活性、自由基清除、抑制植物種子萌發(fā)活性等實驗。主要完成內(nèi)容如下:分別從鼓槌石斛(Dendrobium chysotoxum)、箭葉秋葵(Abelmoschus sagittifolius)、彎錐香茶菜(Rabdosia loxothyrsa)、草玉梅(Anemone rivularis)中的4株鏈霉菌YIM66142、YIM66047、 YIM66262、YIM67032中共分離得到80個化合物,其中4個新化合物,化合物類型包含除莠菌素(herbicidin)類,nonactic acid類,大環(huán)酯肽類,蒽醌類,異黃酮類,環(huán)肽,核苷等;衔飉edelamine C、 herbicidin B對枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis表現(xiàn)出較好的抑菌活性,MICs均為32 μg/mL; desotamide對B. subtilis和大腸桿菌Escherichia coli表現(xiàn)出較好抑菌活性,MICs為64 μg/mL,還對金黃色葡萄球菌Staphylococcus aureus表現(xiàn)出微弱的抑制活性,MIC為128μg/mL。Herbicidins類化合物均表現(xiàn)出對甘藍種子發(fā)芽的抑制活性,首次對2'-O-demethylherbicidin F和8'-epi-herbicidin F的種子發(fā)芽的抑制活性進行研究,MICs均為12.5-50μg/mL。對分離到的部分蒽醌類化合物進行光動力抑菌活性研究,結(jié)果表明在光誘導下,蒽醌類化合物的抑菌能力有不同程度的增強,大黃酚對S. aureus的MIC從512μg/mL下降至32μgg/mL,對E. coli的MIC從128 μg/mL下降至8 μg/mL; kwanzoquinone G對E. coli的MIC從512μg/mL下降至8 μg/mL。分別從三七莖(Panax notoginseng)、鐕水鱉葉(Hydrocharis dubia)、天麻(Gastrodia elata)中的3株內(nèi)生真菌中分離到化合物38個,其中3個新化合物,其類型包括alternariols類化合物、腦酰胺、倍半萜、環(huán)肽、蒽醌等類型。莖-8菌株中的化合物alternariol、1-hydroxymethyl-alternariol monomethyl ether表現(xiàn)出良好的清除自由基的能力,IC_(50)為12 μg/mL;化合物1-hydroxymethyl-alternariol monomethyl ether, α-acetylorcinol和cerebroside C表現(xiàn)出了對甘藍種子萌發(fā)的抑制活性,對其發(fā)芽和生長產(chǎn)生了一定的影響,MICs均為小于3 μg/mL。 T2-10菌株中的questin表現(xiàn)出了對B. subtilis, S. aureus和E. coli的抑制活性,其MICs分別為128、64、64μg/mL。論文最后對近十年來陸地和海洋中的稀有放線菌的次生代謝產(chǎn)物的研究進行了綜述,文獻表明多數(shù)代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)復雜并顯示多種生物活性,為今后從稀有放線菌中尋找活性先導化合物提供參考。
【圖文】:
層析色譜分析,采用3個不同的展開劑系統(tǒng),,分別為石油憸/丙麗(4:1,V/V)、氯逡逑仿/甲醇(9:1和4:1,V/V)。在巧光燈下觀察化C分析結(jié)果后,用茵香醒-硫酸進行逡逑顯色,結(jié)果如圖1-2所示。從IXC的照片可得出,漢r邸卿罕:essp.YIM66142的逡逑茵香酵硫酸顯色結(jié)果與其他菌株有較大差別,因此將其作為目標菌株。逡逑[石被:刷>4;邋1邋1逡逑I逡逑I邐1巧:柿4;邋1逡逑焌涯I逡逑櫝銷銀.邐*化郵:1:;逡逑A嫌1^.如e唬叔義賢跡保泊紊徊锏幕稈〗峁義希疲椋紓酰潁邋澹保插澹裕瑁邋澹椋澹笊劍簦簀澹錚駑澹悖瑁澹恚椋悖幔戾澹螅悖潁澹澹睿椋睿玨澹猓澹裕蹋緬義希睳2代謝產(chǎn)物生物活性篩選結(jié)果逡逑將加入各菌株發(fā)酵液提取物和病原菌的培養(yǎng)皿放在28邋’C的培養(yǎng)室中恒溫培逡逑養(yǎng)2d,觀察各菌株提取物對指示菌的生長抑制情況,并記錄抑菌圈大小。結(jié)果表逡逑4逡逑
