發(fā)布時(shí)間：2018-05-17 18:57

  本文選題：蔓越莓濃縮物 + 葡萄籽提取物�。� 參考：《浙江大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：蔓越莓(Cranberry)作為一種低熱量、高纖維、富含多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的水果,被譽(yù)為北美三大傳統(tǒng)水果之一,其制品也正逐漸被引入中國(guó)市場(chǎng)。由于蔓越莓中含有大量植物活性物質(zhì),尤其是其獨(dú)特的A型原花青素,能有效保持泌尿道的健康,近年來(lái)越來(lái)越受到人們的關(guān)注。本文以富含A型原花青素的蔓越莓濃縮物(CBC)為研究對(duì)象,以富含B型原花青素的葡萄籽提取物(GSE)作為對(duì)照品,對(duì)其進(jìn)行了有關(guān)主要成分的分析鑒定、小鼠體內(nèi)延緩衰老和調(diào)節(jié)氧化還原狀態(tài)的功能,以及端粒保護(hù)作用的研究。得出以原花青素A2為主要生物活性物質(zhì)的CBC能從調(diào)節(jié)體內(nèi)氧化還原狀態(tài)和端粒保護(hù)兩方面發(fā)揮延緩衰老的作用,相比以(表)兒茶素和原花青素B2為主要生物活性物質(zhì)的GSE,CBC在谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)活性的調(diào)節(jié)、端粒保護(hù)方面的作用效果更加理想,提示CBC作為一種延緩衰老的功能性食品具有巨大潛力。詳細(xì)研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下:1、主要成分含量分析采用GB法對(duì)CBC和GSE中的水分、灰分、脂肪、蛋白質(zhì)、總黃酮、總原花青素、抗壞血酸和維生素E(以α-生育酚計(jì))的含量進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果顯示CBC與GSE中最主要的活性物質(zhì)均為原花青素。CBC中原花青素含量為15.6g/kg,GSE中原花青素含量為309.0 g/kg。2、原花青素的組成分析與結(jié)構(gòu)鑒定采用Q-Extractive組合型四極桿/軌道阱高分辨質(zhì)譜法(QE)對(duì)CBC和GSE原花青素的組成(即不同聚合度的原花青素)成分進(jìn)行分析,結(jié)果顯示CBC中最主要的酚類活性物質(zhì)為原花青素A2,其次為(表)兒茶素;而GSE中最主要的酚類活性物質(zhì)為(表)兒茶素和原花青素B2。3、體內(nèi)氧化還原狀態(tài)調(diào)節(jié)與延緩衰老作用采用D-半乳糖致衰小鼠模型,以水溶性維生素E作為陽(yáng)性對(duì)照,連續(xù)8周將15 mg/kg/d、30 mg/kg/d、60 mg/kg/d(劑量以總原花青素含量計(jì))的CBC和GSE分別對(duì)受試小鼠進(jìn)行灌胃。結(jié)果顯示CBC和GSE可使肝臟丙二醛(MDA,以硫代巴比妥反應(yīng)物TBARS的量表示)含量降低30%-57%,使大腦MDA含量降低24%-30%,使血漿8-異前列腺素含量降低11%-62%。同時(shí)CBC和GSE可使大腦的單胺氧化酶(MAO)活力降低27%-59%,使血漿MAO活力降低65%-71%。高劑量組(60 mg/kg/d)的CBC可使肝臟的GSH-Px水平顯著提高42%(p0.05),而中劑量組(30mg/kg/d)的GSE則使肝臟的超氧化物歧化酶(SOD)水平提高了 13%(p0.05)。以上結(jié)果表明,CBC和GSE均能通過(guò)調(diào)節(jié)體內(nèi)氧化還原狀態(tài)而延緩衰老。但是CBC對(duì)肝臟和血清中GSH-Px活性調(diào)節(jié)效果明顯,而GSE對(duì)GSH-Px活性無(wú)調(diào)節(jié)作用,而兩者對(duì)過(guò)氧化氫酶(CAT)的活性均無(wú)顯著影響。4、基于端粒保護(hù)的延緩衰老作用采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法測(cè)定各組小鼠肝臟和睪丸的相對(duì)端粒長(zhǎng)度(TL),發(fā)現(xiàn)低劑量組的CBC能顯著抑制肝臟和睪丸中因D-半乳糖致衰而導(dǎo)致的端粒長(zhǎng)度縮短(p0.05),從而起到有效保護(hù)端粒的作用,但GSE卻沒(méi)有這方面的作用效果。采用蛋白質(zhì)印跡法(WesternBlot)進(jìn)行端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶基因tert和長(zhǎng)壽基因sirt6表達(dá)水平的檢測(cè),發(fā)現(xiàn)中、高劑量組的CBC和低劑量組GSE均能顯著降低睪丸中tert蛋白表達(dá)水平(p0.05),但只有低劑量組的CBC能顯著降低肝臟中的tert蛋白表達(dá)水平(p0.05),提示CBC和GSE均可通過(guò)降低端粒酶活性從而預(yù)防細(xì)胞癌變的效果,但作用靶點(diǎn)不同;對(duì)于長(zhǎng)壽基因sirt6,各劑量組的CBC和中劑量組的GSE均可顯著提高長(zhǎng)壽基因sirt6的蛋白表達(dá)水平(p0.05)。由此可見(jiàn),CBC和GSE均可靶向性地調(diào)控端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶基因terr的蛋白表達(dá)水平,促進(jìn)長(zhǎng)壽基因sirt6的蛋白表達(dá),但只有CBC起到有效保護(hù)端粒的效果。
[Abstract]:Cranberry (Cranberry), as a low calorie, high fiber, and rich variety of nutrients, is known as one of the three major traditional fruits in North America. Its products are also being introduced into the Chinese market. Because the cranberry contains a large number of plant active substances, especially its unique A proanthocyanidins, it can effectively maintain the health of the urinary tract in recent years. More and more people pay attention to it. In this paper, the cranberry concentrate (CBC) rich in A proanthocyanidins (CBC) is used as the research object. The grape seed extract (GSE), which is rich in B proanthocyanidins, is used as a control product. The analysis and identification of the main components, the function of retarding aging and the regulation of redox state in mice, and the telomere protection in mice are carried out in this paper. It is concluded that CBC with proanthocyanidin A2 as the main bioactive substance can play a role in delaying senescence from two aspects of regulating the redox state of the body and the telomere protection, compared with the GSE of (surface) catechin and proanthocyanidin B2 as the main bioactive substance, the regulation of CBC in the activity of cereal caspase