發(fā)布時間：2020-10-18 19:04

　　 真菌DT06屬于Simplicillium lanosoniveum的變種。前期研究發(fā)現(xiàn)DT06能夠產(chǎn)生抑制革蘭氏陽性細(xì)菌的抗生素,國內(nèi)外均尚未見有關(guān)S.lanosoniveum的抗生素的研究和報告。本文首次把S.lanosoniveum的抑菌活性物質(zhì)作為抗生素來進(jìn)行研究和討論,并對該抗生素進(jìn)行了分離和理化性質(zhì)研究,主要研究結(jié)果如下:在對大孔樹脂CT-12吸附抗生素工藝條件優(yōu)化的實驗中,對DT06分生孢子生長狀況進(jìn)行了觀察。然后,通過單因素實驗確定了影響大孔樹脂吸附效果的顯著條件,并設(shè)計了L9(33)正交實驗,確定最佳吸附條件組合為:pH=3;徑高比D/H=1/5;流速=1.2 mL/min,且在此組合下,抗生素回收率最高,達(dá)到了95.11%。確定了最佳吸附組合后,通過濃度梯度洗脫,最終確定最佳解吸劑為95%乙醇溶液。50%乙醇溶液可以除去大量色素。為了對抗生素進(jìn)一步純化,對三種弱堿性陰離子交換樹脂D392、D380、D301T進(jìn)行篩選,結(jié)果發(fā)現(xiàn)用乙酸溶液酸化后的D301T樹脂吸附了樣品液中的色素,抗生素未被吸附,故可考慮把離子交換樹脂D301T作為脫色劑。該色素對抗生素的純化造成了很大的干擾,本文對分離出的色素進(jìn)行了一個初步的研究,初步推斷其為多肽類物質(zhì),為研究DT06與藍(lán)藻之間的共生關(guān)系打下了基礎(chǔ)。在對抗生素的理化性質(zhì)進(jìn)行初步研究的實驗中,最終確定四氯化碳為抗生素最佳沉淀劑;HPLC分析結(jié)果顯示,根據(jù)不同的保留時間可知抗生素與預(yù)期的頭孢菌素C不同;雙縮脲試劑顯色結(jié)果得知抗生素不是肽類物質(zhì)或者含有肽鍵的其它物質(zhì);茚三酮顯色結(jié)果又進(jìn)一步確定抗生素與頭孢菌素C不同,且抗生素不含有α-氨基和α-羧基;乙醇硫酸溶液顯色結(jié)果得知,抗生素很有可能屬于萜類或甾類物質(zhì)。紫外掃描結(jié)果發(fā)現(xiàn)抗生素在乙醇溶液中有兩個吸收峰,其中在228nm處吸收較強(qiáng),其次在277nm處有個較小的吸收峰,得出抗生素分子中可能含有芳香族側(cè)鏈。最后與已知的抗生素進(jìn)行了對比,得出DT06抑菌活性代謝產(chǎn)物是一種新抗生素,具有潛在的醫(yī)藥工業(yè)應(yīng)用價值,其具體分子結(jié)構(gòu)及藥用價值有待進(jìn)一步研究。本文實驗結(jié)果可作為該抗生素工業(yè)分離純化以及結(jié)晶工藝的研究基礎(chǔ)。
【學(xué)位單位】：河北工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2015
【中圖分類】：TQ465
【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 天然產(chǎn)物在藥物研發(fā)中的重要性
        1.1.1 天然產(chǎn)物概述
        1.1.2 天然產(chǎn)物在藥物研發(fā)中的地位
        1.1.3 生物多樣性
        1.1.4 天然產(chǎn)物在抗生素研發(fā)中所扮演的角色
        1.1.5 開發(fā)新抗生素的理由
        1.1.6 抗生素所扮演的多重角色
    1.2 Simplicillium屬概述
        1.2.1 Simplicillium屬簡介
        1.2.2 與Simplicillium屬有關(guān)的天然產(chǎn)物
        1.2.3 Simplicillium lanosoniveum的研究近況
    1.3 本論文創(chuàng)新點及主要研究內(nèi)容
        1.3.1 本論文的創(chuàng)新點
        1.3.2 本論文的主要研究內(nèi)容
第二章 大孔樹脂吸附DT06抗生素的工藝優(yōu)化
    2.1 前言
    2.2 實驗材料
        2.2.1 實驗使用的菌種
        2.2.2 實驗儀器及設(shè)備
        2.2.3 實驗試劑
    2.3 實驗方法
        2.3.1 培養(yǎng)基
        2.3.2 菌株培養(yǎng)
        2.3.3 抗生素活性檢測
        2.3.4 大孔樹脂CT-12
        2.3.5 發(fā)酵液預(yù)處理
        2.3.6 吸附條件的確定
        2.3.7 最佳解吸劑的確定
    2.4 結(jié)果與討論
        2.4.1 孢子萌發(fā)過程
        2.4.2 柱層析吸附DT06抗生素工藝優(yōu)化結(jié)果
        2.4.3 正交實驗結(jié)果分析
        2.4.4 最佳解吸劑濃度確定結(jié)果
    2.5 本章小結(jié)
第三章 離子交換樹脂的篩選
    3.1 前言
    3.2 實驗材料
        3.2.1 基本材料
        3.2.2 實驗儀器及設(shè)備
        3.2.3 離子交換樹脂
        3.2.4 實驗試劑
    3.3 實驗方法
        3.3.1 樣品液的制備
        3.3.2 抗生素的檢測
        3.3.3 三種離子交換樹脂
        3.3.4 最佳樹脂的篩選
        3.3.5 解吸劑的篩選
        3.3.6 色素的去除及初步研究
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 樹脂篩選結(jié)果
        3.4.2 解吸劑篩選結(jié)果
        3.4.3 色素初步研究結(jié)果
    3.5 本章小結(jié)
第四章 真菌DT06抗生素理化性質(zhì)初步研究
    4.1 前言
    4.2 實驗材料
        4.2.1 基本材料
        4.2.2 實驗儀器及設(shè)備
        4.2.3 實驗試劑
    4.3 實驗方法
        4.3.1 抗生素結(jié)晶
        4.3.2 抗生素液相檢測
        4.3.3 抗生素性質(zhì)分析
        4.3.4 抗生素紫外掃描檢測
    4.4 結(jié)果與討論
        4.4.1 抗生素結(jié)晶結(jié)果
        4.4.2 抗生素液相檢測結(jié)果
        4.4.3 肽鍵（酰胺鍵）檢測結(jié)果
        4.4.4 α -氨基和α -羧基檢測結(jié)果
        4.4.5 萜類或甾類物質(zhì)檢測結(jié)果
        4.4.6 抗生素紫外掃描檢測結(jié)果
    4.5 本章小結(jié)
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士期間的科研情況和發(fā)表論文說明
致謝

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2846690