【摘要】：胚胎干細胞(ESCs)取自囊胚的內(nèi)細胞團,它具有分化成為多種多能干細胞和終端分化的體細胞的潛能,并且具有自我更新的能力,因此一直受到研究人員的青睞。近年來,胚胎干細胞的研究取得了飛躍性的發(fā)展。隨著胚胎干細胞定向分化成各種終端細胞的技術(shù)日趨成熟,它在醫(yī)學和臨床上的應用前景也越來越明朗。同時,在基因組學、蛋白質(zhì)組學、生物信息學發(fā)展的影響下,胚胎干細胞保持其分化潛能的復雜調(diào)控網(wǎng)絡(luò)也日趨清晰地展現(xiàn)在人們眼前。然而,胚胎干細胞在臨床應用上面臨著來源有限、倫理爭議等限制。體細胞重編程技術(shù)可以得到與胚胎干細胞(ESCs)特性相似的誘導性多能性干細胞(iPS)。誘導性多能干細胞技術(shù)的出現(xiàn)彌補了胚胎干細胞在應用領(lǐng)域的不足。成體細胞的來源十分廣泛、取材方便,并且不具有倫理方面的困擾。這為今后干細胞在臨床上的大規(guī)模應用提供了可能性。同時,這項技術(shù)打破了人們對高等動物細胞的固有認識,人們第一次發(fā)現(xiàn)高等動物的體細胞也可以在一定條件下轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂蟹只瘽撃艿募毎?為后來的研究提供了啟發(fā)性的思路。體細胞重編程的效率往往較低,許多基因?qū)υ撨^程起到抑制作用,p53就是其中之一,但是其中的分子機制并不完全明朗。我們在研究中發(fā)現(xiàn),p53的一個直接靶基因,PHLDA3,具有抑制體細胞重編程的功能。該基因在之前的研究中主要被視為一個抑癌基因,而我們發(fā)現(xiàn)它參與了 iPS誘導過程。PHLDA3在iPS、R1、E14等干細胞當中含量相對于體細胞更低,并且該基因的表達在體細胞重編程的過程中逐漸下降,而在RA誘導胚胎干細胞分化和擬胚體形成過程中表達上升,暗示它可能與體細胞重編程和干細胞的多能性有關(guān)。過表達PHLDA3會明顯降低iPS誘導效率,而它的敲低會使誘導效率提高。在體細胞重編程過程中,PHLDA3會抑制AKT的活性,從而激活AKT下游GSK3 β的活性。而抑制GSK3β可以回復PHLDA3過表達所造成的體細胞重編程效率下降,說明PHLDA3通過激活GSK3β抑制體細胞重編程。此外,在體細胞重編程過程當中PHLDA3也受到p53的正調(diào)控,并且可以替代一部分p53對體細胞重編程的抑制作用。另外,Oct4會對PHLDA3的表達起到負調(diào)控。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：中國科學技術(shù)大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：Q23

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 ;Identification of two distinct transactivation domains in the pluripotency sustaining factor nanog[J];Cell Research;2003年06期

2 ;Stem cell pluripotency and transcription factor Oct4[J];Cell Research;2002年Z2期

，

本文編號：2482104