本文關(guān)鍵詞：mTORC1在鞭毛蛋白誘導(dǎo)炎性細(xì)胞因子表達(dá)中的調(diào)控作用與機(jī)制，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《青島大學(xué)》 2012年

鞭毛蛋白在松萎蔫病中的作用機(jī)理研究

張蕾  

【摘要】：為了研究鞭毛蛋白在松萎蔫病中的具體作用,本文首先對(duì)松材線蟲攜帶的熒光假單胞菌(Pseudomonas fluorescens GcM5-1A)分泌的鞭毛蛋白對(duì)黑松愈傷組織細(xì)胞的致死方式進(jìn)行研究。結(jié)果表明,經(jīng)過鞭毛蛋白處理的黑松愈傷組織細(xì)胞細(xì)胞核解體、基因組DNA發(fā)生降解,但無明顯的梯形條帶形成,因此推測(cè)鞭毛蛋白對(duì)黑松細(xì)胞的處死方式為非典型性細(xì)胞凋亡。其次,本文還研究了鞭毛蛋白誘導(dǎo)的黑松細(xì)胞死亡對(duì)松材線蟲及其攜帶的熒光假單胞菌GcM5-1A的繁殖影響,結(jié)果表明,鞭毛蛋白預(yù)處理黑松愈傷組織細(xì)胞再接種松材線蟲較正常的愈傷組織細(xì)胞能促進(jìn)松材線蟲的繁殖,且在0～9 d范圍內(nèi),處理時(shí)間越長(zhǎng)則松材線蟲的繁殖速度越快；同時(shí),鞭毛蛋白預(yù)處理的黑松愈傷組織細(xì)胞較正常的愈傷組織對(duì)松材線蟲攜帶熒光假單胞菌的繁殖也有一定的促進(jìn)作用,用加熱致死黑松愈傷組織分別接種松材線蟲及其攜帶的熒光假單胞菌獲得了相似的結(jié)果；將松材線蟲直接接種于鞭毛蛋白溶液并培養(yǎng)5 d,結(jié)果發(fā)現(xiàn)接入松材線蟲的鞭毛蛋白較對(duì)照組明顯減少,條帶無降解的現(xiàn)象,并且松材線蟲的數(shù)量有明顯的增加,推測(cè)可能是松材線蟲因攝食了鞭毛蛋白而促進(jìn)其繁殖。上述研究表明,鞭毛蛋白不僅通過誘導(dǎo)黑松細(xì)胞的死亡對(duì)松材線蟲及其攜帶致病熒光假單胞菌的繁殖具有一定的促進(jìn)作用,而且鞭毛蛋白本身可以提供松材線蟲繁殖的營(yíng)養(yǎng)而促進(jìn)松材線蟲的繁殖,這為松萎蔫病的松材線蟲與細(xì)菌復(fù)合致病學(xué)說提供了進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)證據(jù)。 為了進(jìn)一步研究鞭毛蛋白的作用機(jī)理,本文還開展了熒光假單胞菌GcM5-1A (P. fluorescens GcM5-1A)鞭毛蛋白基因的克隆與重組表達(dá)的研究,結(jié)果表明,熒光假單胞菌GcM5-1A鞭毛蛋白基因的開放讀框全長(zhǎng)1659 bp,共編碼552氨基酸殘基。熒光假單胞菌GcM5-1A (P. fluorescens GcM5-lA)鞭毛蛋白基因經(jīng)PCR擴(kuò)增后克隆到表達(dá)載體pET-15b上,構(gòu)建表達(dá)載體pET-15b-fla。將pET-15b-fla轉(zhuǎn)化E.coliBL21(DE3)構(gòu)建工程菌,IPTG誘導(dǎo)重組鞭毛蛋白在工程菌中的高效表達(dá),通過親和層析對(duì)重組鞭毛蛋白初步純化。細(xì)胞免疫熒光分析表明,鞭毛蛋白與黑松細(xì)胞存在直接相互作用,我們懷疑在黑松細(xì)胞膜上可能存在鞭毛蛋白的受體蛋白,從而引起細(xì)胞凋亡,為此,本文還探討了黑松細(xì)胞膜蛋白的提取方法,為分離鑒定黑松細(xì)胞膜上可能存在的鞭毛蛋白受體打下基礎(chǔ)。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：S763
【目錄】：

