本文關(guān)鍵詞：納豆活菌數(shù)與酶活相關(guān)性及在消化液中穩(wěn)定性研究　出處：《陜西科技大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 納豆菌 活菌數(shù) 納豆激酶 酶活 消化液 穩(wěn)定性

【摘要】：納豆菌(Bacillus natto)是一種傳統(tǒng)發(fā)酵食品—納豆的生產(chǎn)菌種,可在發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生具有多種保健功能的生理活性物質(zhì)。納豆激酶是其中最為重要的一種,具有較強(qiáng)的溶解血栓的功能,已被廣泛應(yīng)用于心腦血管疾病的預(yù)防控制。目前對(duì)于納豆菌和納豆激酶的研究主要集中于如何提高活菌數(shù)和酶活,對(duì)兩者之間的相關(guān)性及在消化液中穩(wěn)定性的研究較少。因此,本課題從納豆中分離篩選得到產(chǎn)納豆激酶活性較高的菌株,對(duì)其活菌數(shù)與納豆激酶活性之間的關(guān)系,以及該菌與納豆激酶在模擬胃腸道消化液中的穩(wěn)定性進(jìn)行研究。主要研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下:(1)產(chǎn)納豆激酶菌株的分離鑒定及生物學(xué)特性研究。以納豆激酶的酪蛋白水解活性和纖溶活性為依據(jù),通過(guò)脫脂牛奶平板從市售納豆中分離并反復(fù)初篩得到37株菌株,再經(jīng)瓊脂糖-纖維蛋白平板復(fù)篩得到1株產(chǎn)納豆激酶活性較高的菌株CN11,其粗酶液的酶活為5856.85 U/mL;經(jīng)菌體與菌落形態(tài)觀察、生理生化特性鑒定,該菌株屬于芽孢桿菌屬;再結(jié)合分子生物學(xué)鑒定結(jié)果及其產(chǎn)納豆激酶的特點(diǎn),綜合判定該菌株為納豆芽孢桿菌。該菌的最適生長(zhǎng)溫度為37℃,最適生長(zhǎng)p H為7.0,傳代培養(yǎng)20代以內(nèi)遺傳特性穩(wěn)定。(2)納豆活菌數(shù)與納豆激酶活性的相關(guān)性研究。以納豆激酶活性為指標(biāo),通過(guò)單因素和正交實(shí)驗(yàn)確定納豆菌CN11的液體和固體發(fā)酵最佳產(chǎn)酶條件,在此基礎(chǔ)上探討活菌數(shù)與酶活的關(guān)系。結(jié)果表明,液體發(fā)酵最佳培養(yǎng)基組成和條件為:蔗糖2.5%,酵母粉2%,MgSO_4 0.05%,CaCl2 0.02%,KH_2PO_40.1%,K_2HPO_4 0.3%,培養(yǎng)基初始pH 7.0,接種量2%,裝液量40 mL/250 mL,發(fā)酵溫度37℃,發(fā)酵時(shí)間60 h;固體發(fā)酵最佳條件為:接種量6%,發(fā)酵溫度37℃,發(fā)酵時(shí)間48 h。納豆活菌數(shù)與納豆激酶活性呈正相關(guān)關(guān)系,且液體發(fā)酵條件下呈極顯著正相關(guān),相關(guān)系數(shù)R=0.82。(3)納豆菌對(duì)模擬胃腸道消化液的耐受性研究。將納豆菌CN11與不同pH的人工胃液、人工腸液和膽鹽作用不同時(shí)間,觀察其活菌數(shù)變化,分析其對(duì)消化液的耐受性。結(jié)果表明,納豆菌CN11在pH 1.5、pH 2.5、pH 3.5的人工胃液中作用3 h后,活菌數(shù)分別從2.8×10~8 CFU/mL、2.5×10~8 CFU/mL和2.6×10~8 CFU/mL下降至8.9×107 CFU/mL、1.7×10~8 CFU/mL和2.2×10~8 CFU/mL;在人工腸液中作用4 h后,活菌數(shù)從4.2×10~8 CFU/mL緩慢上升至5.7×10~8 CFU/mL;在0.3%(w/v)的膽鹽培養(yǎng)基中培養(yǎng)4 h后,活菌數(shù)從4.3×10~8 CFU/mL下降至3.0×10~8 CFU/mL。這表明納豆菌CN11對(duì)人工胃液、人工腸液和膽鹽均有較強(qiáng)的耐受性。(4)納豆激酶在模擬胃腸道消化液中的穩(wěn)定性研究。將納豆菌CN11分別進(jìn)行液體發(fā)酵和固體發(fā)酵,得到粗酶液和固體發(fā)酵物兩種不同形式的納豆激酶樣品;將該樣品在不同pH的人工胃液、人工腸液和膽鹽溶液中處理不同時(shí)間,觀察納豆激酶活性變化,分析其在消化液中的穩(wěn)定性。結(jié)果表明,粗酶液和固體發(fā)酵物在pH 1.5、pH 2.5、p H 3.5的人工胃液中作用3 h,納豆激酶剩余活力分別為9.6%、50.3%、61.1%和26.6%、58.3%、78.1%;在人工腸液中作用4 h后,剩余活力分別為65.9%和83.8%;在0.3%(w/v)的膽鹽溶液中作用4 h后,剩余活力分別為87.3%和89.7%�？梢�(jiàn),納豆激酶對(duì)pH 1.5的人工胃液耐受性較差,對(duì)pH 2.5和pH 3.5的人工胃液、人工腸液和膽鹽溶液耐受性均較強(qiáng),且固體發(fā)酵物中的納豆激酶在模擬胃腸道消化液中具有更高的穩(wěn)定性。
【學(xué)位授予單位】：陜西科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：TS201.3

