阿特拉津是世界范圍內(nèi)最常使用的農(nóng)業(yè)除草劑之一,被世界衛(wèi)生組織列為潛在的內(nèi)分泌干擾物(EDC),能夠侵害生殖器官,引發(fā)生殖功能障礙,導(dǎo)致睪丸發(fā)育異常,干擾精子生成,但其睪丸毒性作用的機(jī)制仍不清楚。有著“植物黃金”之稱的番茄紅素是抗氧化功能最強(qiáng)的類胡蘿卜素,在睪丸組織中分布豐富,為防治阿特拉津造成的睪丸毒性提供線索。為了探究番茄紅素拮抗阿特拉津致雄性小鼠睪丸發(fā)育毒性的機(jī)制,本試驗(yàn)選用350只SPF級(jí)雄性昆明小鼠隨機(jī)分成7組(50只/組):Con組(對(duì)照組)、Vcon(受試物溶媒對(duì)照組)、LYC組(5 mg/kg番茄紅素組)、ATRⅠ組(50 mg/kg阿特拉津組)、ATRⅡ組(200 mg/kg阿特拉津組)、ATRⅠ+LYC組(50 mg/kg阿特拉津+5 mg/kg番茄紅素組)和ATRⅠ+LYC組(200 mg/kg阿特拉津+5 mg/kg番茄紅素組),采用灌胃方式連續(xù)處理21 d。觀察睪丸形態(tài)結(jié)構(gòu)與功能變化,生殖細(xì)胞、睪丸支持細(xì)胞、睪丸間質(zhì)細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu),檢測(cè)精子相關(guān)參數(shù)及精子發(fā)生相關(guān)因子、睪酮(T)分泌及相關(guān)調(diào)控因子、緊密連接蛋白的表達(dá)、線粒體動(dòng)力學(xué)及功能、抗氧化功能、SIRT3介導(dǎo)的...

【文章頁數(shù)】：115 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
英文摘要
1 引言
    1.1 阿特拉津的概述
    1.2 阿特拉津的生殖毒性
        1.2.1 阿特拉津生殖毒性的研究進(jìn)展
        1.2.2 阿特拉津生殖毒性機(jī)制的研究進(jìn)展
    1.3 阿特拉津生殖毒性拮抗效應(yīng)物的研究
    1.4 番茄紅素的概述
    1.5 番茄紅素對(duì)生殖系統(tǒng)的保護(hù)作用
    1.6 線粒體動(dòng)力學(xué)參與生殖系統(tǒng)健康調(diào)控的研究進(jìn)展
    1.7 SIRT3 介導(dǎo)的線粒體健康調(diào)控
        1.7.1 SIRT3 的結(jié)構(gòu)與功能
        1.7.2 SIRT3 信號(hào)通路在線粒體健康調(diào)控中的作用
    1.8 SIRT3 信號(hào)通路參與生殖系統(tǒng)健康調(diào)控的研究進(jìn)展
    1.9 試驗(yàn)的目的與意義
2 材料與方法
    2.1 主要儀器與試劑
        2.1.1 主要儀器
        2.1.2 主要試劑
    2.2 試驗(yàn)動(dòng)物與檢測(cè)方法
        2.2.1 動(dòng)物分組與處理
        2.2.2 動(dòng)物試驗(yàn)技術(shù)路線
        2.2.3 臨床癥狀的觀察
        2.2.4 精子相關(guān)檢測(cè)方法
        2.2.5 睪丸及附睪組織形態(tài)學(xué)觀察
        2.2.6 睪丸組織超微結(jié)構(gòu)觀察
        2.2.7 睪丸組織阿特拉津及其代謝產(chǎn)物的檢測(cè)方法
        2.2.8 睪丸組織CYP450 酶系的檢測(cè)方法
        2.2.9 睪丸組織抗氧化功能檢測(cè)方法
        2.2.10 血清激素的檢測(cè)方法
        2.2.11 精子發(fā)生的檢測(cè)方法
        2.2.12 睪丸間質(zhì)細(xì)胞損傷的檢測(cè)方法
        2.2.13 睪丸支持細(xì)胞損傷的檢測(cè)方法
        2.2.14 SIRT3 介導(dǎo)的線粒體健康調(diào)控通路的檢測(cè)方法
        2.2.15 睪丸組織線粒體自噬的檢測(cè)方法
        2.2.16 睪丸組織凋亡的檢測(cè)方法
    2.3 TM3 細(xì)胞及其檢測(cè)項(xiàng)目與方法
        2.3.1 TM3 細(xì)胞及培養(yǎng)
        2.3.2 TM3 細(xì)胞分組與處理
        2.3.3 TM3 細(xì)胞試驗(yàn)技術(shù)路線
        2.3.4 TM3 細(xì)胞形態(tài)的觀察
        2.3.5 TM3 細(xì)胞活性檢測(cè)方法