下載全文 更多同類文獻(xiàn)

CAJ全文下載

(如何獲取全文？ 歡迎：購(gòu)買知網(wǎng)充值卡、在線充值、在線咨詢)

CAJViewer閱讀器支持CAJ、PDF文件格式

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王慧利,韓素芬,趙博光;松材線蟲攜帶細(xì)菌在疫區(qū)和寄主中的分布及致病性研究[J];北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2004年04期

2 趙博光,梁波,趙林果,徐梅;松材線蟲對(duì)其攜帶的一株致病細(xì)菌產(chǎn)毒的影響[J];北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2005年06期

3 Alexander Yu. RYSS;Oleg A. KULINICH;Jack R. SUTHERLAND;;Pine wilt disease: a short review of worldwide research[J];Forestry Studies in China;2011年02期

4 李盛楠;郭道森;趙博光;李榮貴;;熒光假單胞菌鞭毛蛋白對(duì)黑松細(xì)胞的致死作用[J];西北植物學(xué)報(bào);2008年11期

5 葉建仁，吳小芹;樹木抗病的生理生化學(xué)研究進(jìn)展[J];林業(yè)科學(xué)研究;1996年03期

6 劉偉,楊寶君,徐福元,葛明宏,張培,王成法;松材線蟲病樹早期診斷的研究 Ⅰ.馬尾松、黑松松材線蟲病樹的早期診斷[J];林業(yè)科學(xué)研究;1998年05期

7 郭道森,趙博光,李周直;松材線蟲病致病機(jī)理的研究進(jìn)展[J];南京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2000年04期

8 趙博光,郭道森,高蓉;松材線蟲攜帶細(xì)菌部位的電鏡觀察[J];南京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2000年04期

9 趙博光,郭道森,高蓉,郭建;細(xì)菌分離物B619與松材線蟲病關(guān)系的初步研究[J];南京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2000年04期

10 洪英娣,曹越,趙博光,韓正敏;松材線蟲攜帶細(xì)菌的鑒定和毒性研究[J];南京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2002年05期

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 王維華;熒光假單胞菌毒蛋白的分離純化與松材線蟲的無異培養(yǎng)[D];南京林業(yè)大學(xué);2004年

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 游銀偉,汪天虹,岳壽松;海洋青霉(Penicilliumsp.)FS010441的形態(tài)學(xué)觀察和產(chǎn)纖維素酶性質(zhì)初步研究[J];山東農(nóng)業(yè)科學(xué);2005年01期

2 李瑞;;松材線蟲伴生細(xì)菌與松樹萎蔫病關(guān)系的初步研究[J];山東農(nóng)業(yè)科學(xué);2010年04期

3 李瑞國(guó);朱秀敏;楊慧;;不同萌發(fā)期綠豆芽蛋白質(zhì)含量的測(cè)定及營(yíng)養(yǎng)價(jià)值分析[J];山東農(nóng)業(yè)科學(xué);2011年01期

4 葛宏華,孫莉?qū)?張其瑞;家蠶血淋巴蛋白的發(fā)育變化和BmLSP的純化[J];安徽大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2001年03期

5 孔小衛(wèi),李坤,江洪波;二甲亞砜對(duì)水稻浸種及苗期的后續(xù)效應(yīng)研究[J];安徽大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2002年03期

6 劉曉穎,丁毅;雞腦P物質(zhì)的制取及分析[J];安徽大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2003年01期

7 朱華慶,陳飛,謝惠安,張萍;熱擊對(duì)水稻(O.sativaL.)葉綠素a,b及POR同功酶的效應(yīng)[J];安徽大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);1998年04期