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 臧學(xué)麗;;納豆激酶生產(chǎn)菌的亞硝基胍誘變[J];中國(guó)農(nóng)業(yè)信息;2016年20期

2 牟杰;印澤遠(yuǎn);王麗;周凌蕓;張綺悅;李妙然;閆冬雷;姜珊;;納豆芽孢桿菌生產(chǎn)維生素K2的連續(xù)發(fā)酵工藝優(yōu)化[J];食品工業(yè)科技;2016年19期

3 李夢(mèng)丹;謝艷華;陳力力;郭華;;納豆芽孢桿菌及其在食品生產(chǎn)中的應(yīng)用研究進(jìn)展[J];食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào);2016年08期

4 范加金;彭延杰;嚴(yán)為留;;維生素K_2的生理作用及其在納豆中的研究進(jìn)展[J];黑龍江醫(yī)藥;2016年03期

5 馬國(guó)興;潘峰;王慶波;溫春光;吳雅清;許瑞安;;納豆激酶分子結(jié)構(gòu)與潛在應(yīng)用價(jià)值分析[J];食品與生物技術(shù)學(xué)報(bào);2016年04期

6 劉夢(mèng)潔;陳守文;魏雪團(tuán);;納豆激酶高產(chǎn)菌的快速篩選及其發(fā)酵納豆特性[J];食品科學(xué);2016年21期

7 黃婷;劉良忠;曹宇翔;賈維寶;;納豆固態(tài)發(fā)酵工藝優(yōu)化[J];中國(guó)釀造;2016年01期

8 張杰;葛武鵬;陳瑛;張悅;劉李婷;;納豆激酶高產(chǎn)菌株的選育及固態(tài)發(fā)酵技術(shù)[J];食品科學(xué);2016年03期

9 陳茜;汪建明;胡可眉;;納豆菌發(fā)酵大豆蛋白制備抑菌發(fā)酵液的工藝優(yōu)化[J];食品研究與開(kāi)發(fā);2015年13期

10 張杰;葛武鵬;張靜;陳瑛;吳曉勇;;高產(chǎn)納豆激酶的枯草芽孢桿菌優(yōu)選及發(fā)酵工藝條件優(yōu)化[J];食品工業(yè)科技;2015年08期

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 葛春蕾;高效分泌表達(dá)納豆激酶的重組枯草芽孢桿菌的構(gòu)建[D];江南大學(xué);2016年

2 程云;納豆激酶的酶學(xué)特性及其微膠囊的制備研究[D];哈爾濱工業(yè)大學(xué);2015年

3 張杰;高活力枯草芽孢桿菌發(fā)酵優(yōu)化及納豆激酶富集技術(shù)研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2015年

4 廖杰瓊;菜籽粕固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)納豆激酶的條件及動(dòng)力學(xué)研究[D];湖南農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

5 何孝天;Bacillus natto納豆激酶的重組表達(dá)及熱穩(wěn)定性改造[D];江南大學(xué);2014年

6 王雅君;基因組改組選育發(fā)酵菜籽粕產(chǎn)納豆激酶菌株的研究[D];湖南農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

7 徐慧;富硒納豆激酶的制備及特性研究[D];華南理工大學(xué);2013年

8 田智斌;納豆激酶固態(tài)發(fā)酵工藝及納豆凍干粉制備的研究[D];河北工業(yè)大學(xué);2013年

9 許鵬;產(chǎn)抗菌物質(zhì)的納豆菌選育及發(fā)酵特性的研究[D];安徽工程大學(xué);2012年

10 楊激心;納豆芽孢桿菌對(duì)食用菌保鮮作用的研究[D];江西農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

，

本文編號(hào)：1318201