本文關(guān)鍵詞：野桂花蜜多酚的提取分離及抗氧化性研究

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【摘要】：本文選取天然野桂花蜜為原料,利用響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)確立野桂花蜜中酚類(lèi)化合物的最佳提取方法及條件,通過(guò)大孔樹(shù)脂以及聚酰胺樹(shù)脂對(duì)野桂花蜜多酚的粗提物進(jìn)行分離純化,采用HPLC對(duì)各個(gè)提取分離階段野桂花蜜多酚中的14種單酚含量進(jìn)行定性和定量的分析。并在此基礎(chǔ)上對(duì)不同分離階段的野桂花蜜多酚提取液進(jìn)行了抗氧化作用的初步研究,具體研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下：1、用單因素實(shí)驗(yàn)和響應(yīng)面法優(yōu)化實(shí)驗(yàn)對(duì)野桂花蜜多酚的超聲波輔助溶劑提取進(jìn)行了研究,研究結(jié)果表明：使用鹽酸-乙酸乙酯復(fù)合溶劑,濃度為62%,料液比為1：10(m/v),超聲波時(shí)間為21 min,超聲波溫度為54℃,在此工藝條件下,得到的野桂花蜜多酚的平均得率為68.27 mg/10g。然后用傳統(tǒng)有機(jī)溶劑浸提工藝對(duì)其進(jìn)行對(duì)比研究,發(fā)現(xiàn)超聲波輔助提取野桂花蜜多酚的得率較高,更適合野桂花蜜多酚的提取。2、比較了4種不同大孔樹(shù)脂純化野桂花蜜多酚方面的特性。實(shí)驗(yàn)表明：XAD-2樹(shù)脂純化野桂花蜜多酚的效果最好；XAD-2樹(shù)脂的吸附量為36.9±1.26 mg/g,解析率為7812±1.17%,并且達(dá)到吸附平衡與解析平衡的時(shí)間較短,較適合野桂花蜜多酚的純化。最佳工藝參數(shù)為樣液多酚濃度2.5 mg/mL、最適宜pH為6,上樣流速2 BV/h、洗脫劑為80%乙醇溶液、洗脫流速2 BV/h、洗脫劑用量4 BV。在此條件下,野桂花蜜多酚的純度由9.52%提高到52.8%。通過(guò)XAD-2大孔樹(shù)脂初步純化結(jié)合聚酰胺樹(shù)脂進(jìn)一步分離,經(jīng)過(guò)測(cè)定后,制備樣品中的野桂花蜜多酚得到較大程度富集,野桂花蜜多酚的純度提高到84.55%。3、通過(guò)HPLC分析,確定了的13種野桂花蜜多酚的組分含量,其中蘆丁(276.68±0.43 mg/10g)為主要成分,含量最高,肉桂酸(141.16±1.29 mg/10g)次之。芹菜素(2.47±0.03 mg/10g)含量相對(duì)較低。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明乙酸乙酯的萃取過(guò)程、XAD-2樹(shù)脂和聚酰胺樹(shù)脂的純化過(guò)程并不影響野桂花蜜多酚的組成。4、比較了四個(gè)分離提取階段的四組試樣中的總酚含量與其抗氧化活性。證明了不同組分的總酚含量、還原能力以及其抗氧化能力不同,其總酚含量與還原能力呈正相關(guān),野桂花蜜多酚對(duì)DPPH自由基、超氧陰離子和羥基自由基均具有一定的清除能力。研究結(jié)果表明野桂花蜜多酚具有很好的體外抗氧化活性。
【關(guān)鍵詞】：野桂花蜜多酚 超聲波提取 分離純化 HPLC 抗氧化活性
【學(xué)位授予單位】：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：TQ28
【目錄】：

• 摘要4-5
• abstract5-12
• 第一章 緒論12-26
• 1 蜂蜜的研究現(xiàn)狀12-14
• 1.1 蜂蜜的成分研究12-13
• 1.2 野桂花蜜的簡(jiǎn)介13
• 1.3 野桂花蜜的抗氧化活性成分13-14
• 2 蜂蜜多酚的概述14-17