peroxidase (GSH-Px), and the telomere. The protective effect is more ideal, suggesting that CBC has great potential as a functional food for delaying senility. The detailed content and results are as follows: 1, the main component content analysis uses GB method for water, ash, fat, protein, total flavonoids, total anthocyanins, ascorbic acid and vitamin E (alpha tocopherol) in CBC and GSE. The results showed that the main active substances in CBC and GSE were proanthocyanidin.CBC and proanthocyanidin content 15.6g/kg, GSE proanthocyanidin content was 309 g/kg.2, and the composition analysis and structural identification of proanthocyanidins were identified by Q-Extractive combined quadrupole / track well high resolution mass spectrometry (QE) for CBC and GSE original flowers. The composition of penicillin (the proanthocyanidins of different degrees of polymerization) was analyzed. The results showed that the main phenolic active substance in CBC was proanthocyanidin A2, followed by (surface) catechin, while the most important phenolic active substance in GSE was (surface) catechin and proanthocyanidin B2.3. The regulation of redox state in the body and the anti aging effect of D- half were used in D- half. The model of lactose senility mice was treated with water soluble vitamin E as positive control. 15 mg/kg/d, 30 mg/kg/d, 60 mg/kg/d (CBC and GSE) were administered to the mice for 8 weeks. The results showed that CBC and GSE reduced the content of the liver malondialdehyde (MDA, the amount of TBARS of thiobarbitone reaction) by 30%. -57%, the content of MDA in the brain decreased 24%-30%, the plasma 8- ISO prostaglandin content decreased 11%-62%. and CBC and GSE could reduce the activity of monoamine oxidase (MAO) activity in the brain 27%-59%, and reduce the activity of MAO activity in the 65%-71%. high dose group (60 mg/kg/d). The superoxide dismutase (SOD) level of the liver was increased by 13% (P0.05). The results showed that both CBC and GSE could delay senescence by regulating the redox state in the body, but CBC had a significant effect on the activity of GSH-Px in the liver and serum, while GSE had no regulation on the activity of GSH-Px, and both of them had no activity on the activity of catalase (CAT). .4, based on the delayed senescence of telomere protection, the relative telomere length (TL) of liver and testis of mice in each group was measured by real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (RT-PCR). It was found that the CBC of low dose group could significantly inhibit the telomere length shortened (P0.05) caused by D- galactose induced failure in the liver and testis (P0.05), thus it was effective. The effect of telomere was protected, but GSE did not effect this effect. The expression level of telomerase reverse transcriptase gene TERT and longevity gene SIRT6 was detected by Western blot method (WesternBlot). It was found that CBC and low dose group GSE in high dose group could significantly reduce the expression level of TERT protein (P0.05) in the testosterone pill, but only low dose. CBC can significantly reduce the level of TERT protein expression in the liver (P0.05), suggesting that both CBC and GSE can reduce telomerase activity to prevent cell carcinogenesis, but the target is different. For long life gene SIRT6, GSE of each dose group CBC and medium dose group can significantly improve the protein expression level of longevity gene SIRT6 (P0.05). It can be seen that both CBC and GSE can regulate the protein expression level of telomerase reverse transcriptase gene terr and promote the protein expression of long life gene SIRT6, but only CBC can effectively protect telomere.
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：TS255.1

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本文編號(hào)：1902484