本文關(guān)鍵詞：棉鈴蟲(chóng)C型凝集素3免疫作用機(jī)制的初步研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：無(wú)脊椎動(dòng)物依靠模式識(shí)別受體(pattern recognition receptors, PRRs)識(shí)別入侵病原物的病原相關(guān)分子模式(pathogen-associated molecule patterns, PAMPs),進(jìn)而啟動(dòng)機(jī)體的先天性免疫防御過(guò)程。C型凝集素(C-type lectins, CTLs)作為一種模式識(shí)別受體,在參與機(jī)體對(duì)病原物的識(shí)別和清除的過(guò)程中發(fā)揮重要的作用。本論文主要是在課題組前期研究基礎(chǔ)上,初步探究棉鈴蟲(chóng)C型凝集素3(HaCTL3)參與先天免疫反應(yīng)的功能及其作用機(jī)制：1. rHaCTL3能夠識(shí)別并結(jié)合3種革蘭氏陽(yáng)性菌(Staphylococcus aureus, Microbacterium pumilum, Cellulosimicrobium funkei)和3種革蘭氏陰性菌(Escherichia coli, Vibrio anguillarum, Ochrobactrum cytisi)。并且,rHaCTL3與S. aureus的結(jié)合可被肽聚糖(Peptidoglycan, PGN)和木糖(Xylose)抑制。2.棉鈴蟲(chóng)脂肪體中HaCTL3基因表達(dá)量在注射凝膠珠2 h、6 h后顯著上調(diào),暗示HaCTL3可能參與包囊反應(yīng)。將凝膠珠與rHaCTL3孵育后,能顯著增強(qiáng)棉鈴蟲(chóng)血細(xì)胞對(duì)該凝膠珠的包囊和黑化。此外,無(wú)論是內(nèi)源血漿中HaCTL3蛋白,還是外源rHaCTL3均能識(shí)別并結(jié)合到秀麗隱桿線(xiàn)蟲(chóng)(Caenorhabditis elegans)的體表。3. Western blot證實(shí)HaCTL3在脂肪體和血細(xì)胞中均有表達(dá),并且在變態(tài)期的血漿中也檢測(cè)到了HaCTL3蛋白,表明HaCTL3在合成后可能被釋放至血淋巴中發(fā)揮作用。免疫細(xì)胞化學(xué)進(jìn)一步證實(shí),HaCTL3主要定位于粒細(xì)胞和類(lèi)絳色細(xì)胞。并且,rHaCTL3可以結(jié)合粒細(xì)胞、漿細(xì)胞和類(lèi)絳色細(xì)胞。以上數(shù)據(jù)暗示,HaCTL3在抵御外界病原物(如細(xì)菌和線(xiàn)蟲(chóng))入侵的過(guò)程中發(fā)揮重要的作用。當(dāng)線(xiàn)蟲(chóng)入侵時(shí),HaCTL3可以識(shí)別線(xiàn)蟲(chóng)表面的某種成分,然后招募粒細(xì)胞,漿細(xì)胞和類(lèi)絳色細(xì)胞,進(jìn)而觸發(fā)由血細(xì)胞參與的包囊反應(yīng)和黑化作用,最終殺死入侵物。
【關(guān)鍵詞】：棉鈴蟲(chóng) 模式識(shí)別受體 C型凝集素 包囊 黑化
【學(xué)位授予單位】：華中師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：Q965
【目錄】：

• 摘要6-7
• Abstract7-10
• 1 前言10-17
• 1.1 昆蟲(chóng)先天性免疫概述10-13
• 1.1.1 細(xì)胞免疫10-11
• 1.1.2 體液免疫11-13
• 1.2 無(wú)脊椎動(dòng)物模式識(shí)別受體13-14
• 1.3 C型凝集素(C-type Lectin)14-16
• 1.3.1 C型凝集素的序列特征14
• 1.3.2 昆蟲(chóng)C型凝集素的研究14-16
• 1.4 本論文的研究目的和意義16-17
• 2 材料與方法17-24
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料17-18
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物17
• 2.1.2 細(xì)菌與多糖17
• 2.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑17-18
• 2.1.4 儀器和設(shè)備18
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法18-24
• 2.2.1 rHaCTL3的菌結(jié)合活性分析18-19
• 2.2.2 凝膠珠刺激對(duì)HaCTL3基因表達(dá)量的影響19-20
• 2.2.3 rHaCTL3促進(jìn)血細(xì)胞介導(dǎo)的包囊反應(yīng)20
• 2.2.4 rHaCTL3促進(jìn)凝膠珠體內(nèi)黑化20
• 2.2.5 rHaCTL3促進(jìn)血漿酚氧化酶活性20-21
• 2.2.6 抗HaCTL3抗血清制備21
• 2.2.7 Western-blot21
• 2.2.8 HaCTL3與線(xiàn)蟲(chóng)的結(jié)合實(shí)驗(yàn)21-22
• 2.2.9 HaCTL3蛋白定位分析22-23
• 2.2.10 rHaCTL3與血細(xì)胞的結(jié)合23-24
• 3 結(jié)果24-33
• 3.1 棉鈴蟲(chóng)HaCTL3蛋白序列糖基化修飾預(yù)測(cè)24
• 3.2 重組蛋白rHaCTL3的菌結(jié)合活性分析24-25
• 3.3 凝膠珠刺激上調(diào)棉鈴蟲(chóng)脂肪體HaCTL3基因表達(dá)25-26
• 3.4 重組蛋白rHaCTL3增強(qiáng)血細(xì)胞介導(dǎo)的包囊反應(yīng)26-27
• 3.5 rHaCTL3促進(jìn)凝膠珠在棉鈴蟲(chóng)體內(nèi)的黑化27-28
• 3.6 rHaCTL3-PGN復(fù)合物激活棉鈴蟲(chóng)血漿酚氧化酶活性28-29
• 3.7 HaCTL3與秀麗隱桿線(xiàn)蟲(chóng)的結(jié)合29-31
• 3.8 HaCTL3血細(xì)胞定位分析31-32
• 3.9 rHaCTL3能與粒細(xì)胞,漿細(xì)胞,類(lèi)絳色細(xì)胞直接結(jié)合32-33
• 4 討論33-36
• 參考文獻(xiàn)36-40
• 碩士期間論文發(fā)表情況40-41
• 致謝41

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前8條

1 王金星,趙小凡;無(wú)脊椎動(dòng)物先天免疫模式識(shí)別受體研究進(jìn)展[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2004年02期

2 李軍,富寧;Toll樣受體-9的研究進(jìn)展[J];免疫學(xué)雜志;2004年S1期

3 劉彤云;陳志強(qiáng);;細(xì)胞內(nèi)模式識(shí)別受體NOD2信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及其調(diào)節(jié)[J];生命的化學(xué);2007年01期

4 黃建勛;;淺談模式識(shí)別受體NLR的研究進(jìn)展[J];科技信息;2012年04期

5 劉昕，

本文編號(hào)：295805