本文關(guān)鍵詞：改進(jìn)型免疫側(cè)向?qū)游鋈矍璋窓z測(cè)方法研究　出處：《合肥工業(yè)大學(xué)》2017年碩士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

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【摘要】：三聚氰胺是含氮量極高的工業(yè)化學(xué)原料,在食品中非法添加長(zhǎng)期誤食會(huì)對(duì)泌尿系統(tǒng)造成損害,因此針對(duì)三聚氰胺建立快速、靈敏、便捷的新型檢測(cè)方案對(duì)維護(hù)人類(lèi)健康和食品安全具有很重要的意義。本文介紹了以下兩種快速檢測(cè)方法:(1)三聚氰胺傳統(tǒng)型免疫層析檢測(cè)技術(shù)建立本方法基于經(jīng)典的抗原抗體免疫識(shí)別方法和競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)原理進(jìn)行三聚氰胺的識(shí)別檢測(cè),在金納米粒子表面標(biāo)記組裝三聚氰胺抗體,T線固定三聚氰胺抗原,C線固定羊抗鼠二抗,肉眼通過(guò)觀察T/C線是否顯現(xiàn)定性分析三聚氰胺的存在狀況,結(jié)合掃描線條的顯色強(qiáng)度進(jìn)行三聚氰胺定量分析。實(shí)驗(yàn)中優(yōu)化了金納米粒子粒徑、NC膜類(lèi)型和樣品墊緩沖液等關(guān)鍵參數(shù),最佳實(shí)驗(yàn)條件下,9分鐘完成檢測(cè),肉眼觀測(cè)靈敏度為100 ppb,在檢測(cè)范圍0-200 ppb能夠建立線性良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線(R~2=0.9888),本方法具有卓越的識(shí)別特異性,牛奶復(fù)雜樣品檢測(cè)應(yīng)用結(jié)果和標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)結(jié)果高度一致。(2)三聚氰胺增敏型免疫層析檢測(cè)技術(shù)建立本研究在傳統(tǒng)的基于競(jìng)爭(zhēng)法層析試紙條的基礎(chǔ)上進(jìn)行改進(jìn),增加一個(gè)BSA抗體與金納米粒子制備的增敏元件構(gòu)建增敏型試紙條,將傳統(tǒng)型試紙條的靈敏度大大提高。本增敏型三聚氰胺檢測(cè)試紙條研究中,主要優(yōu)化了增敏金的粒徑,增敏元件上抗體的量和標(biāo)記pH值。在識(shí)別墊采用25 nm金納米粒子,增強(qiáng)墊采用15 nm金納米粒子,并采用賽多利斯CN95膜,可在9分鐘內(nèi)實(shí)現(xiàn)三聚氰胺的超靈敏快速檢測(cè),肉眼檢測(cè)靈敏度為5 ppb,相比于傳統(tǒng)型方法靈敏度提升了20倍,標(biāo)準(zhǔn)曲線檢測(cè)線性范圍為:0.1-5 ppb(R~2=0.9861),檢測(cè)實(shí)際牛奶樣品的結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)試一致,在環(huán)境監(jiān)測(cè)和食品安全等領(lǐng)域的具有巨大的應(yīng)用潛力。
【學(xué)位授予單位】：合肥工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：TS252.7

【參考文獻(xiàn)】

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