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不同增塑劑對短凱倫藻的生長抑制作用及其機理研究

發(fā)布時間:2017-10-27 06:08

  本文關鍵詞:不同增塑劑對短凱倫藻的生長抑制作用及其機理研究


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【摘要】:增塑劑在我國被大量生產和使用,其中鄰苯二甲酸酯類(PAEs)占增塑劑使用量的80%以上。我國各大水體中均檢出了鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)和鄰苯二甲酸(2-乙基)己酯(DEHP)等PAEs,包括黑龍江、黃河、長江和珠江等水域。海洋藻類作為海洋生態(tài)系統(tǒng)的初級生產力,為維持整個海洋生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定起重要作用。已有研究表明PAEs是一種環(huán)境荷爾蒙,對人體、動物的生殖系統(tǒng)、內分泌系統(tǒng)等有很大的危害作用。而進入水體中的PAEs由于其較小的飽和蒸汽壓(VP),只能在水體環(huán)境中遷移轉化。因此,進入海洋中的PAEs對海洋藻類產生毒性效應,會影響整個海洋生態(tài)系統(tǒng)的平衡。因此本文以在海洋中有廣泛分布的短凱倫藻(Karenia brevis)為研究對象,研究了11種PAEs包括鄰苯二甲酸二甲酯(DMP)、鄰苯二甲酸二乙酯(DEP)、鄰苯二甲酸二烯丙酯(DAP)、鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)、鄰苯二甲酸二異丁酯(DIBP)、鄰苯二甲酸丁芐酯(BBP)、鄰苯二甲酸二庚酯(DHP)、鄰苯二甲酸二正辛酯(DOP)、鄰苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)、鄰苯二甲酸二異壬酯(DINP)、鄰苯二甲酸二異癸酯(DIDP),對短凱倫藻生長的抑制作用,并從氧化脅迫作用出發(fā),對PAEs抑制短凱倫藻生長的機制進行了進一步的探究,闡述了不同烷基鏈長度PAEs對短凱倫藻生長的抑制作用規(guī)律,為評估PAEs對海洋生態(tài)系統(tǒng)的平衡的威脅提供理論基礎。結果表明,不同烷基鏈長度的PAEs對短凱倫藻的毒性效應不同。烷基鏈長度較短的的PAEs(側鏈C個數(shù)6)對短凱倫藻的EC50,96h值隨著烷基鏈長度的增加而減小,說明其毒性逐漸增大。短凱倫藻的生長受到DEP, DAP, DBP, DIBP, BBP的抑制,不受其他6種PAEs的影響。藻細胞個數(shù)顯著少于對照組,且隨著時間的推移差異越大,濃度越高的PAEs作用下,藻細胞數(shù)越少,不同濃度組間差異較大。而其他6種PAEs作用下,實驗組與對照組的藻細胞數(shù)沒有明顯差異。DBP、DIBP、BBP作用下,藻細胞內的葉綠素a含量有顯著下降。其他幾種PAEs作用下,與對照組相比,處理組葉綠素a含量不隨著濃度的變化而有顯著變化。DEP, DAP, DBP, BBP4種PAEs作用下,短凱倫藻細胞內的MDA含量較對照組均有顯著的促進作用。MDA含量在PAEs作用下,隨著時間的推移和濃度的增加逐漸升高,在96h達到最高值或趨于平穩(wěn)。SOD和CAT的活性先升高后降低。表明DEP, DAP, DBP, BBP作用下,短凱倫藻細胞的抗氧化酶活性誘導升高來清除產生的多余的ROS;钚匝踝杂苫暮肯壬吆蠼档陀稚,這與SOD和CAT的活性變化相吻合。直接證明了DEP, DAP, DBP, BBP作用下,短凱倫藻細胞內產生了較多的ROS。通過電子傳遞鏈抑制劑魚藤酮、敵草隆和雙香豆素對DEP, DAP, DBP, BBP誘導短凱倫藻細胞產生ROS的研究,發(fā)現(xiàn)DEP主要作用于短凱倫藻的線粒體電子傳遞鏈上,DAP和DBP都作用于短凱倫藻葉綠體和線粒體電子傳遞鏈上,BBP主要作用于短凱倫藻的葉綠體電子傳遞鏈上。離體葉綠體中,與對照組相比,加入DAP, DBP, BBP對離體葉綠體產生OH·的量顯著性升高。離體線粒體中,與對照組相比,加入DEP, DAP, DBP對離體線粒體產生OH·的量顯著性升高。驗證了ROS產生的位點。
