本文關(guān)鍵詞：ClipR-59在小鼠肌肉細(xì)胞分化過(guò)程中的功能研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)》 2015年

ClipR-59在小鼠肌肉細(xì)胞分化過(guò)程中的功能研究

孫英民  

【摘要】：ClipR-59(Cytoplasmic linker protein related59kD protein)是一種細(xì)胞膜蛋白,它有四個(gè)結(jié)構(gòu)域,分別為：N端富含谷氨酸和脯氨酸的E/P結(jié)構(gòu)域,Ankryin repeat結(jié)構(gòu)域,CAP-Gly(cytoskeleton-associated protein glycine-rich domain)結(jié)構(gòu)域和與細(xì)胞膜作用的Membrane Binding Domain即MBD結(jié)構(gòu)域。在脂肪細(xì)胞內(nèi),ClipR-59與Akt相互作用并增加其在細(xì)胞膜上的分布,提高AS160的磷酸化水平,促進(jìn)Glut4分子的細(xì)胞膜移位；ClipR-59與TNF受體作用,通過(guò)調(diào)控TNFα信號(hào)傳導(dǎo),進(jìn)行調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡。研究證實(shí),ClipR-59基因敲除小鼠在胚胎發(fā)育的后期會(huì)由于窒息而死亡。本研究就是以ClipR-59為誘餌,通過(guò)酵母雙雜交系統(tǒng),尋找與它相互作用的新蛋白,揭示其新功能,并闡釋其機(jī)制。 前人研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),Elmo2通過(guò)Elmo2-Dock180-Rac1信號(hào)通路調(diào)控肌細(xì)胞的融合。在篩選得到同ClipR-59相互作用的蛋白中,最終選擇了Elmo2蛋白進(jìn)行后續(xù)研究。研究發(fā)現(xiàn)ClipR-59同Elmo2相互作用,通過(guò)調(diào)節(jié)Rac1的活性進(jìn)行調(diào)控肌細(xì)胞的融合。 首先,免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)證實(shí),ClipR-59;和Elmo2在體內(nèi)和體外都是相互作用的,通過(guò)免疫熒光實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)ClipR-59和Elmo2在細(xì)胞內(nèi)有相同的定位分布。其次,以C2C12細(xì)胞為體外研究模型,觀察ClipR-59在肌肉細(xì)胞分化過(guò)程中的表達(dá)。結(jié)果發(fā)現(xiàn),ClipR-59蛋白的表達(dá)量逐漸增加,并與分化標(biāo)記蛋白Myogenin, Myosin Heavy Chain的表達(dá)量變化趨勢(shì)一致。用表達(dá)ClipR-59shRNA的慢病毒感染C2C12細(xì)胞,誘導(dǎo)分化結(jié)果顯示,抑制ClipR-59的表達(dá),C2C12細(xì)胞的分化也受到抑制；并且抑制ClipR-59的表達(dá)不影響分化標(biāo)記蛋白Myogenin的表達(dá)。這說(shuō)明ClipR-59影響的是肌肉細(xì)胞分化后期所發(fā)生的融合過(guò)程,而不是早期分化基因的表達(dá)。再次,分別對(duì)Elmo2和ClipR-59蛋白做一系列去掉不同結(jié)構(gòu)域的突變,通過(guò)GST (Glutathione S-transferase)-Pull down實(shí)驗(yàn)證實(shí)Elmo2通過(guò)PH結(jié)構(gòu)域同ClipR-59相互作用,ClipR-59通過(guò)N端的E/P結(jié)構(gòu)域同Elmo2相互作用。通過(guò)Co-IP實(shí)驗(yàn)證實(shí)ClipR-59, Elmo2和Dock180形成一個(gè)異源復(fù)合體。通過(guò)GST-CRIB(Cdc24/Rac1interactive binding domain of p21activated kinase) pull down實(shí)驗(yàn)證明：過(guò)表達(dá)Elmo2和ClipR-59將增加Racl活性；在C2C12細(xì)胞內(nèi),干涉ClipR-59的表達(dá)將抑制Racl的活性。接下來(lái),分別用表達(dá)ClipR-59和ΔE/PClipR-59的逆轉(zhuǎn)錄病毒感染C2C12細(xì)胞,分化結(jié)果顯示,過(guò)表達(dá)ClipR-59可以增加C2C12細(xì)胞的融合,與對(duì)照相比,融合系數(shù)增加約10%;而過(guò)表達(dá)與Elmo2沒(méi)有作用的ΔE/P ClipR-59則抑制C2C12細(xì)胞的融合。在表達(dá)ClipR-59shRNA的C2C12細(xì)胞內(nèi),過(guò)表達(dá)ClipR-59可以逆轉(zhuǎn)C2C12細(xì)胞的融合,而ΔE/P ClipR-59卻達(dá)不到這種效果,說(shuō)明ClipR-59依賴(lài)于同Elmo2相互作用調(diào)控肌細(xì)胞的融合。最后,通過(guò)GST-Pull down實(shí)驗(yàn)證實(shí)了Insulin調(diào)控Elmo2同ClipR-59之間的相互作用；用帶P-Tyr抗體的Beads IP Elmo2, Western Blot結(jié)果顯示,Elmo2是一種酪氨酸被磷酸化修飾的蛋白；通過(guò)點(diǎn)突變分析得知,主要的磷酸化位點(diǎn)為第713位的酪氨酸。 綜上,我們研究發(fā)現(xiàn)ClipR-59同Elmo2目互作用,通過(guò)調(diào)節(jié)Racl的活性進(jìn)行調(diào)控肌細(xì)胞的融合。這項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)為進(jìn)一步研究ClipR-59在肌肉發(fā)育過(guò)程中的作用提供理論依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：Q343
【目錄】：