        2.3.6 TM3 細(xì)胞中SIRT3 介導(dǎo)的線粒體健康調(diào)控通路的檢測(cè)方法
        2.3.7 TM3 細(xì)胞線粒體自噬的檢測(cè)方法
        2.3.8 TM3 細(xì)胞凋亡的檢測(cè)方法
    2.4 TM4 細(xì)胞及其檢測(cè)項(xiàng)目與方法
        2.4.1 TM4 細(xì)胞及培養(yǎng)
        2.4.2 TM4 細(xì)胞分組與處理
        2.4.3 TM4 細(xì)胞試驗(yàn)技術(shù)路線
        2.4.4 TM4 細(xì)胞形態(tài)的觀察
        2.4.5 TM4 細(xì)胞活性檢測(cè)方法
        2.4.6 TM4 細(xì)胞中SIRT3 介導(dǎo)的線粒體健康調(diào)控通路的檢測(cè)方法
        2.4.7 TM4 細(xì)胞線粒體自噬的檢測(cè)方法
        2.4.8 TM4 細(xì)胞凋亡的檢測(cè)方法
    2.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
3 結(jié)果與分析
    3.1 番茄紅素拮抗阿特拉津致小鼠生殖毒性檢測(cè)結(jié)果
        3.1.1 小鼠臨床癥狀的觀察
        3.1.2 小鼠精子參數(shù)檢測(cè)結(jié)果
        3.1.3 小鼠睪丸及附睪形態(tài)學(xué)損傷的觀察
        3.1.4 小鼠睪丸組織中阿特拉津及DACT檢測(cè)結(jié)果
        3.1.5 小鼠睪丸組織CYP450 酶系檢測(cè)結(jié)果
        3.1.6 小鼠睪丸組織抗氧化功能檢測(cè)結(jié)果
        3.1.7 小鼠血清激素檢測(cè)結(jié)果
        3.1.8 小鼠精子發(fā)生障礙檢測(cè)結(jié)果
        3.1.9 小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞損傷檢測(cè)結(jié)果
        3.1.10 小鼠睪丸支持細(xì)胞損傷檢測(cè)結(jié)果
        3.1.11 小鼠SIRT3 介導(dǎo)的線粒體損傷檢測(cè)結(jié)果
        3.1.12 小鼠睪丸組織自噬檢測(cè)結(jié)果
        3.1.13 小鼠睪丸組織凋亡檢測(cè)結(jié)果
    3.2 番茄紅素拮抗阿特拉津致TM3 細(xì)胞毒性檢測(cè)項(xiàng)目結(jié)果
        3.2.1 TM3 細(xì)胞阿特拉津及番茄紅素濃度的篩選
        3.2.2 TM3 細(xì)胞SIRT3 介導(dǎo)的線粒體損傷檢測(cè)結(jié)果
        3.2.3 TM3 細(xì)胞線粒體自噬檢測(cè)結(jié)果
        3.2.4 TM3 細(xì)胞凋亡檢測(cè)結(jié)果
    3.3 番茄紅素拮抗阿特拉津致TM4 細(xì)胞毒性檢測(cè)項(xiàng)目結(jié)果
        3.3.1 TM4 細(xì)胞阿特拉津及番茄紅素濃度的篩選
        3.3.2 TM4 細(xì)胞SIRT3 介導(dǎo)的線粒體損傷檢測(cè)結(jié)果
        3.3.3 TM4 細(xì)胞線粒體自噬檢測(cè)結(jié)果
        3.3.4 TM4 細(xì)胞凋亡檢測(cè)結(jié)果
4 討論
    4.1 番茄紅素通過SIRT3 信號(hào)通路拮抗阿特拉津致小鼠睪丸毒性
        4.1.1 番茄紅素拮抗阿特拉津致睪丸毒性的影響
        4.1.2 番茄紅素拮抗阿特拉津致精子發(fā)生障礙的影響
        4.1.3 番茄紅素拮抗阿特拉津致睪丸間質(zhì)細(xì)胞損傷及睪酮合成障礙的影響
        4.1.4 番茄紅素拮抗阿特拉津致睪丸支持細(xì)胞損傷及緊密連接的影響
        4.1.5 番茄紅素拮抗阿特拉津致SIRT3 介導(dǎo)的睪丸組織線粒體損傷的影響
        4.1.6 番茄紅素拮抗阿特拉津致睪丸組織線粒體自噬的影響
    4.2 番茄紅素通過SIRT3 信號(hào)通路拮抗阿特拉津致TM3 細(xì)胞毒性
    4.3 番茄紅素通過SIRT3 信號(hào)通路拮抗阿特拉津致TM4 細(xì)胞毒性
5 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文



本文編號(hào)：4015534