本文關(guān)鍵詞：高壓冷凍固定技術(shù)在生物學(xué)方面的應(yīng)用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：電子顯微鏡的出現(xiàn)使人類的洞察能力提高了數(shù)百倍,不僅看到了病毒,而且看見了一些大分子,即使經(jīng)過特殊制備的某些類型材料樣品里的原子,也能夠被看到。在超薄切片的基礎(chǔ)上,從上世紀(jì)50年代的負(fù)染技術(shù)(分辨率2nm),上世紀(jì)60年代的三維重構(gòu)技術(shù),上世紀(jì)70年代的電子晶體學(xué),一直到上世紀(jì)80年代的快速冷凍技術(shù)(分辨率達(dá)到0.2nm),在短短的幾十年時(shí)間里,電鏡技術(shù)取得了飛躍的發(fā)展,在醫(yī)學(xué)、生物學(xué)、材料學(xué)、地質(zhì)學(xué)、考古學(xué)、天文學(xué)等許多領(lǐng)域中得到了廣泛的應(yīng)用。隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展,電鏡樣品制備技術(shù)也得到飛速發(fā)展,而對(duì)于透射電子顯微鏡的前期制樣也是多種多樣:組織的固定包括化學(xué)固定和物理固定;包埋劑包括常溫包埋劑和低溫包埋劑;切片包括常溫切片和低溫切片;技術(shù)包括常規(guī)電鏡和免疫電鏡;電鏡包括常溫電鏡和低溫電鏡等。每一種方法都有不同的應(yīng)用,本課題就這些方法做出對(duì)比,總結(jié)出每種方法最適宜的應(yīng)用范圍以及對(duì)其的一些改進(jìn)。本課題最主要研究的就是最前沿的物理固定技術(shù),也就是高壓冷凍固定技術(shù)的應(yīng)用。高壓冷凍固定技術(shù)的概念是Hans Moor及其合作者于1968年在瑞士蘇黎世聯(lián)邦理工大學(xué)首次提出的。該技術(shù)的目的是避免在制備生物組織切片時(shí)的化學(xué)固定和滲透造成的不可預(yù)知的影響,從而使得樣品在進(jìn)行超微結(jié)構(gòu)分析時(shí)更加接近生活形態(tài)。關(guān)于透射電子顯微鏡的應(yīng)用,使觀察細(xì)胞、組織及器官的超微結(jié)構(gòu)成為可能。盡管透射電鏡的分辨率已達(dá)到了原子水平,但在生物樣品制備過程中,常規(guī)醛類及鋨酸固定、有機(jī)試劑梯度脫水會(huì)造成一些人為干擾。高壓冷凍固定技術(shù)可有效避免造成這些人為干擾。因?yàn)樵跇O短時(shí)間(30ms)可獲得200μm厚度生物樣品充分玻璃化,從而保證固定下來的樣品非常接近原始狀態(tài)。高壓冷凍技術(shù)與冷凍替代、冷凍切片、冷凍斷裂、光電聯(lián)用等技術(shù)相結(jié)合,可以得到樣品的最真實(shí)的超微結(jié)構(gòu),從而反應(yīng)出生物體內(nèi)的最原始的信息。
【關(guān)鍵詞】：電子顯微鏡 高壓冷凍固定技術(shù) 冷凍替代技術(shù) 冷凍切片技術(shù) 冷凍斷裂技術(shù) 光電聯(lián)用技術(shù) 應(yīng)用
【學(xué)位授予單位】：北京理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：Q-336
【目錄】：

• 摘要5-6
• Abstract6-9
• 第1章 緒論9-12
• 1.1 研究的目的和意義9
• 1.2 國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢(shì)9-12
• 1.2.1 最常規(guī)的電鏡制樣技術(shù)9-10
• 1.2.2 電鏡制樣技術(shù)的最新進(jìn)展10-12
• 第2章 正文12-26
• 2.1 高壓冷凍固定技術(shù)解決的問題：水的結(jié)晶造成的細(xì)胞結(jié)構(gòu)破壞12
• 2.2 高壓冷凍固定技術(shù)的應(yīng)用12-13
• 2.3 高壓冷凍技術(shù)的原理與技術(shù)優(yōu)勢(shì)13-15
• 2.4 通過實(shí)驗(yàn)證明高壓冷凍固定技術(shù)的后續(xù)應(yīng)用15-26
• 第3章 結(jié)論26-28
• 參考文獻(xiàn)28-31
• 致謝31

【相似文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：高壓冷凍固定技術(shù)在生物學(xué)方面的應(yīng)用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：334890