• 2.1 多酚的結(jié)構(gòu)及分類(lèi)14-15
• 2.2 蜂蜜多酚化合物的生物活性15-16
• 2.2.1 抗氧化能力15
• 2.2.2 預(yù)防心腦血管疾病15
• 2.2.3 抑菌消炎、抗腫瘤作用15
• 2.2.4 治療腸胃疾病15-16
• 2.2.5 美容和抗衰老的功效16
• 2.2.6 其他16
• 2.3 多酚的應(yīng)用現(xiàn)狀16-17
• 3 多酚化合物提取方法17-19
• 3.1 有機(jī)溶劑提取法17
• 3.2 超聲波輔助提取17-18
• 3.3 微波輔助萃取18
• 3.4 超臨界流體萃取18
• 3.5 固相萃取技術(shù)18
• 3.6 酶提取方法18-19
• 4 多酚類(lèi)物質(zhì)純化方法研究現(xiàn)狀19-20
• 4.1 柱層析19
• 4.2 薄層層析19-20
• 4.3 膜分離法20
• 4.4 高效液相色譜法20
• 5 多酚類(lèi)物質(zhì)成分分析方法研究現(xiàn)狀20-22
• 5.1 紫外-可見(jiàn)光吸收光譜法20-21
• 5.2 紅外吸收光譜法21
• 5.3 高效液相色譜21
• 5.4 核磁共振21-22
• 5.5 液-質(zhì)聯(lián)用技術(shù)22
• 6 測(cè)定多酚類(lèi)物質(zhì)抗氧化能力的研究現(xiàn)狀22-24
• 6.1 DPPH自由基法22-23
• 6.2 ORAC法23
• 6.3 ABTS法23
• 6.4 超氧陰離子自由基清除能力23-24
• 6.5 羥基自由基清除能力24
• 7 論文選題的目的意義24-25
• 8 研究的內(nèi)容25-26
• 第二章 野桂花蜜多酚的提取工藝研究26-37
• 1 材料與方法26-28
• 1.1 材料與試劑26
• 1.2 儀器與設(shè)備26
• 1.3 方法26-28
• 1.3.1 提取溶劑的篩選26-27
• 1.3.2 原兒茶酸標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作27
• 1.3.3 野桂花蜜多酚化合物的超聲波輔助提取27
• 1.3.4 多酚化合物得率的計(jì)算27-28
• 1.3.5 單因素實(shí)驗(yàn)28
• 1.3.6 響應(yīng)面分析實(shí)驗(yàn)28
• 2 結(jié)果與分析28-35
• 2.1 不同溶劑對(duì)野桂花蜜多酚提取效果的影響28-29
• 2.2 單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果29-32
• 2.2.1 溶劑濃度對(duì)野桂花蜜多酚得率的影響29
• 2.2.2 料液比對(duì)野桂花蜜多酚得率的影響29-30
• 2.2.3 超聲波時(shí)間對(duì)野桂花蜜多酚的影響30-31
• 2.2.4 超聲波溫度對(duì)野桂花蜜多酚的影響31-32
• 2.3 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果32-34
• 2.4 響應(yīng)面分析34-35
• 2.5 最佳工藝條件的驗(yàn)證35
• 2.6 超聲波輔助提取法與傳統(tǒng)浸提法的比較35
• 3 本章小結(jié)35-37
• 第三章 野桂花蜜多酚的純化工藝研究37-48
• 1 材料與方法37-40
• 1.1 材料與試劑37
• 1.2 儀器和設(shè)備37-38
• 1.3 方法38-40
• 1.3.1 野桂花蜜多酚提取液的制備38
• 1.3.2 原兒茶酸標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作38
• 1.3.3 多酚純度的測(cè)定38
• 1.3.4 大孔吸附樹(shù)脂的預(yù)處理38
• 1.3.5 大孔吸附樹(shù)脂對(duì)野桂花蜜多酚吸附率和解析率的測(cè)定38-39