8 葉生梅;多菌聯(lián)合固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)酒糟菌體蛋白飼料的實(shí)驗(yàn)研究[J];安徽機(jī)電學(xué)院學(xué)報(bào);2001年04期

9 孔小衛(wèi);二甲亞砜(DMSO)對(duì)大豆萌發(fā)及幼苗期生理生化指標(biāo)的影響[J];安徽機(jī)電學(xué)院學(xué)報(bào);2002年04期

10 葉生梅,王嵐嵐,歐陽明;一株纖維素酶產(chǎn)生菌的固態(tài)發(fā)酵初步研究[J];安徽工程科技學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2003年01期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 周亞軍;康建波;劉妍菊;蘇丹;馬龍彪;;混合肉肌原纖維蛋白特性研究[A];管產(chǎn)學(xué)研助推食品安全重慶高峰論壇——2011年中國(guó)農(nóng)業(yè)工程學(xué)會(huì)農(nóng)產(chǎn)品加工及貯藏工程分會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)暨全國(guó)食品科學(xué)與工程博士生學(xué)術(shù)論壇論文集[C];2011年

2 龔加順;胡小靜;彭春秀;周紅杰;;普洱茶及其原料多糖分子組成及光譜學(xué)特性研究[A];經(jīng)濟(jì)發(fā)展方式轉(zhuǎn)變與自主創(chuàng)新——第十二屆中國(guó)科學(xué)技術(shù)協(xié)會(huì)年會(huì)（第二卷）[C];2010年

3 李強(qiáng);陳明;夏蕊蕊;張玉臻;;生物絮凝劑產(chǎn)生菌M-503的分離鑒定及絮凝特性研究[A];中國(guó)資源生物技術(shù)與糖工程學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2005年

4 付加雷;宋長(zhǎng)征;張更林;;殼聚糖／海藻酸鈉微囊對(duì)干擾素-tau的控釋作用[A];山東省藥學(xué)會(huì)2006年生化與生物技術(shù)藥物學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2006年

5 任慧霞;趙雪;聶曉燕;;健脾止遺片有效成分對(duì)家兔膀胱明膠酶的影響[A];山東省藥學(xué)會(huì)2006年生化與生物技術(shù)藥物學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2006年

6 鄒瑩;;硫酸乙酰肝素蛋白聚糖的提取[A];第十二屆山東省藥劑學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

7 張娟;趙利;魏麗;劉建濤;曾志將;;貯藏溫度和時(shí)間對(duì)蜂王漿水溶性蛋白質(zhì)的影響[A];中國(guó)養(yǎng)蜂學(xué)會(huì)蜜蜂飼養(yǎng)管理專業(yè)委員會(huì)第十三次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2007年

8 任慧霞;趙雪;聶曉燕;;健脾止遺片有效成分對(duì)家兔膀胱明膠酶作用的研究[A];2006第六屆中國(guó)藥學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2006年

9 劉桂林;龐虹;周昌清;;我國(guó)松材線蟲病的研究現(xiàn)狀及趨勢(shì)[A];當(dāng)代昆蟲學(xué)研究——中國(guó)昆蟲學(xué)會(huì)成立60周年紀(jì)念大會(huì)暨學(xué)術(shù)討論會(huì)論文集[C];2004年

10 梁軍;葉建仁;;森林病理學(xué)發(fā)展[A];2008-2009林業(yè)科學(xué)學(xué)科發(fā)展報(bào)告[C];2009年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 徐軍;富苯丙氨酸堿性短肽的發(fā)現(xiàn)及其對(duì)蛋白質(zhì)等電點(diǎn)和免疫交叉反應(yīng)的影響[D];華南理工大學(xué);2010年

