本文選題：人乳 + 牛乳�。� 參考：《沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)》2017年博士論文

【摘要】：乳是一種復(fù)雜的生物流體,能夠?yàn)閶雰汉托律溉閯?dòng)物提供主要營(yíng)養(yǎng)。牛乳作為重要的人類(lèi)飲食和農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)產(chǎn)品已經(jīng)受到很多關(guān)注。人乳被認(rèn)為是新生兒最好的食物。目前國(guó)際衛(wèi)生組織倡導(dǎo),嬰幼兒需在6個(gè)月以前進(jìn)行母乳喂養(yǎng)。因此,利用先進(jìn)的蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)對(duì)人初乳、人常乳、牛初乳、牛常乳進(jìn)行分析。由于人乳與牛乳中酪蛋白在組成和結(jié)構(gòu)的研究已經(jīng)非常透徹,因此從不同泌乳期人乳與牛乳中乳脂肪球膜(Milk fat glouble membrane,MFGM)、乳清(Whey)、外泌體(Exsomes)三個(gè)部分進(jìn)行差異蛋白質(zhì)組學(xué)深入研究,能夠?yàn)槿蘸笊a(chǎn)嬰幼兒乳粉和功能性乳制品提供全面、系統(tǒng)的研究思路,并為乳品工業(yè)提供重要的信息和潛在的指導(dǎo)方向。主要研究結(jié)果如下:1、本文先從蛋白質(zhì)定性的角度,利用質(zhì)譜技術(shù)對(duì)不同泌乳期人乳與牛乳中MFGM蛋白進(jìn)行鑒定。在牛初乳中鑒定出675種MFGM蛋白,牛常乳中鑒定出488種MFGM蛋白,人初乳中鑒定出1078種MFGM蛋白,人常乳中鑒定出1545種MFGM蛋白。在這些鑒定結(jié)果中,人初乳MFGM中存在270種特異表達(dá)蛋白,人常乳MFGM中存在291種特異性表達(dá)蛋白,牛初乳MFGM中存在160種特異性表達(dá)蛋白,牛常乳MFGM中存在46種特異性表達(dá)蛋白。將鑒定的MFGM蛋白進(jìn)行功能性分析發(fā)現(xiàn),不同泌乳期人乳與牛乳中乳脂肪球膜蛋白不僅在蛋白質(zhì)組成上有差異,而且在生物功能上也具有較大差異。利用溶液內(nèi)胰蛋白酶解結(jié)合液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)對(duì)不同泌乳期人乳與牛乳中乳清進(jìn)行定性研究。在人初乳中鑒定出539種乳清蛋白,在人常乳中鑒定出460種乳清蛋白,在牛初乳中鑒定出291種乳清蛋白,在牛常乳中鑒定出284種乳清蛋白。人初乳乳清中存在104種特異性表達(dá)蛋白,人常乳乳清中存在40種特異性表達(dá)蛋白,牛初乳乳清中存在49種特異性表達(dá)蛋白,牛常乳乳清中存在74種特異性表達(dá)蛋白。并通過(guò)分析發(fā)現(xiàn)不同泌乳期人乳與牛乳中乳清在蛋白質(zhì)組成上具有較大差異,在生物功能和代謝途徑上也具有較大差異。本研究對(duì)不同泌乳期人乳與牛乳中外泌體蛋白進(jìn)行了定性蛋白質(zhì)組學(xué)研究。在牛初乳外泌體中鑒定出128種蛋白,牛常乳外泌體中鑒定出204種蛋白,人初乳外泌體中鑒定出327種蛋白,人常乳外泌體中鑒定出396種蛋白。在這些鑒定結(jié)果中,人初乳外泌體中存在67種特異表達(dá)蛋白,人常乳外泌體中存在180種特異性表達(dá)蛋白,牛初乳外泌體中存在55種特異性表達(dá)蛋白,牛常乳中存在16外泌體種特異性表達(dá)蛋白。并利用GO功能注釋和KEGG通路分析發(fā)現(xiàn)不同泌乳期人乳與牛乳中外泌體在蛋白質(zhì)組成上具有一定差異,并且生物功能和代謝途徑上同樣具有明顯差異。2、本文從蛋白質(zhì)定量的角度,對(duì)不同泌乳期人乳與牛乳中MFGM進(jìn)行定量蛋白質(zhì)組學(xué)研究,將分離的乳脂肪球膜蛋白利用iTRAQ標(biāo)記的蛋白質(zhì)組方法進(jìn)行分析。共鑒定出有定量信息的411種MFGM蛋白,其中232種為差異表達(dá)蛋白(P0.05)。基于GO功能注釋和KEGG通路分析發(fā)現(xiàn),MFGM差異表達(dá)蛋白主要參與的生物過(guò)程為應(yīng)激反應(yīng);主要參與的細(xì)胞組分為細(xì)胞外間隙;具有主要的分子功能為蛋白質(zhì)結(jié)合作用。并且在231種MFGM差異表達(dá)蛋白中找到了 28種與免疫系統(tǒng)過(guò)程相關(guān)的MFGM差異表達(dá)蛋白,50種與生長(zhǎng)發(fā)育相關(guān)的MFGM差異表達(dá)蛋白。MFGM差異表達(dá)蛋白主要參與的KEGG通路主要包括肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架與粘著斑途徑。利用iTRAQ的蛋白質(zhì)組學(xué)方法進(jìn)行定量蛋白質(zhì)組學(xué)研究,在乳清中鑒定出有定量信息的584種乳清蛋白,在這些乳清蛋白中有424種差異表達(dá)蛋白(P0.05)。不同泌乳期人乳與牛乳中乳清差異表達(dá)蛋白主要參與的生物過(guò)程為生物調(diào)節(jié)和應(yīng)激反應(yīng);主要參與的細(xì)胞組分為細(xì)胞外區(qū)域部分;主要具有的分子功能為蛋白質(zhì)結(jié)合作用。在乳清差異表達(dá)蛋白中找到20種免疫相關(guān)蛋白和13種與酶調(diào)節(jié)活性相關(guān)蛋白。乳清差異表達(dá)蛋白主要參與的KEGG通路為補(bǔ)體和凝血級(jí)聯(lián)途徑。利用iTRAQ技術(shù)對(duì)不同泌乳期人乳與牛乳中外泌體進(jìn)行了定量蛋白質(zhì)組學(xué)研究。在不同泌乳期人乳與牛乳中鑒定出具有定量信息的920種外泌體蛋白,其中有575種是差異表達(dá)蛋白(P0.05)。這些外泌體差異表達(dá)蛋白主要參與的生物過(guò)程為應(yīng)激反應(yīng);參與的主要細(xì)胞組成為細(xì)胞內(nèi)組分;具有的主要分子功能為蛋白結(jié)合作用。并找到了 22種與免疫系統(tǒng)過(guò)程相關(guān)蛋白,34種與傳導(dǎo)相關(guān)蛋白。將外泌體差異表達(dá)蛋白進(jìn)行KEGG通路分析發(fā)現(xiàn),外泌體差異表達(dá)蛋白主要參與的通路為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中蛋白質(zhì)加工途徑。并通過(guò)聚類(lèi)分析發(fā)現(xiàn)不同泌乳期人乳與牛乳中外泌體蛋白雖然具有相似的蛋白質(zhì)組表達(dá)模式,但是在表達(dá)量上具有較大的差異。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：TS252.1

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