邐第一章鼓植石解內(nèi)生鏈霉菌YIM66142次生代謝產(chǎn)物及活性研巧邐逡逑明YIM66142對?和=七病原菌10090501和10090506具有一定的抑制活性。逡逑活性篩選結(jié)果見圖1-3和表1-1。逡逑表レl菌株篩選抑菌活性結(jié)果(單位:cm)*逡逑Table邋1-1邋The邋results邋of邋bioactivity邋screening邋(Scale:邋cm)逡逑病原菌邐YIM66142 ̄YIM66047逡逑Fusarium邋solani邐1.4邐-逡逑Fusarium邋oxysporum邐0.5邐-逡逑10090501邐1.9邐0.8逡逑10090504邐-邐-逡逑10090506邐0.8邐-逡逑100914-2邐-邐-逡逑29-3邐-邐-逡逑*注:表中數(shù)值為抑茜圈大小,包括了打孔鐵板所含孔徑,表示沒有抑制活性。逡逑
【學位授予單位】:云南大學
【學位級別】:博士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:Q936
本文編號:2705549
【圖文】:
層析色譜分析,采用3個不同的展開劑系統(tǒng),,分別為石油憸/丙麗(4:1,V/V)、氯逡逑仿/甲醇(9:1和4:1,V/V)。在巧光燈下觀察化C分析結(jié)果后,用茵香醒-硫酸進行逡逑顯色,結(jié)果如圖1-2所示。從IXC的照片可得出,漢r邸卿罕:essp.YIM66142的逡逑茵香酵硫酸顯色結(jié)果與其他菌株有較大差別,因此將其作為目標菌株。逡逑[石被:刷>4;邋1邋1逡逑I逡逑I邐1巧:柿4;邋1逡逑焌涯I逡逑櫝銷銀.邐*化郵:1:;逡逑A嫌1^.如e唬叔義賢跡保泊紊徊锏幕稈〗峁義希疲椋紓酰潁邋澹保插澹裕瑁邋澹椋澹笊劍簦簀澹錚駑澹悖瑁澹恚椋悖幔戾澹螅悖潁澹澹睿椋睿玨澹猓澹裕蹋緬義希睳2代謝產(chǎn)物生物活性篩選結(jié)果逡逑將加入各菌株發(fā)酵液提取物和病原菌的培養(yǎng)皿放在28邋’C的培養(yǎng)室中恒溫培逡逑養(yǎng)2d,觀察各菌株提取物對指示菌的生長抑制情況,并記錄抑菌圈大小。結(jié)果表逡逑4逡逑
邐第一章鼓植石解內(nèi)生鏈霉菌YIM66142次生代謝產(chǎn)物及活性研巧邐逡逑明YIM66142對?和=七病原菌10090501和10090506具有一定的抑制活性。逡逑活性篩選結(jié)果見圖1-3和表1-1。逡逑表レl菌株篩選抑菌活性結(jié)果(單位:cm)*逡逑Table邋1-1邋The邋results邋of邋bioactivity邋screening邋(Scale:邋cm)逡逑病原菌邐YIM66142 ̄YIM66047逡逑Fusarium邋solani邐1.4邐-逡逑Fusarium邋oxysporum邐0.5邐-逡逑10090501邐1.9邐0.8逡逑10090504邐-邐-逡逑10090506邐0.8邐-逡逑100914-2邐-邐-逡逑29-3邐-邐-逡逑*注:表中數(shù)值為抑茜圈大小,包括了打孔鐵板所含孔徑,表示沒有抑制活性。逡逑
【學位授予單位】:云南大學
【學位級別】:博士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:Q936
【引證文獻】
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1 毛涵;陳婧;代飛;湯新慧;薛菲;;中華補血草內(nèi)生真菌發(fā)酵物的抑菌和抗氧化活性[J];江蘇農(nóng)業(yè)科學;2018年08期
本文編號:2705549
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