本文關(guān)鍵詞：顯齒蛇葡萄葉多酚的α-葡萄糖苷酶抑制及抗氧化活性研究　出處：《河南科技學(xué)院》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：顯齒蛇葡萄葉(Ampelopsis grossedentata Leaves,AGL)是我國(guó)特有的一種富含多酚的功能性食品植物原料。長(zhǎng)期以來(lái),AGL的多酚研究主要集中在其以二氫楊梅素(Dihydromyricetin,DMY)為代表的小分子酚類物質(zhì)上,而對(duì)其單寧組分(Tannin fraction,TF)的研究卻鮮見報(bào)道。有鑒于此,本文采用響應(yīng)面法優(yōu)化了超聲-微波協(xié)同提取AGL多酚的工藝,分離純化了其單寧類組分,并運(yùn)用波譜分析手段鑒定了其結(jié)構(gòu)。在此基礎(chǔ)上,系統(tǒng)研究了TF和DMY的α-葡萄糖苷酶抑制和抗氧化活性。以水為溶劑,超聲-微波協(xié)同提取AGL多酚的最適條件為:超聲功率50 w,提取時(shí)間10 min,液固比50:1(v/w),微波功率350 w,微波時(shí)間100 s。在該條件下多酚得率為19.35%(以DMY計(jì))。經(jīng)噴霧干燥后,產(chǎn)物中的DMY含量為43.08%。采用柱色譜法分離了AGL水提取物中的TF,并采用紫外、紅外、核磁等波譜分析手段對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行了鑒定,結(jié)果表明該TF成分為沒食子酸和糖結(jié)合而成的綴合物,屬于水解單寧類物質(zhì)。在α-葡萄糖苷酶抑制試驗(yàn)中,AGL水提物、TF、DMY展示了抑制活性,其IC50值分別為23.10,1.94和72.21μg/mL,TF的活性遠(yuǎn)高于DMY,表明TF是AGL中抑制α-葡萄糖苷酶的重要成分,可能與AGL的降血糖活性有重要關(guān)聯(lián)。抑制動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)三者對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制類型均為競(jìng)爭(zhēng)性與非競(jìng)爭(zhēng)性的混合型抑制。通過熒光光譜掃描試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)三者與α-葡萄糖苷酶結(jié)合后,會(huì)使α-葡萄糖苷酶發(fā)生熒光猝滅現(xiàn)象。在DPPH自由基清除試驗(yàn)、ABTS自由基清除試驗(yàn)、還原力測(cè)試等三種化學(xué)抗氧化模型中,AGL水提物、TF、DMY均表現(xiàn)了很強(qiáng)的抗氧化能力。AGL水提物、TF和DMY清除DPPH自由基的IC50值分別為15.78,10.17和7.66μg/m L。三者對(duì)清除ABTS自由基的IC50值分別為60,39.02和29.51μg/mL。還原力測(cè)試中三者的活性與濃度線性相關(guān)(r20.996)。在上述抗氧化活性測(cè)試中,DMY展現(xiàn)了最高活性,TF和水提物則次之。在HepG2細(xì)胞模型中,AGL水提物、TF、DMY均表現(xiàn)了很強(qiáng)的細(xì)胞抗氧化能力。在“無(wú)PBS清洗”處理方案中,AGL水提物、TF和DMY抑制細(xì)胞中過氧化自由基生成的EC50值分別為80.10,13.13和12.56μg/m L。而在“PBS清洗”處理方案中,三者的EC50值分別為163.16,30.62和78.94μg/m L,TF的活性顯著高于DMY。本課題建立了AGL多酚的超聲-微波協(xié)同提取方法,分析鑒定了AGL的TF組分,發(fā)現(xiàn)TF對(duì)AGL的抗氧化和降血糖活性有重要貢獻(xiàn),該發(fā)現(xiàn)為理解顯AGL的生物活性提供了參考。
【學(xué)位授予單位】：河南科技學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：TS201.2

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本文編號(hào)：1319044