2 陳義勇;樺褐孔菌多糖純化、結(jié)構(gòu)及其抗腫瘤機(jī)制研究[D];江南大學(xué);2010年

3 田壯;食品中甾體激素殘留免疫分析技術(shù)與方法研究[D];江南大學(xué);2010年

4 邵凌健;槐糖脂補(bǔ)料發(fā)酵及抗真菌、抗腫瘤活性的研究[D];山東大學(xué);2010年

5 田雪亮;松材線蟲和擬松材線蟲伴生細(xì)菌多樣性及生態(tài)功能研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2010年

6 遲雷;基于過程控制優(yōu)化的重組大腸桿菌高密度發(fā)酵研究[D];西北大學(xué);2011年

7 孫紅男;蘋果渣中多酚類物質(zhì)的高壓脈沖電場(chǎng)處理及其生物活性研究[D];北京林業(yè)大學(xué);2011年

8 馮敏毅;壬基酚對(duì)雄性花背蟾蜍抱對(duì)、精子及早期發(fā)育的影響[D];蘭州大學(xué);2011年

9 華杰;固定化酶膜反應(yīng)器藕合錯(cuò)流萃取色譜制備5’-核苷酸[D];中南大學(xué);2011年

10 陶晶;多功能菌劑的組合效應(yīng)研究及其抑菌物質(zhì)的特性和分離[D];石河子大學(xué);2009年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 周艷華;可溶性雞蛋殼膜蛋白與多肽的制備及其抗氧化活性的研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

2 冷一非;嗜熱鏈球菌抗噬菌體菌株的選育、培養(yǎng)及凍干發(fā)酵劑的研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

3 申君;桃蚜的抗藥性監(jiān)測(cè)、殺蟲劑的配方篩選及其增效生化機(jī)理的研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

4 杜學(xué)敏;蚯蚓纖溶酶的分離純化及部分組分的性質(zhì)[D];河北大學(xué);2007年

5 劉輝;紅曲霉發(fā)酵提高γ-氨基丁酸含量的研究[D];安徽工程大學(xué);2010年

6 洪偉;酪蛋白中血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)抑制肽的研究[D];安徽工程大學(xué);2010年

7 王美花;里氏木霉swollenin在米曲霉中的表達(dá)和純化[D];浙江理工大學(xué);2010年

8 張?jiān)?溫特曲霉PZ322產(chǎn)巖藻多糖酶的液態(tài)發(fā)酵條件研究[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

9 劉紅霞;小豆再生體系建立及鐵吸收基因轉(zhuǎn)化條件初步分析[D];甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

10 程小麗;同時(shí)分離大豆蛋白和油脂的反膠束體系研究[D];河南工業(yè)大學(xué);2010年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 趙博光,郭道森;松材線蟲攜帶的一株細(xì)菌分離及其致病性[J];北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2004年01期

2 郝霞;祝建;;植物管狀分子發(fā)育中的細(xì)胞凋亡[J];西北植物學(xué)報(bào);2006年05期

3 潘耀謙,于艷,夏志平;檢測(cè)細(xì)胞凋亡的常用方法[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2001年02期

4 張淑珍;植物病原菌毒素研究進(jìn)展[J];黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué);2001年02期

5 蔣巧根,諸建勇,王旭輝;淺談松材線蟲病檢疫[J];江蘇林業(yè)科技;1999年03期

6 趙振東,胡樨萼,李冬梅,徐福元,胡貴賢,孫震,劉先章;抗松材線蟲病馬尾松種源化學(xué)成分與抗性機(jī)理研究(第Ⅲ報(bào))——接種松材線蟲引起抗性馬尾松種源中性萜類含量變化關(guān)系的研究[J];林產(chǎn)化學(xué)與工業(yè);2001年03期

7 徐剛，粟子安;黑松感染線蟲后樹干中萜類成分的變化[J];林產(chǎn)化學(xué)與工業(yè);1994年03期

8 楊寶君;;松樹上線蟲的鑒定[J];林業(yè)科學(xué);1985年03期

9 曹越,韓正敏,李傳道;松材線蟲病感病松樹中致萎毒性物質(zhì)的研究[J];林業(yè)科學(xué);2001年04期

10 趙博光;苦豆堿對(duì)松材線蟲的殺線活性[J];林業(yè)科學(xué);1996年03期

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 梁波;松材線蟲攜帶致病細(xì)菌產(chǎn)生的毒素的初步研究[D];南京林業(yè)大學(xué);2003年

