miRNAs是一類內(nèi)源性非編碼轉(zhuǎn)錄后調(diào)控的小RNA,通過作用于靶基因m RNA的非編碼區(qū)抑制靶基因翻譯或引起其降解,從而參與基因表達(dá)調(diào)控;在機(jī)體的發(fā)育、增殖、分化、凋亡等生物學(xué)過程中起重要作用。目前研究人員已經(jīng)鑒定了多個物種中存在大量miRNAs,且已有研究表明miRNAs的種子序列與其靶基因3’UTR上的靶標(biāo)位點(diǎn)特異性識別,進(jìn)而調(diào)控黑色素細(xì)胞的生成來影響動物毛色的發(fā)生。課題組在前期研究基礎(chǔ)上發(fā)現(xiàn),miR-202在淺毛色動物皮膚中的表達(dá)量顯著高于深毛色動物。靶基因預(yù)測發(fā)現(xiàn)一些靶基因為顯性白毛調(diào)控基因;其中,kit基因是控制白毛色的主要候選基因,但miR-202是如何調(diào)控這些靶基因從而調(diào)控動物毛色形成的?其是否影響黑色素細(xì)胞的生成?目前未見相關(guān)報道。因此,本研究以不同毛色小鼠皮膚組織為研究對象,利用生物信息學(xué)軟件預(yù)測miR-202與毛色相關(guān)的靶基因。同時通過q PCR和Western blot等方法從m RNA水平、蛋白水平進(jìn)一步明確miR-202及其靶基因在不同毛色小鼠皮膚中相對表達(dá)量的關(guān)系;再通過構(gòu)建雙熒光素酶報告基因載體與miR-202模擬物共轉(zhuǎn)染到HEK293T細(xì)胞中,鑒定miR...

【文章頁數(shù)】：82 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略詞表
引言
第一部分 文獻(xiàn)綜述
    第一章 MiRNAs研究進(jìn)展
        1. miRNAs發(fā)現(xiàn)
        2. miRNAs生物學(xué)功能
        3. miRNAs調(diào)節(jié)靶基因的機(jī)制
    第二章 毛色遺傳研究進(jìn)展
        1. 毛囊的研究進(jìn)展
        2. 毛囊的發(fā)育與調(diào)控
        3. 動物毛色形成的關(guān)鍵因素
    第三章 MiRNAs與毛色遺傳
        1. miRNAs與毛色遺傳的關(guān)系
        2. miR-202 及其生物學(xué)功能
第二部分 研究內(nèi)容
    第一章 MiR-202 在不同毛色小鼠皮膚中的表達(dá)
        1. 實驗材料
        2. 實驗方法
        3. 實驗結(jié)果
        4. 討論
        5. 小結(jié)
    第二章 MiR-202 靶基因的預(yù)測和篩選
        1. 相關(guān)軟件及鏈接
        2. 靶基因預(yù)測及篩選
        3. 實驗結(jié)果
        4. 討論
        5. 小結(jié)
    第三章 靶基因蛋白在不同毛色小鼠皮膚中的表達(dá)
        1. 實驗材料
        2. 實驗方法
        3. 實驗結(jié)果
        4. 討論
        5. 小結(jié)
    第四章 靶基因的體內(nèi)水平鑒定
        1. 實驗材料
        2. 靶基因mRNA水平的鑒定
        3. 靶基因蛋白水平的鑒定
        4. 實驗結(jié)果
        5. 討論
        6. 小結(jié)
    第五章 載體構(gòu)建
        1. 實驗材料
        2. 實驗方法
        3. 實驗結(jié)果
        4. 討論
        5. 小結(jié)
    第六章 MiR-202 及其靶基因體外水平的鑒定
        1. 實驗材料
        2. 實驗方法
        3. 實驗結(jié)果
        4. 討論
        5. 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡介
導(dǎo)師簡介
致謝



本文編號：3808736