下載全文 更多同類(lèi)文獻(xiàn)

CAJ全文下載

(如何獲取全文？ 歡迎：購(gòu)買(mǎi)知網(wǎng)充值卡、在線(xiàn)充值、在線(xiàn)咨詢(xún))

CAJViewer閱讀器支持CAJ、PDF文件格式

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 張文剛;楊潤(rùn)軍;;牛Fas相關(guān)死亡功能域蛋白(FADD)研究進(jìn)展[J];中國(guó)牛業(yè)科學(xué);2013年04期

2 樊憲偉;韋葳;廖權(quán)能;李有志;;氣孔蛋白同源物在單、雙子葉植物中的生物信息學(xué)分析[J];基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué);2013年06期

3 王冬梅;馮亞瓊;崔春曉;李娜娜;杜東穎;秦運(yùn)杰;付朋飛;夏平安;;脂多糖對(duì)豬繁殖與呼吸綜合征病毒誘導(dǎo)的抗病毒免疫反應(yīng)的影響[J];中國(guó)畜牧獸醫(yī);2014年08期

4 楊蕾;舒孌;姚冬冬;賈曉斌;余嗣明;;淺談葛根素對(duì)β細(xì)胞的保護(hù)作用[J];中華中醫(yī)藥雜志;2014年11期

5 趙美玲;季宇彬;畢明剛;;細(xì)胞凋亡的死亡受體途徑[J];黑龍江醫(yī)藥;2013年02期

6 李玉瓏;農(nóng)小獻(xiàn);李虹輝;王貝貝;劉希良;褚武英;張建社;李琦華;;鱖魚(yú)生肌調(diào)節(jié)因子MyoD的克隆及其發(fā)育表達(dá)分析[J];湖南師范大學(xué)自然科學(xué)學(xué)報(bào);2013年04期

7 李密;劉連慶;席寧;王越超;董再勵(lì);肖秀斌;張偉京;;基于AFM的哺乳動(dòng)物活細(xì)胞成像[J];中國(guó)科學(xué):生命科學(xué);2013年09期

8 裴文鋒;吳建勇;邢朝柱;郭立平;戚廷香;王海林;;哈克尼西棉細(xì)胞質(zhì)雄性不育系和保持系花發(fā)育不同時(shí)期miR156及靶基因TBCC的研究[J];棉花學(xué)報(bào);2013年06期

9 孫蕾;高金珉;孫曉鷗;劉敏;李登文;周軍;;CYLD的亞細(xì)胞定位及其對(duì)微管組織的調(diào)節(jié)[J];南開(kāi)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2013年06期

