麻痹性貝類毒素控制與降解技術研究
發(fā)布時間:2017-03-30 18:15
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【摘要】:麻痹性貝類毒素作為一類分布最廣泛、最常見的海洋藻類毒素,主要由于人們食用了富集此類毒素的貽貝、蛤、牡蠣和扇貝等貝類產(chǎn)品而產(chǎn)生中毒,其中死亡率達到15%。我國作為水產(chǎn)養(yǎng)殖和消費大國如何控制由于食用含此類毒素貝類產(chǎn)品引起中毒具有重大意義。本論文研究了殼聚糖微球吸附、弱堿化降解以及輻照降解三種技術降解麻痹性貝類毒素的效果,并對毒素的輻照產(chǎn)物結構和生物毒性進行分析。其具體如下:(1)建立了利用親水作用液相色譜-電噴霧串聯(lián)質譜法(HILIC-MS/MS)測定GTX14、neo STX、STX、dc STX、GTX23七種麻痹性貝類毒素的檢測方法。七種麻痹性貝類毒素在0.006-0.62 mg/L范圍內方法線性良好,其相關線性系數(shù)為0.9944-0.9991,定量檢測線為0.12-0.40 ng/g,不同濃度水平下各麻痹性貝類毒素的平均加標回收率均在90.8%~96.6%之間,相對標準偏差均小于9.4%。(2)制備殼聚糖微球對麻痹性貝類毒素吸附率達到90%以上,麻痹性毒素的最佳工藝條件為:p H值7,溫度15℃,時間90 min,殼聚糖添加量3g。利用Design-Expert軟件進行p H值、吸附時間、溫度、添加量四個因素對水中麻痹性毒素吸附率的回歸分析,建立了四元二次回歸方程:吸附率=90.58+3.94A+1.66B-0.38C+1.16D+0.62AB+0.95AC+0.47AD-3.73BD-3.65CD-6.37A2-7.24B2-6.80C2-9.60D2,該模型具有較高的相關系數(shù)(R2=0.9077),擬合度大于90%,能夠較好地反映響應值的變化。(3)蒸煮前添加不同劑量0.33%、0.67%、1.0%和1.67%食用蘇打(碳酸鈉)腌制扇貝,在弱堿性環(huán)境下貝肉中麻痹性貝類毒素均有不同程度的降低。降解率分別達到14.76%、44.02%、59.96%和65.73%。添加0.67%蘇打腌制組對扇貝的感官品質影響最小而隨著添加量的增加,影響逐漸增大。其中營養(yǎng)指標粗蛋白、粗脂肪、灰分和總糖含量變化不顯著(P0.05),與蘇打添加量沒有相關性。而添加0.67%蘇打時對扇貝肉的顏色、氣味、組織狀態(tài)、殘留肉滋味和總體可接受性產(chǎn)生的影響均不顯著(P0.05)。(4)隨著輻照劑量的增加貝類中麻痹性毒素的毒性呈降低的趨勢,10k Gy輻照劑量時對PSP毒素的降解效率可達31.35%。毒素輻照降解共產(chǎn)生兩種產(chǎn)物,其結構基本保留了麻痹性貝類毒素有類似兩個胍基的四氫嘌呤骨架。兩種輻解產(chǎn)物質譜裂解途徑主要是先失去—H2O,再失去C=O為主,與麻痹性貝類毒素的質譜裂解具有一定的相似性。通過QSAR模型計算,與麻痹性貝類毒素STX毒性相比兩種輻解產(chǎn)物毒性分別降低到43 mouse unitμmol-1和66 mouse unitμmol-1,毒性分別降低了98.26%和97.34%。
【關鍵詞】:麻痹性貝類毒素 殼聚糖 弱堿化 輻解產(chǎn)物
【學位授予單位】:中國農(nóng)業(yè)科學院
【學位級別】:博士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:TS254.4
【目錄】:
- 摘要5-6
- Abstract6-11
- 英文縮略詞11-12
- 第一章 引言12-25
- 1.1 麻痹性貝類毒素的來源、性質及中毒機理性14-18
- 1.1.1 麻痹性貝類毒素來源14
- 1.1.2 麻痹性貝類毒素的結構和類型14-17
- 1.1.3 麻痹性貝類毒素的性質17
- 1.1.4 中毒癥狀和機理17-18
- 1.2 麻痹性貝類毒素的檢測技術18-22
- 1.2.1 小白鼠生物法18
- 1.2.2 免疫測定法18-19
- 1.2.3 色譜技術19-21
- 1.2.4 其他方法21-22
- 1.3 麻痹性貝類毒素的控制與降解22-23