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 王娟,閻大來,李季倫;巴西固氮螺菌鞭毛調(diào)節(jié)基因flbD鑒定[J];科學(xué)通報(bào);2001年15期

2 劉湛軍;梁海鷹;吳灶和;簡(jiǎn)紀(jì)常;;2種弧菌鞭毛蛋白的分離純化與鑒定[J];吉首大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2008年06期

3 張曉佩;方勤美;龔暉;林天龍;;遲鈍愛德華菌鞭毛基因克隆表達(dá)及其免疫學(xué)活性分析[J];福建農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào);2012年02期

4 曹軍平，焦新安，杜元釗，，劉秀梵，張如寬;沙門氏菌鞭毛蛋白的提純與鑒定[J];中國(guó)畜禽傳染病;1996年01期

5 焦新安,徐衛(wèi)平,曹軍平,潘志明,張國(guó)強(qiáng),高崧,吳長(zhǎng)新,文其乙,張如寬,劉秀梵;沙門氏菌鞭毛蛋白共同抗原的診斷價(jià)值探討[J];揚(yáng)州大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);1998年01期

6 ;[J];;年期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 吳林;Shewanella oneidensis鞭毛組裝的分子特性及其非運(yùn)動(dòng)褶皺表型的形成機(jī)理[D];浙江大學(xué);2011年

2 鮑文蕾;mTORC1在鞭毛蛋白誘導(dǎo)炎性細(xì)胞因子表達(dá)中的調(diào)控作用與機(jī)制[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2015年

3 羅淼;綠膿桿菌RNaseE抑制因子RraA和鞭毛hook組裝蛋白FlgD的結(jié)構(gòu)和功能研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2010年

4 叢延廣;弗氏枸椽酸桿菌群集運(yùn)動(dòng)的分子機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2004年

5 王欣瑩;問號(hào)鉤端螺旋體鞭毛相關(guān)基因flhA、flhB和fliR突變株的構(gòu)建及其功能的初步研究[D];吉林大學(xué);2006年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 胡明冬;鞭毛蛋白分離純化及其在膿毒癥肺損傷中作用的初步探討[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2005年

2 饒星;沙門菌三種血清型鞭毛基因重組及免疫學(xué)檢測(cè)方法研究[D];吉林大學(xué);2008年

3 惠星星;空腸彎曲菌鞭毛輸出系統(tǒng)關(guān)鍵基因flhA突變株的構(gòu)建及其功能的初步研究[D];江南大學(xué);2010年

4 游猛;鼠傷寒沙門菌鞭毛蛋白作為免疫佐劑的研究[D];揚(yáng)州大學(xué);2010年

5 崔俊文;鞭毛細(xì)菌游動(dòng)機(jī)理及其模型研究[D];上海交通大學(xué);2007年

6 張蕾;鞭毛蛋白在松萎蔫病中的作用機(jī)理研究[D];青島大學(xué);2012年

7 林丹丹;綠膿桿菌鞭毛蛋白FlgE的重組表達(dá)及初步活性鑒定[D];濟(jì)南大學(xué);2013年

8 夏曉燕;幽門螺桿菌鞭毛基因的克隆和表達(dá)[D];鄭州大學(xué);2003年

9 楊永利;幽門螺桿菌鞭毛基因PCR-RFLP分析及致病性研究[D];鄭州大學(xué);2002年

10 向陽芳;新型布洛芬衍生物的抗炎活性篩選及機(jī)制初步研究[D];中南大學(xué);2014年

  本文關(guān)鍵詞：mTORC1在鞭毛蛋白誘導(dǎo)炎性細(xì)胞因子表達(dá)中的調(diào)控作用與機(jī)制，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：242725