10 陳智;朱海紅;楊英;;細(xì)胞因子風(fēng)暴與肝衰竭[J];臨床肝膽病雜志;2014年10期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 黃愷飛;GD zhang;YQ Huang;刁勇;;Wogonin induces apoptosis and downregulates survivin in human breast cancer MCF-7 cells by modulating PI3K-AKT pathway[A];第十一屆全國(guó)博士生學(xué)術(shù)年會(huì)（生物醫(yī)藥專(zhuān)題）論文集（下冊(cè)，墻報(bào)P25-P48）[C];2013年

2 劉勇;張谷;朱玉萍;錢(qián)俊;鞠海星;馮海洋;李德川;;局部進(jìn)展期直腸癌術(shù)前新輔助治療后NF-κB和Caspase8表達(dá)變化及臨床意義[A];2013年浙江省肛腸外科學(xué)術(shù)年會(huì)暨結(jié)直腸疾病的微創(chuàng)及綜合治療新進(jìn)展學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2013年

3 郭莉霞;劉建輝;殷菲;;京尼平苷調(diào)節(jié)胰島素分泌的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑研究[A];2012年中國(guó)藥學(xué)大會(huì)暨第十二屆中國(guó)藥師周論文集[C];2012年

4 陳玉慶;;Radixin,Moesin在子宮內(nèi)膜疾患中的表達(dá)[A];甘肅省中醫(yī)藥學(xué)會(huì)2013年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2013年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 宋向榮;三氯異氰尿酸對(duì)SD大鼠睪丸結(jié)構(gòu)和功能的影響[D];延邊大學(xué);2011年

2 王冰;脂質(zhì)體介導(dǎo)重組人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)抑制因子基因轉(zhuǎn)染抑制角膜新生血管的實(shí)驗(yàn)研究[D];青島大學(xué);2006年

3 侯武剛;NDRG2在大鼠睪丸發(fā)育中的表達(dá)及其與生精細(xì)胞凋亡的關(guān)系[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2009年

4 王穎;青蒿琥酯抗骨髓增生異常綜合征作用和機(jī)制的體外實(shí)驗(yàn)研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2012年

5 常浩;新型超分辨熒光探針和定位算法的開(kāi)發(fā)[D];中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué);2013年

6 章永登;三維超分辨率顯微成像系統(tǒng)、定位算法以及熒光蛋白的開(kāi)發(fā)[D];華中科技大學(xué);2013年

7 李莉;腦紅蛋白對(duì)神經(jīng)元突起生長(zhǎng)的作用及其潛在機(jī)制[D];華中科技大學(xué);2013年

8 李玲;Rasfonin抗腫瘤活性評(píng)價(jià)及機(jī)制研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2013年

9 張晶;新型疫苗佐劑—硫酸乙酰肝素刺激DCs后差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

10 陽(yáng)喬;單核/巨噬細(xì)胞在肝衰竭中的作用及調(diào)節(jié)機(jī)制研究[D];浙江大學(xué);2013年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 張麗;氯化鎘和硫酸鎳聯(lián)合慢性染毒對(duì)大鼠睪丸曲細(xì)精管的影響[D];暨南大學(xué);2006年

2 高學(xué)勇;淫羊藿苷對(duì)環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)生精障礙大鼠下丘腦—垂體—睪丸軸的影響[D];福建醫(yī)科大學(xué);2010年

3 馮書(shū)芳;電針預(yù)處理對(duì)+Gz暴露大鼠學(xué)習(xí)和記憶的影響及機(jī)制的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2010年

4 王婷婷;死亡受體6對(duì)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞生長(zhǎng)情況的影響[D];遼寧醫(yī)學(xué)院;2011年

5 汪勇;mTOR信號(hào)通路在雌激素調(diào)節(jié)仔豬睪丸支持細(xì)胞增殖中的作用[D];西南大學(xué);2013年

6 王堯淇;Necrostatin-1對(duì)腦外傷后自噬及凋亡的影響[D];蘇州大學(xué);2013年

7 安冬梅;厄貝沙坦對(duì)糖尿病心肌梗死大鼠糖代謝基因Akt、Glut4表達(dá)的影響及其干預(yù)作用[D];大連醫(yī)科大學(xué);2012年

8 張曉凱;抗腫瘤藥物誘導(dǎo)人胰腺癌細(xì)胞增殖抑制及其機(jī)制的研究[D];暨南大學(xué);2013年

9 李倩;白藜蘆醇介導(dǎo)NF-κB轉(zhuǎn)錄及PI3K磷酸化抑制肝星狀細(xì)胞活化的分子機(jī)制研究[D];延邊大學(xué);2013年

