本文關(guān)鍵詞： 納豆芽孢桿菌 針板電暈電場 γ-PGA 稀土元素 響應(yīng)面分析 γ-PGA合成酶　出處：《內(nèi)蒙古大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：為了提高納豆芽孢桿菌產(chǎn)γ-聚谷氨酸能力,本試驗(yàn)采用針板高壓電暈電場和稀土元素來處理納豆芽孢桿菌N-0,處理結(jié)果顯示:3kV-30min-0.8cm的針板處理電場,可篩選到γ-PGA產(chǎn)量為21.2g·L-1的菌株N-E5.2,是菌株N-0 y-PGA產(chǎn)量的8倍;稀土元素二次處理,篩選出γ-PGA產(chǎn)量為22.8g.L-1的N-E5.2b,產(chǎn)量又提高了 7.5%,且連續(xù)7次傳代,發(fā)酵性能穩(wěn)定。以納豆芽孢桿菌N-E5.2b為研究對象,進(jìn)行培養(yǎng)基響應(yīng)面優(yōu)化研究構(gòu)建響應(yīng)方程。獲得的優(yōu)化培養(yǎng)基(g·L-1):細(xì)菌學(xué)蛋白胨15、蔗糖46.38、谷氨酸鈉45.85、酵母提取粉 2.5、NaCI5、MgSO4·7H2O0.5、MnSO4·4H2O0.4、CaCI20.25、K2HP04·3H20 5.2和KH2PO42。搖瓶發(fā)酵γ-PGA產(chǎn)量達(dá)38.94 g.L-1,較優(yōu)化前提高了70.8%。提取和擴(kuò)增6株不同處理菌株的pgsBCA合成酶基因,對比這6株菌的pgsB、pgsC和pgsA的基因序列及合成酶蛋白PgsB、PgsC和PgsA的氨基酸序列差異。結(jié)果顯示:pgsB、pgsC 和和pgsA基因分別約含11 70個、450個和1140個核苷酸,分別編碼約390個、150個和380個氨基酸。高壓電暈電場和稀土元素促使pgsBCA基因序列發(fā)生了堿基的置換和顛換、插入和缺失,合成酶PgsBCA氨基酸序列出現(xiàn)多處氨基酸間的替換、插入和缺失,且對序列的開端和尾端影響較大,PgsA在30～40個氨基酸區(qū)間變化顯著。
[Abstract]:In order to improve the ability of producing 緯 -polyglutamic acid from Bacillus natto, N-0 of Bacillus natto was treated with high electric field and rare earth elements. The results showed that the strain N-E5.2 with 緯 -PGA yield of 21.2 g 路L ~ (-1) could be screened by the needle plate treatment electric field of 30 min -0.8 cm. The yield of N-0y-PGA was 8 times of that of strain N-0y-PGA. The yield of 緯 -PGA was 22.8g 路L ~ (-1) N-E 5.2b, the yield was increased by 7.5g 路L ~ (-1). The fermentation performance was stable. Bacillus natto N-E5.2b was used as the research object. The response equation was established by optimizing the response surface of culture medium. The optimized medium was: bacteriological peptone 15, sucrose 46.38, sodium glutamate 45.85. The yeast extract was 2.5% NaCI5, MgSO4 路7H2O 0.5MNO _ 4 路4H _ 2O _ (0.4) and CaCI _ (20.25). K2HP04 路3H20 5.2 and KH2PO422.The yield of 緯 -PGA reached 38.94 g 路L ~ (-1). The pgsBCA synthase genes of 6 strains treated with different treatments were extracted and amplified, and the pgsB of the 6 strains were compared. The gene sequence of pgsC and pgsA and the amino acid sequence of PgsBU PgsC and PgsA were different. PgsC and pgsA genes contain about 11 70 nucleotides, 450 nucleotides and 1 140 nucleotides respectively, encoding 390 nucleotides, respectively. 150 amino acids and 380 amino acids. High voltage halo electric field and rare earth elements lead to the replacement, transversion, insertion and deletion of pgsBCA gene sequence. Substitution, insertion and deletion of multiple amino acids were observed in the amino acid sequence of the synthase PgsBCA, and significant changes of PgsA were observed in the range of 30-40 amino acids, which had a great influence on the beginning and end of the sequence.
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：Q936

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1454591