隨著納米銀(AgNPs)產(chǎn)品的商業(yè)化程度越來越高,應(yīng)用越來越廣泛,其暴露到環(huán)境中的風(fēng)險(xiǎn)也在增加,目前關(guān)于AgNPs的生物安全性還沒有一個(gè)準(zhǔn)確的論斷。本文以SMMC-7721細(xì)胞為研究模型,以AgNO₃做陽性對(duì)照,采用傳統(tǒng)的毒理學(xué)方法研究AgNPs對(duì)細(xì)胞的生物毒性效應(yīng)。進(jìn)一步從代謝組學(xué)的角度研究AgNPs對(duì)細(xì)胞胞內(nèi)代謝物及相關(guān)代謝通路的擾動(dòng),分析其對(duì)細(xì)胞生物學(xué)活性和功能的影響,旨在揭示AgNPs生物毒性效應(yīng)的潛在機(jī)制,這對(duì)于金屬納米材料的應(yīng)用及其安全性評(píng)價(jià)具有重要意義。首先,采用透射電鏡、紫外可見分光光度計(jì)、納米粒度分析儀對(duì)AgNPs的形態(tài)、粒徑、穩(wěn)定性、分散性及水合粒徑進(jìn)行表征。測得AgNPs粒徑分布窄,平均粒徑為22.49±4.73 nm,顆粒形態(tài)多呈球形,在DMEM培養(yǎng)基中能穩(wěn)定分散。其次,采用MTT法結(jié)合細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察檢測了AgNPs、AgNO₃對(duì)SMMC-7721細(xì)胞活性的影響,結(jié)果顯示在一定濃度范圍內(nèi)AgNPs、AgNO₃會(huì)顯著降低SMMC-7721細(xì)胞的存活率,且存在劑量依賴性。通過SPSS計(jì)算得AgNPs、...

【文章頁數(shù)】：82 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 AgNPs概述
    1.2 AgNPs毒性效應(yīng)的研究現(xiàn)狀
        1.2.1 AgNPs體內(nèi)毒性效應(yīng)研究
        1.2.2 AgNPs體外毒性效應(yīng)研究
    1.3 基于代謝組學(xué)的NMs毒性研究
        1.3.1 代謝組學(xué)常用方法比較
        1.3.2 代謝組學(xué)常用技術(shù)平臺(tái)比較
        1.3.3 代謝組學(xué)在NMs毒性研究中的應(yīng)用
    1.4 本課題目的意義及研究內(nèi)容
        1.4.1 本課題目的意義
        1.4.2 研究內(nèi)容
第二章 AgNPs材料表征
    2.1 材料與主要儀器
        2.1.1 材料與試劑
        2.1.2 儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 AgNPs粒徑及形貌鑒定
        2.2.2 AgNPs特征峰檢測
        2.2.3 AgNPs水合粒徑及穩(wěn)定性測定
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 AgNPs形貌及粒徑表征
        2.3.2 AgNPs的紫外吸收峰
        2.3.3 AgNPs在培養(yǎng)基中的穩(wěn)定性
    2.4 小結(jié)
第三章 AgNPs對(duì) SMMC-7721 細(xì)胞的毒性效應(yīng)研究
    3.1 材料與儀器
        3.1.1 主要材料與試劑
        3.1.2 主要儀器
    3.2 細(xì)胞培養(yǎng)
        3.2.1 細(xì)胞復(fù)蘇
        3.2.2 細(xì)胞傳代
        3.2.3 細(xì)胞凍存
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 AgNPs對(duì) SMMC-7721 的活性檢測
        3.3.2 AgNPs對(duì) SMMC-7721 的形態(tài)觀察
        3.3.3 AgNPs對(duì) SMMC-7721 的氧化損傷檢測
        3.3.4 AgNPs對(duì) SMMC-7721 的周期檢測
        3.3.5 AgNPs對(duì) SMMC-7721 的凋亡檢測
        3.3.6 統(tǒng)計(jì)分析
    3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.4.1 AgNPs對(duì) SMMC-7721 細(xì)胞活性的影響
        3.4.2 AgNPs對(duì) SMMC-7721 細(xì)胞形態(tài)的影響
        3.4.3 AgNPs對(duì) SMMC-7721 細(xì)胞的氧化損傷
        3.4.4 AgNPs對(duì)細(xì)胞周期的影響
        3.4.5 AgNPs對(duì)細(xì)胞凋亡影響
    3.5 討論
    3.6 小結(jié)
第四章 AgNPs對(duì) SMMC-7721 細(xì)胞毒性的代謝組學(xué)研究
    4.1 材料與主要儀器
        4.1.1 主要材料與試劑
        4.1.2 主要儀器
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 細(xì)胞染毒
        4.2.2 細(xì)胞代謝物提取
        4.2.3 LC-MS分析
        4.2.4 質(zhì)量控制
        4.2.5 代謝數(shù)據(jù)處理與分析
    4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.3.1 儀器穩(wěn)定性評(píng)價(jià)
        4.3.2 PCA統(tǒng)計(jì)分析
        4.3.3 OPLS-DA統(tǒng)計(jì)分析
        4.3.4 差異代謝物篩選
        4.3.5 代謝通路分析
        4.3.6 生物學(xué)意義分析
    4.4 討論
    4.5 小結(jié)
第五章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文及所取得的研究成果
致謝



本文編號(hào)：3800946