10 宋蕊;白藜蘆醇通過(guò)mTOR信號(hào)通路抑制脂多糖誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞炎癥反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2013年

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 鄭宗明,顧曉波,俞海青,梁鳳來(lái),劉如林;非核糖體肽合成酶主要結(jié)構(gòu)域的研究進(jìn)展[J];中國(guó)抗生素雜志;2005年02期

2 張弘,喬志松,馮佑民;胰島素受體的配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域的克隆與表達(dá)[J];生物化學(xué)與生物物理學(xué)報(bào);2000年06期

3 汪俊漢;李臣鴻;;認(rèn)識(shí)Munc13[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2012年08期

4 勞為德;密碼結(jié)構(gòu)域及其功能表現(xiàn)[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;1994年01期

5 吳詩(shī)光,任雪平;同源盒結(jié)構(gòu)域的結(jié)構(gòu)花式及意義[J];周口師專(zhuān)學(xué)報(bào);1995年03期

6 徐玨;許傳蓮;杜方堯;;畢赤酵母高密度發(fā)酵表達(dá)血管緊張素轉(zhuǎn)化酶C-結(jié)構(gòu)域[J];中國(guó)生物工程雜志;2010年04期

7 謝志群,丁達(dá)夫,許根俊;通過(guò)自由能的差別劃分蛋白質(zhì)連續(xù)結(jié)構(gòu)域[J];生物化學(xué)與生物物理學(xué)報(bào);2001年04期

8 侯曉敏;袁彩;彭奇;陳明晃;黃明東;;整合素αMβ2 I-結(jié)構(gòu)域的基因合成和蛋白表達(dá)[J];生物技術(shù)通訊;2009年01期

9 楊虹偉;翟先芝;劉志斌;王健美;李旭鋒;楊毅;;兩個(gè)高度同源的RING結(jié)構(gòu)域蛋白功能初步研究[J];中國(guó)農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào);2013年05期

10 周?chē)?yán),杜光偉,汪俊華,陳建和,袁建剛,強(qiáng)伯勤;人LDB1 cDNA的分離與克隆[J];科學(xué)通報(bào);1999年07期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 孫婧;敬閏宇;吳鏑;李夢(mèng)龍;李益洲;;基于機(jī)器學(xué)習(xí)方法的結(jié)構(gòu)域預(yù)測(cè)[A];第十一屆全國(guó)計(jì)算（機(jī)）化學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2011年

2 孟剛;代方銀;陳聰;魯成;;WW結(jié)構(gòu)域及相關(guān)蛋白在腫瘤發(fā)生中的作用[A];第十屆家（柞）蠶遺傳育種及良種繁育學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2013年

3 王長(zhǎng)振;楊俊濤;周宇;叢建波;先宏;郭林超;唐麗;吳可;;LSECtin CRD結(jié)構(gòu)域的運(yùn)行性研究[A];第十一次中國(guó)生物物理學(xué)術(shù)大會(huì)暨第九屆全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)摘要集[C];2009年

4 李鵬云;丁怡;吳蓓麗;舒翠玲;沈倍奮;饒子和;;FKBP52 N端結(jié)構(gòu)域的晶體結(jié)構(gòu)[A];第九次全國(guó)生物物理大會(huì)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2002年

5 宋婀莉;田瑞;馬素參;高友鶴;;PDZ結(jié)構(gòu)域低豐度配體的篩選方法[A];中國(guó)蛋白質(zhì)組學(xué)第三屆學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要[C];2005年

6 應(yīng)躍斌;宋見(jiàn)惠;陳樞青;;大腸桿菌T蛋白獨(dú)立結(jié)構(gòu)域的活性研究[A];浙江省生物化學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2005年

7 呂丹;張君;張毓;陳慰峰;;UNC5CL表達(dá)調(diào)控及誘導(dǎo)表達(dá)[A];第六屆全國(guó)免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2008年

8 金美芳;丁向明;仇灝;吳士良;周迎會(huì);;多肽:N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶2原核與真核表達(dá)及其蓖麻蛋白樣結(jié)構(gòu)域同源建模[A];第八屆全國(guó)復(fù)合糖生物化學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要論文集[C];2004年

