本文關鍵詞：銀耳多糖酶法提取及生物活性研究　出處：《福建農(nóng)林大學》2017年碩士論文　論文類型：學位論文

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【摘要】：銀耳(Tremellla fuciforms),別名白木耳、雪耳、菊花耳,是一種具有研究開發(fā)價值的珍貴食用菌。而銀耳多糖是銀耳中的主要活性成分,它具有提高機體免疫力、抗病毒、抗腫瘤、降血糖血脂等保健功能逐漸成為人們的研究熱點。但與歐美發(fā)達國家相比,我國銀耳以食用為主,對銀耳多糖的研究起步甚晚。銀耳多糖的提取存在過程復雜、提取率低、純度不高、提取成本高等問題,而國內外對于高純度銀耳多糖的需求較大。福建省銀耳資源豐富,因此對銀耳多糖提取、分離純化展開研究,開發(fā)出一條簡單高效、經(jīng)濟實惠的銀耳多糖提取純化工藝具有重要的現(xiàn)實意義和應用價值。本文以銀耳子實體為原料,對其多糖的提取、分離純化及生物活性進行研究。本課題研究的主要內容和結果:(1)酶法結合高壓蒸煮提取銀耳多糖干銀耳子實體經(jīng)過浸泡、修剪、瀝干、高壓、勻漿、酶解、離心、蒸發(fā)濃縮、醇沉、離心、凍干等工藝流程得到銀耳粗多糖。首先通過單因素試驗研究高壓過程中的溫度、時間、料液比等單因素對銀耳多糖提取率的影響,并采用Box-Behnken設計對高壓此工藝進行優(yōu)化,得出最佳的提取工藝:高壓時料液比1:90、時間120min、溫度110℃。經(jīng)過高壓、勻漿等工藝流程,酶解階段中研究纖維素酶、果膠酶、酶解時間、酶解溫度等單因素對銀耳多糖提取率的影響,采用正交試驗設計對此工藝進行優(yōu)化,得到最佳工藝參數(shù)為:纖維素酶1.0%、果膠酶0.8%、酶解時間120min、酶解溫度是55℃,此時粗多糖的提取率高達39.28%。(2)銀耳多糖的分離純化將銀耳粗多糖進行分離純化是研究其生物活性的前提和基礎。銀耳多糖的純化主要包括脫除蛋白質、DEAE52-纖維素離子交換柱層析、SephadexG-200凝膠柱層析、透析等步驟,得到兩種組分單一的銀耳多糖組分TFP1-1和TFP2-2。本課題以銀耳多糖中的蛋白質脫除率和多糖損失率作為綜合評價參數(shù),通過比較TCA法、sevage法、鹽酸法、酶法+sevage法這四種脫蛋白的效果,結果表明酶+sevage法效果最佳。在溫度65℃、pH6.5、120min、木瓜蛋白酶為1%的條件下脫蛋白,再用sevage法在此基礎上三次去除蛋白質三次,蛋白質脫除率85.1%,多糖損失率為14.2%。(3)銀耳多糖的生物活性研究未脫蛋白的和脫蛋白的銀耳多糖均對·OH有一定的清除效果(p0.01),且未脫蛋白的銀耳多糖對清除·OH能力優(yōu)于脫蛋白的銀耳多糖(p0.01);在清除ABTS+體系中,銀耳多糖同樣表現(xiàn)出良好的清除效果,未脫蛋白的銀耳多糖和脫蛋白的銀耳多糖對清除ABTS+的IC50分別為2.32、3.94mg/mL;而在DPPH ·體系中,未脫蛋白的銀耳多糖在清除DPPH·自由基能力方面卻不及脫蛋白的銀耳多糖(p0.01)。接著探討銀耳多糖的抗腫瘤性,發(fā)現(xiàn)不同處理的銀耳多糖聯(lián)合順鉑均對HepG2肝癌細胞具有極顯著的抑制其生長作用(p0.01),其中未脫蛋白的銀耳多糖聯(lián)合順鉑抑制率達71.8%,脫蛋白的銀耳多糖聯(lián)合順鉑時抑制率達63.2%,這兩個處理間的差異也是極顯著的(p0.01),得出脫蛋白的銀耳多糖聯(lián)合順鉑抑制細胞增長效果優(yōu)于脫蛋白的銀耳多糖聯(lián)合順鉑這一結論。
【學位授予單位】：福建農(nóng)林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：TQ464.1

【參考文獻】

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5 陶瑞霄;賈冬英;姚開;遲原龍;;高壓提取銀耳多糖研究[J];食品科技;2015年06期

6 鮑會梅;;酶解法提取銀耳多糖的工藝及穩(wěn)定性研究[J];食品研究與開發(fā);2015年11期

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本文編號：1330859