- 1.3.1 高溫高壓、烹飪以及反復凍融處理22-23
- 1.3.2 物理吸附法23
- 1.4 麻痹性毒素定量構效關系研究23-24
- 1.5 研究的目的和意義24-25
- 第二章 高效液相色譜-串聯(lián)質譜法檢測PSP毒素方法研究25-33
- 2.1 前言25-26
- 2.2 實驗部分26-29
- 2.2.1 儀器和材料26-27
- 2.2.2 毒素標準液和流動相的配制27
- 2.2.3 樣品的處理及凈化27
- 2.2.4 色譜和質譜條件27-28
- 2.2.5 制作標準曲線28
- 2.2.6 定性定量方法28-29
- 2.2.7 回收率和精密度計算29
- 2.3 結果與討論29-32
- 2.3.1 色譜柱的選擇29-31
- 2.3.2 色譜條件的選擇及質譜分析31
- 2.3.3 方法線性和檢出限的計算31-32
- 2.3.4 方法回收率與精密度的計算32
- 2.4 本章小結32
- 2.5 結論32-33
- 第三章 殼聚糖微球吸附PSP毒素工藝響應面法研究33-44
- 3.1 前言33-34
- 3.2 實驗部分34-36
- 3.2.1 儀器和試劑34
- 3.2.2 殼聚糖理化性質的測定34-35
- 3.2.3 殼聚糖微球的紅外光譜表征35
- 3.2.4 殼聚糖微球的制備35
- 3.2.5 麻痹性貝類毒素溶液的制備35
- 3.2.6 樣品麻痹性貝類毒素的檢測35
- 3.2.7 殼聚糖吸附麻痹性貝類毒素單因素研究35-36
- 3.3 結果與討論36-42
- 3.3.1 殼聚糖微球紅外圖譜及解析36-37
- 3.3.2 殼聚糖吸附麻痹性貝類毒素單因素研究37-38
- 3.3.3 回歸模型的建立與分析38-42
- 3.4 討論42
- 3.5 結論42-44
- 第四章 弱堿化降解麻痹性貝類毒素方法研究44-52
- 4.1 前言44-45
- 4.2 材料與方法45-47
- 4.3 結果與分析47-50
- 4.3.1 添加蘇打腌制對蝦夷扇貝表面p H值及麻痹性貝類毒素含量的影響47-48
- 4.3.2 添加蘇打對扇貝肉感官品質的影響48-49
- 4.3.3 蘇打腌制量對扇貝肉TPA的影響49-50
- 4.3.4 蘇打腌制量對扇貝肉營養(yǎng)成分的影響50
- 4.4 討論50-51
- 4.5 結論51-52
- 第五章 麻痹性貝類毒素輻射降解產(chǎn)物及機理研究52-73
- 5.1 前言52-53
- 5.2 實驗部分53-55
- 5.2.1 儀器和試劑53-54
- 5.2.2 試驗材料54
- 5.2.3 試驗方法54
- 5.2.4 LC儀器參數(shù)54
- 5.2.5 Q-TOF-MS儀器參數(shù)54-55
- 5.2.6 處理方法55
- 5.3 結果與討論55-72
- 5.3.1 麻痹性貝類毒素的提取55-56
- 5.3.2 輻照對麻痹性貝類毒素降解效果研究56-58
- 5.3.3 麻痹性貝類毒素質譜裂解規(guī)律研究58-65
- 5.3.4 七種麻痹性貝類毒素輻照降解產(chǎn)物及毒性分析65-69
- 5.3.5 麻痹性貝類毒素毒性與量子化學參數(shù)的QSAR模型驗證69-72
- 5.3.6 麻痹性貝類毒素輻解產(chǎn)物毒性分析72
- 5.4 結論72-73
- 第六章 總結與展望73-74
- 6.1 全文總結73
- 6.2 創(chuàng)新點73
- 6.3 展望73-74
- 參考文獻74-84
- 附錄84-98
- 致謝98-99
- 作者簡歷99
【參考文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前9條
1 王煥玲;梁玉波;劉仁沿;許道艷;;我國麻痹性貝毒的研究現(xiàn)狀[J];水產(chǎn)科學;2008年07期
2 鮑軍波;李興教;羅昭鋒;王菊英;;麻痹性貝毒的表面等離子體共振快速檢測方法研究[J];海洋環(huán)境科學;2006年04期
3 程金平;皮帥帥;葉屬峰;高昊e,
本文編號:277777
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