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開菲爾中半乳糖霉菌的分離鑒定及其與開菲爾乳桿菌相互作用研究

發(fā)布時(shí)間:2018-04-19 05:14

  本文選題:開菲爾 + 半乳糖霉菌; 參考:《吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)》2016年博士論文


【摘要】:現(xiàn)代研究表明開菲爾具有抗腫瘤活性,降低血壓、血脂和血糖、抗菌活性、腸胃保護(hù)、對抗炎癥、促進(jìn)脂肪消耗以及抗氧化活性等生理功能。但是開菲爾產(chǎn)品菌相復(fù)雜,發(fā)酵過程不易控制,產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定,難于工業(yè)化生產(chǎn)。因此對開菲爾粒中菌相的研究逐漸成為國內(nèi)外研究學(xué)者重點(diǎn)關(guān)注的領(lǐng)域。本文旨在采用傳統(tǒng)方法和分子生物學(xué)方法分離鑒定水開菲爾中的優(yōu)勢菌,并對其結(jié)構(gòu)、性能以及其相互作用進(jìn)行研究,為開菲爾的開發(fā)利用提供理論依據(jù)。本文首先成功從水開菲爾中分離了1株酵母菌菌株wk1,經(jīng)傳統(tǒng)方法和DNA序列分析可確定該酵母菌為半乳糖霉菌(Galactomyces geotrichum)。進(jìn)一步對其與開菲爾乳桿菌(Lactobacillus Kefir)12-2共生關(guān)系研究,結(jié)果發(fā)現(xiàn)半乳糖霉菌wk1與開菲爾乳桿菌12-2之間結(jié)合緊密,存在著較為明顯的相互作用關(guān)系,其次對分離菌株半乳糖霉菌wk1表面物質(zhì)性能進(jìn)行了分析,發(fā)現(xiàn)其細(xì)胞表面為強(qiáng)疏水性,并且為堿性的電子供體。熱、乙酸、氫氧化鈉和氯化鋰處理對其表明性能有不同的影響。熱處理可以使半乳糖霉菌wk1細(xì)胞表面的疏水性和供電子性能均有明顯下降,尤其加熱時(shí)間在5-10min之間,下降近50%;當(dāng)加熱時(shí)間小于5min和大于10min時(shí),無明顯變化。利用乙酸和氫氧化鈉處理則會使其表面呈強(qiáng)親水性,但利用氯化鋰處理則不會影響其表面的疏水性,但是會提高細(xì)胞表面的酸性和吸電子性能。再次對分離菌株半乳糖霉菌wk1的自凝聚性能及其與開菲爾乳桿菌12-2之間的共凝聚性能進(jìn)行了研究。未經(jīng)過預(yù)處理的半乳糖霉菌wk1表現(xiàn)出了極強(qiáng)的自凝聚性能,在培養(yǎng)初期(1h)半乳糖霉菌的自凝聚比例就達(dá)到了70%左右,而后隨著時(shí)間的延長迅速增長,在培養(yǎng)3h后其自凝聚比例高達(dá)97.48%,在4h以后則完全自凝聚。半乳糖霉菌wk1與開菲爾乳桿菌12-2之間的共凝聚性研究結(jié)果發(fā)現(xiàn):在培養(yǎng)初期,半乳糖霉菌wk1與開菲爾乳桿菌12-2的共凝聚現(xiàn)象并不明顯,僅有約7%左右,隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長,1-3h內(nèi)半乳糖霉菌wk1細(xì)胞與開菲爾乳桿菌12-2的自凝聚能力迅速得到提升,而當(dāng)處于培養(yǎng)期的中后期時(shí)(3-5h),半乳糖霉菌wk1細(xì)胞與開菲爾乳桿菌12-2的共凝聚速率大幅減緩,培養(yǎng)時(shí)間為5h時(shí)有36%左右的半乳糖霉菌wk1細(xì)胞與開菲爾乳桿菌12-2發(fā)生了共凝聚現(xiàn)象。熱、乙酸、氫氧化鈉和氯化鋰處理對其自凝聚和共凝聚性能表現(xiàn)出不同的影響。加熱處理在培養(yǎng)初期削弱半乳糖霉菌的自凝聚性能以及與開菲爾乳桿菌12-2的共凝聚性能,但在反應(yīng)后期恢復(fù)較快。氫氧化鈉可以在一定程度上削弱半乳糖霉菌的自凝聚性能,但效果不顯著,但明顯削弱了半乳糖霉菌wk1與開菲爾乳桿菌12-2的共凝聚性。而氫氧化鈉濃度對這兩種性能的影響程度變化不大。隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長,乙酸對處于培養(yǎng)初期的半乳糖霉菌的自凝聚性能和與開菲爾乳桿菌的共凝聚性能具有一定程度的恢復(fù)能力,但仍處于較低水平。乙酸的濃度對這兩種性能的影響程度變化不大。氯化鋰對半乳糖霉菌的自凝聚性能影響較為顯著,不僅使其自聚性能大大降低,而且在整個培養(yǎng)期內(nèi)的恢復(fù)速率也維持在勻速水平。與自凝聚性能不同的是,氯化鋰對培養(yǎng)初期半乳糖霉菌與開菲爾乳桿菌的共聚性能的削弱作用并不明顯,但是卻可以在很大程度上抑制其在培養(yǎng)后期的恢復(fù)速率。同樣,氯化鋰濃度對這兩種性能的影響程度變化不大。綜上研究表明,本文分離鑒定的酵母菌株半乳糖霉菌wk1是水開菲爾粒凝聚形成的重要菌種之一,其細(xì)胞表面為強(qiáng)疏水性,并且為堿性電子供體,具有較強(qiáng)的自聚能力和與其他細(xì)菌的共聚能力,這可能與細(xì)胞表面活性物質(zhì)多糖和表面蛋白質(zhì)有關(guān)。
[Abstract]:In this paper , it has been proved that Kefir has the physiological functions of anti - tumor activity , lowering blood pressure , blood lipid and blood sugar , antibacterial activity , gastrointestinal protection , anti - inflammation , promoting fat consumption and anti - oxidation activity . The results showed that there was no significant change in the self - coagulation ability of the strains of galactose mildew wk1 in the early stage of culture . This may be related to cell surface active material polysaccharides and surface proteins .

【學(xué)位授予單位】:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:TS201.3

【參考文獻(xiàn)】

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8 張U,

本文編號:1771722


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