發(fā)布時間：2023-04-25 19:50

　　隨著納米銀(AgNPs)產(chǎn)品的商業(yè)化程度越來越高,應(yīng)用越來越廣泛,其暴露到環(huán)境中的風險也在增加,目前關(guān)于AgNPs的生物安全性還沒有一個準確的論斷。本文以SMMC-7721細胞為研究模型,以AgNO₃做陽性對照,采用傳統(tǒng)的毒理學方法研究AgNPs對細胞的生物毒性效應(yīng)。進一步從代謝組學的角度研究AgNPs對細胞胞內(nèi)代謝物及相關(guān)代謝通路的擾動,分析其對細胞生物學活性和功能的影響,旨在揭示AgNPs生物毒性效應(yīng)的潛在機制,這對于金屬納米材料的應(yīng)用及其安全性評價具有重要意義。首先,采用透射電鏡、紫外可見分光光度計、納米粒度分析儀對AgNPs的形態(tài)、粒徑、穩(wěn)定性、分散性及水合粒徑進行表征。測得AgNPs粒徑分布窄,平均粒徑為22.49±4.73 nm,顆粒形態(tài)多呈球形,在DMEM培養(yǎng)基中能穩(wěn)定分散。其次,采用MTT法結(jié)合細胞形態(tài)學觀察檢測了AgNPs、AgNO₃對SMMC-7721細胞活性的影響,結(jié)果顯示在一定濃度范圍內(nèi)AgNPs、AgNO₃會顯著降低SMMC-7721細胞的存活率,且存在劑量依賴性。通過SPSS計算得AgNPs、...

【文章頁數(shù)】：82 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 AgNPs概述
    1.2 AgNPs毒性效應(yīng)的研究現(xiàn)狀
        1.2.1 AgNPs體內(nèi)毒性效應(yīng)研究
        1.2.2 AgNPs體外毒性效應(yīng)研究
    1.3 基于代謝組學的NMs毒性研究
        1.3.1 代謝組學常用方法比較
        1.3.2 代謝組學常用技術(shù)平臺比較
        1.3.3 代謝組學在NMs毒性研究中的應(yīng)用
    1.4 本課題目的意義及研究內(nèi)容
        1.4.1 本課題目的意義
        1.4.2 研究內(nèi)容
第二章 AgNPs材料表征
    2.1 材料與主要儀器
        2.1.1 材料與試劑
        2.1.2 儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 AgNPs粒徑及形貌鑒定
        2.2.2 AgNPs特征峰檢測
        2.2.3 AgNPs水合粒徑及穩(wěn)定性測定
    2.3 實驗結(jié)果
        2.3.1 AgNPs形貌及粒徑表征
        2.3.2 AgNPs的紫外吸收峰
        2.3.3 AgNPs在培養(yǎng)基中的穩(wěn)定性
    2.4 小結(jié)
第三章 AgNPs對 SMMC-7721 細胞的毒性效應(yīng)研究
    3.1 材料與儀器
        3.1.1 主要材料與試劑
        3.1.2 主要儀器
    3.2 細胞培養(yǎng)
        3.2.1 細胞復蘇
        3.2.2 細胞傳代
        3.2.3 細胞凍存
    3.3 實驗方法
        3.3.1 AgNPs對 SMMC-7721 的活性檢測
        3.3.2 AgNPs對 SMMC-7721 的形態(tài)觀察
        3.3.3 AgNPs對 SMMC-7721 的氧化損傷檢測
        3.3.4 AgNPs對 SMMC-7721 的周期檢測
        3.3.5 AgNPs對 SMMC-7721 的凋亡檢測
        3.3.6 統(tǒng)計分析
    3.4 實驗結(jié)果
        3.4.1 AgNPs對 SMMC-7721 細胞活性的影響
        3.4.2 AgNPs對 SMMC-7721 細胞形態(tài)的影響
        3.4.3 AgNPs對 SMMC-7721 細胞的氧化損傷
        3.4.4 AgNPs對細胞周期的影響
        3.4.5 AgNPs對細胞凋亡影響
    3.5 討論
    3.6 小結(jié)
第四章 AgNPs對 SMMC-7721 細胞毒性的代謝組學研究
    4.1 材料與主要儀器
        4.1.1 主要材料與試劑
        4.1.2 主要儀器
    4.2 實驗方法
        4.2.1 細胞染毒
        4.2.2 細胞代謝物提取
        4.2.3 LC-MS分析
        4.2.4 質(zhì)量控制
        4.2.5 代謝數(shù)據(jù)處理與分析
    4.3 實驗結(jié)果
        4.3.1 儀器穩(wěn)定性評價
        4.3.2 PCA統(tǒng)計分析
        4.3.3 OPLS-DA統(tǒng)計分析
        4.3.4 差異代謝物篩選
        4.3.5 代謝通路分析
        4.3.6 生物學意義分析
    4.4 討論
    4.5 小結(jié)
第五章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻
攻讀碩士學位期間發(fā)表的論文及所取得的研究成果
致謝



本文編號：3800946