玉米須多糖的制備及其生物活性研究
發(fā)布時間:2018-05-08 22:33
本文選題:玉米須 + 多糖 ; 參考:《吉林化工學(xué)院》2017年碩士論文
【摘要】:玉米須(Stigma maydis),是禾本科作物玉米(Zea mays L.)的干燥花柱和柱頭,玉米須多糖具有抑制腫瘤、降血糖、利尿、抗氧化等作用。為系統(tǒng)地研究玉米須多糖的化學(xué)結(jié)構(gòu)和生物活性,本文對玉米須多糖進行了分離純化、結(jié)構(gòu)解析并考察了玉米須多糖抗氧化活性和急性毒性試驗。在前期工作基礎(chǔ)上,利用水提醇沉法制備玉米須粗多糖,提取率為3.39%,苯酚-硫酸法測得玉米須粗多糖含量為9.19%。然后,通過單因素和正交實驗優(yōu)選間羥基聯(lián)苯法測定玉米須多糖中糖醛酸含量的分析條件。最佳測定條件為:四硼酸鈉-硫酸溶液用量5.0mL,加酸后沸水浴時間5min,間羥基聯(lián)苯溶液用量80μL,顯色時間20min。該條件下,玉米須多糖中糖醛酸含量為5.9%,間羥基聯(lián)苯法測定結(jié)果的加樣回收率更接近于理論值。玉米須粗多糖經(jīng)AB-8大孔吸附樹脂脫色,脫色率為65.94%;Sevage法除蛋白質(zhì)率為67.33%;除蛋白多糖經(jīng)透析含量提升至65.33%。經(jīng)DEAE-52柱層析分離得到PSM1、PSM2、PSM3三個多糖組分。透析12 h,經(jīng)醇沉冷凍干燥后,PSM1中多糖含量為80.67%,未檢測到糖醛酸;PSM2中多糖含量為79.26%,糖醛酸含量占多糖71.56%;PSM3含量為77.45%,檢測到微量糖醛酸,但無法定量。對主成份PSM1與PSM2進一步純化,經(jīng)Sephadex LH-20柱層析后,得PSM1單體多糖15.30mg,純度95.16%;PSM2單體多糖29.22mg,純度為96.57%。經(jīng)紫外掃描在260nm和280nm處無特征紫外吸收峰,表明上述兩個單體多糖無核酸和蛋白質(zhì)等雜質(zhì);紅外光譜中,單體多糖PSM2在1745cm-1處存在糖醛酸結(jié)構(gòu)特征峰。氣相初步鑒定PSM2由L-鼠李糖、D-阿拉伯糖、D-木糖、D-甘露糖、D-葡萄糖、D-半乳糖組成,摩爾比為0.92:2.55:0.75:1.38:1.0:2.61,但該分析條件下,未檢測到糖醛酸結(jié)構(gòu)片段,有待進一步研究。以羥基自由基、DPPH自由基、總還原力為體外抗氧化評價體系,VC為陽性對照,分別研究玉米須粗多糖、單體多糖PSM2與PSM1的抗氧化活性。結(jié)果表明,上述樣品在一定濃度范圍內(nèi)對羥基自由基、DPPH自由基具有清除能力,對三價鐵離子具有還原力,且呈量效關(guān)系;綜合結(jié)果表明,抗氧化活性依次為VC粗多糖單體多糖PSM2單體多糖PSM1,提示純化對活性存在影響,除單體多糖外,尚有其它物質(zhì)具有抗氧化作用,且糖醛酸結(jié)構(gòu)片段的存在可能提高抗氧化活性,二者存在正相關(guān)性。最后,鑒于玉米須多糖良好的抗氧化活性,具有一定開發(fā)潛力,本論文對玉米須多糖的急性毒性進行初步評價。將昆明小鼠分為空白對照(蒸餾水)、玉米須粗多糖低(7.5g/kg BW)、中(15g/kg BW)、高劑量組(20g/kg BW),24h內(nèi),灌胃給藥完成后對其外觀、行為、飲食攝水等觀察14d。于15d禁食16h后,收集血樣與器官,分別測定血生化指標(biāo)及臟器指數(shù)。結(jié)果表明,在14d的觀察中,未發(fā)現(xiàn)實驗動物死亡和任何與毒性相關(guān)的異常癥狀;與空白對照相比,受試組小鼠在體重、攝食量、血生化指標(biāo)及臟器指數(shù)等方面均未見顯著性差異(P0.05),提示玉米須粗多糖安全性較高,最大耐受劑量高于20g/kg BW。
[Abstract]:In this paper , the content of uronic acid in corn stigma was determined by using water extraction and alcohol precipitation method . The content of uronic acid was 95.39 % . The content of uronic acid was 65.94 % . The content of uronic acid was 65.94 % . The content of uronic acid was 65.94 % . The content of uronic acid was 95.16 % . The results showed that the anti - oxidation activity of the above - mentioned samples was in the range of 0 . 92 鈭,
本文編號:1863391
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