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一株銅綠微囊藻抑藻菌的分離鑒定及其抑藻特性研究

發(fā)布時間:2024-01-21 15:00
  芽孢桿菌屬的細(xì)菌因具有分解轉(zhuǎn)化水體中的有機(jī)物和氮磷等污染物、抑制水體藍(lán)藻生長的功能而廣受關(guān)注,其對維護(hù)養(yǎng)殖水體的生態(tài)平衡、修復(fù)退化的生態(tài)系統(tǒng)意義重大。論文從富營養(yǎng)化的養(yǎng)殖水體中分離得到多株細(xì)菌,通過抑藻功能的初篩獲得了一株較為理想的抑藻菌株SK-1,利用生理生化特性結(jié)合16S rDNA序列分析對其進(jìn)行了鑒定。在此基礎(chǔ)上研究了SK-1菌株的生長特性、菌體以及代謝產(chǎn)物對銅綠微囊藻(Microcystis aeruginosa)的抑制效果、代謝產(chǎn)物的特性、與銅綠微囊藻共存時對水體營養(yǎng)鹽的競爭及相互影響、對養(yǎng)殖水體中養(yǎng)殖生物的應(yīng)用安全性以及對藍(lán)藻水華的生態(tài)防控。研究結(jié)果表明:1、采用芽孢桿菌富集與分離培養(yǎng)基從富營養(yǎng)的養(yǎng)殖水體環(huán)境中定向分離得到5株菌株,經(jīng)10d的抑藻試驗,發(fā)現(xiàn)SK-1菌株對銅綠微囊藻葉綠素的抑制率最大,達(dá)59.5%,與其它4株菌的差異顯著,故選擇其作為抑藻細(xì)菌加以重點研究。2、分析觀察了抑藻細(xì)菌SK-1的菌落、菌體形態(tài),進(jìn)行了生理生化特征和16S rDNA序列的分析,結(jié)合上述結(jié)果確定SK-1菌株屬于側(cè)孢芽孢桿菌(Bacillus laterosporus)。3、側(cè)孢茅孢桿菌SK...

【文章頁數(shù)】:83 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 綜述
    1 養(yǎng)殖水體中的藍(lán)藻水華
        1.1 養(yǎng)殖水體中藍(lán)藻水華的成因
        1.2 養(yǎng)殖水體中藍(lán)藻水華的危害
        1.3 養(yǎng)殖水體中藍(lán)藻水華的防治研究進(jìn)展
            1.3.1 物理除藻法
            1.3.2 化學(xué)除藻法
            1.3.3 生物防治法
    2 抑藻微生物的研究進(jìn)展
        2.1 抑藻菌的種類
        2.2 抑藻菌的作用方式
            2.2.1 直接作用抑藻
            2.2.2 間接作用抑藻
            2.2.3 綜合作用抑藻
        2.3 抑藻活性物質(zhì)的種類
        2.4 抑藻菌在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用進(jìn)展
    3 芽孢桿菌在水產(chǎn)養(yǎng)殖及水體富營養(yǎng)化控制中的應(yīng)用
    4 本課題的研究意義與研究內(nèi)容
        4.1 本課題的研究意義
        4.2 本課題的主要研究內(nèi)容
第二章 一株銅綠微囊藻抑藻菌的分離鑒定及其生長特性的研究
    1 材料與方法
        1.1 試驗生物及試劑
        1.2 儀器
    2 試驗方法
        2.1 培養(yǎng)基的配制
        2.2 菌種的富集與分離
        2.3 抑藻菌的初篩
        2.4 抑藻菌的活化與制備
        2.5 抑藻菌的生理生化特性分析
            2.5.1 菌落形態(tài)以及菌株生理生化特性分析
            2.5.2 菌株的16S rDNA分析
        2.6 抑藻菌的適宜生長條件與生長曲線
            2.6.1 抑藻菌最適生長的溫度、初始pH和搖床轉(zhuǎn)速的確定
            2.6.2 抑藻菌生長曲線的繪制
        2.7 分析方法
    3 結(jié)果與分析
        3.1 從養(yǎng)殖水體中富集和分離的主要菌株
        3.2 抑藻菌的初篩