• 1.3.6 大孔樹(shù)脂對(duì)野桂花蜜多酚的靜態(tài)吸附動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)39
• 1.3.7 XAD-2大孔樹(shù)脂純化野桂花蜜多酚的工藝條件優(yōu)化39-40
• 1.3.8 野桂花蜜多酚初步純化物的聚酰胺樹(shù)脂分離40
• 2 結(jié)果與分析40-47
• 2.1 大孔樹(shù)脂的靜態(tài)吸附試驗(yàn)40-41
• 2.2 XAD-2樹(shù)脂對(duì)野桂花蜜多酚的吸附動(dòng)力學(xué)特性41
• 2.3 大孔樹(shù)脂純化野桂花蜜多酚的工藝條件優(yōu)化41-47
• 2.3.1 上樣量濃度對(duì)純化野桂花蜜多酚的影響41-42
• 2.3.2 不同pH值對(duì)純化野桂花蜜多酚的影響42-43
• 2.3.3 洗脫液體積分?jǐn)?shù)對(duì)純化野桂花蜜多酚的影響43-44
• 2.3.4 上樣流速對(duì)純化野桂花蜜多酚的影響44-45
• 2.3.5 洗脫流速對(duì)純化野桂花蜜多酚的影響45-46
• 2.3.6 洗脫量對(duì)純化野桂花蜜多酚的影響46-47
• 2.4 各階段樣品中總酚含量和純度的比較47
• 3 本章小結(jié)47-48
• 第四章 野桂花蜜多酚的成分分析48-58
• 1 材料與儀器48-49
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑48-49
• 1.2 儀器與設(shè)備49
• 2 實(shí)驗(yàn)方法49-50
• 2.1 色譜條件49
• 2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作49
• 2.3 樣品制備與測(cè)定49-50
• 2.4 精密度的考察50
• 2.5 重現(xiàn)性的考察50
• 2.6 加標(biāo)回收率試驗(yàn)50
• 3 結(jié)果與分析50-56
• 3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立50-51
• 3.2 精密度考察51
• 3.3 重現(xiàn)性考察51-52
• 3.4 加標(biāo)回收率考察52-53
• 3.5 HPLC對(duì)野桂花蜜多酚的組分分析53-56
• 4 本章小結(jié)56-58
• 第五章 野桂花蜜多酚的抗氧化活性58-66
• 1 材料和方法58-60
• 1.1 樣品采集58
• 1.2 化學(xué)試劑58
• 1.3 儀器設(shè)備58-59
• 1.4 實(shí)驗(yàn)方法59-60
• 1.4.1 樣品處理59
• 1.4.2 總酚含量的測(cè)定59
• 1.4.3 還原性的測(cè)定59
• 1.4.4 清除DPPH·自由基能力的測(cè)定59-60
• 1.4.5 清除超氧陰離子自由基能力測(cè)定60
• 1.4.6 清除羥基自由基(·OH)的能力測(cè)定60
• 2 結(jié)果與分析60-64
• 2.1 不同試樣野桂花蜜總酚含量測(cè)定60-61
• 2.2 野桂花蜜的還原性61-62
• 2.3 野桂花蜜對(duì)DPPH自由基的清除作用62-63
• 2.4 野桂花蜜對(duì)超氧陰離子自由基的清除作用63
• 2.5 野桂花蜜對(duì)羥基自由基的清除作用63-64
• 2.6 野桂花蜜多酚含量與抗氧化活性相關(guān)性分析64
• 3 本章小結(jié)64-66
• 第六章 結(jié)論與討論66-68
• 1 結(jié)論66-67
• 2 討論67-68
• 參考文獻(xiàn)68-77
• 致謝77-78
• 作者簡(jiǎn)介78
• 研究生期間發(fā)表的主要論文78

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本文編號(hào)：599405