【關鍵詞】:短凱倫藻 鄰苯二甲酸酯類 氧化脅迫
【學位授予單位】:中國海洋大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:Q949.2;TQ414
【目錄】:
  • 摘要5-7
  • Abstract7-11
  • 0 前言11-13
  • 1 緒論13-24
  • 1.1 研究背景和意義13-15
  • 1.2 烷基鏈長度對PAEs的影響15
  • 1.3 PAEs的毒性效應15-17
  • 1.3.1 PAEs對人體和動物的毒性效應15-16
  • 1.3.2 PAEs對水生生物的毒性效應16-17
  • 1.4 短凱倫藻的簡介17-18
  • 1.5 氧化脅迫的危害18-20
  • 1.5.1 對生物大分子物質的影響18-19
  • 1.5.2 對生理生化過程的影響19-20
  • 1.6 本研究的內容和技術路線20-24
  • 1.6.1 本研究的內容20-22
  • 1.6.2 技術路線22-24
  • 2 不同烷基鏈長度的PAEs對短凱倫藻生長抑制作用24-35
  • 2.1 引言24-25
  • 2.2 材料與方法25-28
  • 2.2.1 實驗材料25-26
  • 2.2.2 實驗方法26-27
  • 2.2.3 分析測試方法27-28
  • 2.2.4 數(shù)據(jù)分析28
  • 2.3 結果與討論28-34
  • 2.3.1 丙酮對短凱倫藻的NOEC值28-29
  • 2.3.2 不同烷基鏈長度PAEs對短凱倫藻藻細胞數(shù)目的影響29-32
  • 2.3.3 不同烷基鏈長度的PAEs對短凱倫藻葉綠素a含量的影響32-34
  • 2.4 小結34-35
  • 3 典型增塑劑對短凱倫藻的氧化脅迫作用35-45
  • 3.1 引言35-36
  • 3.2 材料與方法36-39
  • 3.2.1 實驗材料36-37
  • 3.2.2 實驗方法37
  • 3.2.3 檢測方法37-39
  • 3.2.4 數(shù)據(jù)分析39
  • 3.3 結果與討論39-44
  • 3.3.1 典型增塑劑對短凱倫藻丙二醛(MDA)含量的影響39-40
  • 3.3.2 典型增塑劑對短凱倫藻抗氧化體系酶(SOD、CAT)活性的影響40-42
  • 3.3.3 典型增塑劑對短凱倫藻主要活性氧自由基(O2~(·-)、H_2O_2和~·OH)含量的影響42-44
  • 3.4 小結44-45
  • 4 短凱倫藻在典型增塑劑作用下產生并累積ROS的位點的探究45-54
  • 4.1 引言45
  • 4.2 材料與方法45-48
  • 4.2.1 實驗材料45-46
  • 4.2.2 實驗方法46-47
  • 4.2.3 檢測方法47-48
  • 4.2.4 數(shù)據(jù)分析48
  • 4.3 結果與討論48-53
  • 4.3.1 電子傳遞鏈抑制劑對典型增塑劑誘導藻細胞產生ROS的影響48-50
  • 4.3.2 藻細胞內ROS的產生及累積位點的驗證50-53
  • 4.4 小結53-54
  • 5 結論與展望54-56
  • 5.1 結論54
  • 5.2 創(chuàng)新之處54-55
  • 5.3 展望55-56
  • 參考文獻56-60
  • 致謝60-61
  • 個人簡歷、在學期間發(fā)表的學術論文與研究成果61

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本文編號:1102225

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