本文關(guān)鍵詞： SERS 蛋白質(zhì) 自組裝技術(shù) 免標(biāo)記　出處：《南京理工大學(xué)》2017年碩士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

【摘要】：表面增強(qiáng)拉曼光譜(SERS)作為指紋識(shí)別和無(wú)損檢測(cè)技術(shù)在生物分子檢測(cè)領(lǐng)域表現(xiàn)了其他檢測(cè)手段無(wú)法比擬的優(yōu)勢(shì):痕量、無(wú)損、快速、指紋式識(shí)別,能夠提供豐富的生物分子結(jié)構(gòu)信息及其振動(dòng)信息。本文采用自組裝的方法分別制備了可用于蛋白質(zhì)分子快速檢測(cè)的固態(tài)SERS基底和有望用于生物活體中蛋白檢測(cè)的懸浮態(tài)SERS基底。并將其成功應(yīng)用到蛋白質(zhì)檢測(cè)的應(yīng)用中。主要研究?jī)?nèi)容如下:(1)利用不同的方法合成銀納米材料,重點(diǎn)研究了 LeeMeisel的水熱合成法,并對(duì)其合成工藝做了改進(jìn)。通過(guò)控制前期沸騰的時(shí)間,成功地合成出了尺寸均一的類(lèi)球形的銀納米顆粒,其粒徑在50-70nm;(2)優(yōu)化了傳統(tǒng)的二次氧化法,通過(guò)加入過(guò)量的濃硫酸及調(diào)整石墨粉和高錳酸鉀的加料速度等,制備了分散性更好的氧化石墨烯。并通過(guò)TEM、UV-Vis及拉曼儀等對(duì)其進(jìn)行了表征。(3)利用自組裝技術(shù)在玻璃片表面組裝銀納米顆粒。通過(guò)控制時(shí)間在玻璃表面形成具有良好的表面增強(qiáng)拉曼效應(yīng)的"熱點(diǎn)",并探究了該基底材料對(duì)不同的酸化蛋白以及不同蛋白濃度的表面增強(qiáng)拉曼的增強(qiáng)效果,同時(shí)也使用了掃描電鏡等對(duì)該基底材料的形貌表征,其檢測(cè)極限達(dá)到了 0.1μ g/mL。(4)通過(guò)引入懸浮性良好的氧化石墨烯作為平臺(tái),通過(guò)調(diào)節(jié)NaCl、HCl的加入量來(lái)打開(kāi)氧化石墨烯和銀納米顆粒表面的雙電子層,使銀納米顆粒進(jìn)行可控的團(tuán)聚并負(fù)載到氧化石墨烯上形成有SERS效應(yīng)的基底材料,從而實(shí)現(xiàn)免標(biāo)記蛋白質(zhì)的痕量檢測(cè)和分析,其檢測(cè)線達(dá)到0.4μg/mL。
[Abstract]:Surface-Enhanced Raman Spectroscopy (SERS) as a fingerprint identification and nondestructive testing technology in the field of biomolecular detection has shown unparalleled advantages: trace, non-destructive, fast, fingerprint identification, In this paper, we have prepared solid state SERS substrates for rapid detection of protein molecules and those expected to be used in the detection of proteins in living organisms by using self-assembly method, which can provide abundant information on the structure and vibration of biomolecules. The suspended SERS substrate was successfully applied to protein detection. The main research contents are as follows: 1) the silver nanomaterials were synthesized by different methods. The hydrothermal synthesis method of LeeMeisel has been studied emphatically, and the synthesis process has been improved. By controlling the boiling time in the early stage, the spherical silver nanoparticles of uniform size have been successfully synthesized, the particle size of which is 50-70 nm ~ (2)) and the traditional secondary oxidation method has been optimized. By adding excessive concentrated sulfuric acid and adjusting the feeding speed of graphite powder and potassium permanganate, Graphene oxide with better dispersity was prepared and characterized by TEM UV-Vis and Raman spectrometer. Silver nanoparticles were assembled on glass surface by self-assembly technique. The silver nanoparticles were formed on glass surface by controlling time. The "hot spot" of the surface-enhanced Raman effect and the enhancement effect of the substrate on different acidified proteins and different protein concentrations were investigated. At the same time, scanning electron microscopy was used to characterize the morphology of the substrate. The detection limit reached 0.1 渭 g / m 路L ~ (4). Graphene oxide with good suspension was introduced as the platform. The double electron layer on the surface of graphene oxide and silver nanoparticles was opened by adjusting the amount of NaCl-HCl, which allowed the controlled agglomeration of silver nanoparticles and the loading of silver nanoparticles onto graphene oxide to form a substrate material with SERS effect. Thus, the trace detection and analysis of non-labeled protein were realized, and the detection line reached 0.4 渭 g / mL.
【學(xué)位授予單位】：南京理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：TB383.1;Q6-33

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