【摘要】：整合素αⅡbβ3介導的"outside-in(outside-in)”的信號轉導被廣泛的認為是擴大血小板激活反應的,然而越來越多的證據(jù)表明"outside-in"的信號轉導在某些情況下可以抑制血小板的激活。為了弄明白整合素αⅡbβ3介導的"outside-in"信號通路對血小板激活的確切作用,我們通過血小板聚集儀,流式細胞儀,免疫印跡及免疫共沉淀等方法發(fā)現(xiàn)(1)整合素αⅡbβ3的抑制劑RUC2和RGD-peptide對低劑量CRP和TRAP引起的血小板ATP釋放起促進作用。說明整合素αⅡbβ3介導的"outside-in"信號通路抑制血小板ATP釋放。因為血小板釋放對血小板聚集起擴大作用,所以整合素αⅡbβ3介導的"outside-in"信號通路具有負調控血小板聚集的作用。(2)在ADP為刺激劑的情況下,血小板聚集時Talin和Kindlin-3結合到整合素β3亞基上,當血小板解聚時,Talin和Kindlin-3從整合素p3上脫落下來。加入RGD-peptide抑制Talin和Kindlin-3從整合素αⅡbβ3上脫落。說明是整合素αⅡbβ3介導的"outside-in"信號通路參與調節(jié)Talin和Kindlin-3從整合素β3上脫落。(3)當刺激劑誘導整合素αⅡbβ3激活時,Akt發(fā)生磷酸化；而激活的整合素和配體纖維蛋白原結合,血小板發(fā)生聚集后,Akt發(fā)生去磷酸化,PI3K信號通路失活。加入整合素抑制劑RGD-peptide后,Akt的去磷酸化作用被抑制。說明Akt失活是由整合素αⅡbβ "outside-in"信號通路介導的。(4)我們加入SHIP-1抑制劑3AC后,Akt去磷酸化作用被抑制。說明SHIP-1參與調節(jié)Akt的去磷酸化作用。(5)SHIP-1的抑制劑3AC抑制血小板解聚,同時恢復ADP誘導的血小板ATP釋放,而且能消除整合素介導的從外到內信號通路對血小板ATP釋放的抑制效應。說明整合素介導的從外到內的信號通路通過激活SHIP-1,進而抑制血小板ATP的釋放,所以SHIP-1是血小板聚集的負調控蛋白。這些結果暗示整合素αⅡbβ3介導的"outside-in"的信號轉導可能啟動了一個負反饋通路通過促進Talin和Kindlin-3從整合素上脫落使得整合素失活和激活SHIP-1導致P13K/Akt信號通路失活這兩個方面抑制整合素的激活。
[Abstract]:The signal transduction of "outside-in (outside-in)" mediated by integrin 偽 鈪，

本文編號：2478566