9 豐竹;張斌;劉謹(jǐn);周?chē)?yán);周海軍;彭小忠;袁建剛;強(qiáng)伯勤;;人ENCI的cDNA的克隆、表達(dá)與功能研究[A];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)第八屆會(huì)員代表大會(huì)暨全國(guó)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2001年

10 劉劍峰;Philippe Rondard;黃思羅;Jean-Philippe Pin;;代謝型谷氨酸樣受體中激動(dòng)劑結(jié)合到效應(yīng)器結(jié)構(gòu)域與受體激活之間的偶聯(lián)[A];第十次中國(guó)生物物理學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要集[C];2006年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 記者 王春;[N];科技日?qǐng)?bào);2004年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 黃小娟;剪切因子FBP21雙WW結(jié)構(gòu)域的溶液結(jié)構(gòu)和生物學(xué)功能研究[D];中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué);2009年

2 高詩(shī)娟;PDZ、SH2結(jié)構(gòu)域結(jié)合特性的研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2006年

3 劉將新;LARG PDZ結(jié)構(gòu)域在自由和復(fù)合物狀態(tài)下結(jié)構(gòu)與動(dòng)力學(xué)的研究[D];中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué);2008年

4 宋婀莉;高效研究多肽結(jié)合結(jié)構(gòu)域結(jié)合特性新策略的建立及其應(yīng)用[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2007年

5 王學(xué)軍;乙型肝炎病毒侵染肝細(xì)胞相關(guān)表面蛋白結(jié)構(gòu)域的鑒定[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2009年

6 王佳新;蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域預(yù)測(cè)及唾液分泌蛋白質(zhì)預(yù)測(cè)與應(yīng)用研究[D];吉林大學(xué);2013年

7 徐進(jìn)新;SNX16和SNX11的結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究[D];中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué);2012年

8 張小秦;泛素連接酶RNF168 RING結(jié)構(gòu)域的結(jié)構(gòu)和功能研究[D];中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué);2014年

9 焦豫良;中國(guó)東海微生物來(lái)源新聚酮合酶基因簇/基因片段的篩選及其新�；D(zhuǎn)移酶結(jié)構(gòu)域的功能研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2008年

10 郭金虎;人類(lèi)新基因識(shí)別與蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域鑒定[D];復(fù)旦大學(xué);2004年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 凌少平;基于遞歸神經(jīng)網(wǎng)的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域預(yù)測(cè)方法研究[D];湘潭大學(xué);2007年

2 姚波;蛋白CMS SH3結(jié)構(gòu)域溶液結(jié)構(gòu)的測(cè)定及其與c-Cbl C-末端多肽相互作用的研究[D];中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué);2006年

3 王美艷;兩種LBD轉(zhuǎn)錄因子及其DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域的表達(dá)與純化[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2013年

4 尹富仕;拒食蛋白XnAFP2功能結(jié)構(gòu)域分析與作用機(jī)理初步研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2010年

5 滑玉林;應(yīng)用熒光檢測(cè)法分析AMPA受體N末端結(jié)構(gòu)域的相互作用[D];浙江大學(xué);2006年

6 韓雄振;基于統(tǒng)計(jì)學(xué)的預(yù)測(cè)結(jié)構(gòu)域間相互作用方法的研究[D];吉林大學(xué);2006年

7 劉祚軍;硫酯酶結(jié)構(gòu)域和酮內(nèi)酯類(lèi)化合物生物合成之間關(guān)系的研究[D];安徽大學(xué);2006年

8 周影;Jurkat細(xì)胞中與Par3 PDZ結(jié)構(gòu)域相互作用的蛋白質(zhì)的蛋白質(zhì)組學(xué)鑒定的研究[D];華東師范大學(xué);2008年

9 夏思思;海洋放線(xiàn)菌氨基酸腺苷化結(jié)構(gòu)域的克隆、表達(dá)和酶活性測(cè)定[D];華中師范大學(xué);2012年

10 黃玉民;PICK1蛋白C端酸性區(qū)域?qū)ζ涔δ艿恼{(diào)節(jié)[D];山西大學(xué);2009年

  本文關(guān)鍵詞：ClipR-59在小鼠肌肉細(xì)胞分化過(guò)程中的功能研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：166093