        3.3 所篩抑藻菌的菌落形態(tài)與菌體形態(tài)
        3.4 菌株的生理生化特性分析
        3.5 抑藻菌菌株的16S rDNA分析
        3.6 抑藻菌的最適生長條件的確定
            3.6.1 抑藻菌最適生長溫度的確定
            3.6.2 抑藻菌最適生長起始pH的確定
            3.6.3 抑藻菌生長的最適振蕩速率的確定
        3.7 抑藻菌的最適生長曲線的繪制
    4 小結(jié)
第三章 側(cè)孢芽孢桿菌SK-1的菌體及其代謝產(chǎn)物對銅綠微囊藻的抑制
    1 材料與方法
        1.1 試驗藻種和菌種
        1.2 試劑
        1.3 儀器
    2 試驗方法
        2.1 側(cè)孢芽孢桿菌SK-1菌體及無菌濾液的制備
        2.2 銅綠微囊藻的培養(yǎng)
        2.3 側(cè)孢芽孢桿菌SK-1菌體對銅綠微囊藻的抑制
        2.4 無菌濾液對銅綠微囊藻的抑制作用
        2.5 細(xì)菌培養(yǎng)基對銅綠微囊藻的影響
        2.6 分析方法
    3 結(jié)果與分析
        3.1 側(cè)孢芽孢桿菌SK-1菌體對銅綠微囊藻的抑制
        3.2 無菌濾液對銅綠微囊藻的抑制作用
        3.3 細(xì)菌培養(yǎng)基對銅綠微囊藻的影響
        3.4 側(cè)孢芽孢桿菌SK-1菌株抑藻作用機(jī)理的探究
    4 小結(jié)
第四章 側(cè)孢芽孢桿菌(Bacillus laterosporus)對銅綠微囊藻(Microcystis aeruginosa)生長脅迫的研究
    1 材料與方法
        1.1 試驗生物與培養(yǎng)條件
        1.2 試劑
        1.3 儀器
    2 試驗方法
        2.1 培養(yǎng)基的配制
        2.2 藻菌共適培養(yǎng)基質(zhì)的選擇和優(yōu)化
            2.2.1 藻菌的馴化
            2.2.2 側(cè)孢芽孢桿菌和銅綠微囊藻在共適培養(yǎng)基中的生長曲線
        2.3 側(cè)孢芽孢桿菌脅迫下銅綠微囊藻生長情況
            2.3.1 共基質(zhì)中初始生長的側(cè)孢芽孢桿菌對指數(shù)生長期銅綠微囊藻的脅迫影響
            2.3.2 共基質(zhì)中初始生長的側(cè)孢芽孢桿菌對初始生長的銅綠微囊藻的脅迫影響
            2.3.3 共基質(zhì)中穩(wěn)定期的側(cè)孢芽孢桿菌對初始生長的銅綠微囊藻的脅迫影響
        2.4 分析方法
    3 結(jié)果與分析
        3.1 藻菌共適培養(yǎng)基質(zhì)的選擇和優(yōu)化
        3.2 側(cè)孢芽孢桿菌和銅綠微囊藻在共適培養(yǎng)基質(zhì)中的生長曲線
        3.3 側(cè)孢芽孢桿菌脅迫下銅綠微囊藻生長情況
            3.3.1 共基質(zhì)中初始生長的側(cè)孢芽孢桿菌對指數(shù)生長期銅綠微囊藻的脅迫影響
            3.3.2 共基質(zhì)中初始生長的側(cè)孢芽孢桿菌對初始生長的銅綠微囊藻的脅迫影響
            3.3.3 共基質(zhì)中處于生長穩(wěn)定期的側(cè)孢芽孢桿菌對初始生長的銅綠微囊藻的脅迫影響
            3.3.4 側(cè)孢芽孢桿菌和銅綠微囊藻共存時基質(zhì)中無機(jī)氮的變化
            3.3.5 共基質(zhì)中側(cè)孢芽孢桿菌與銅綠微囊藻的生存關(guān)系
    4 小結(jié)
第五章 側(cè)孢芽孢桿菌SK-1抑藻物質(zhì)特性的初步研究
    1 材料與方法
        1.1 試驗菌種與藻種
        1.2 試劑
        1.3 儀器
    2 試驗方法
        2.1 培養(yǎng)基的配制
        2.2 側(cè)孢芽孢桿菌SK-1抑藻物質(zhì)的收集
        2.3 側(cè)孢芽孢桿菌SK-1抑藻物質(zhì)的耐熱性分析
        2.4 側(cè)孢芽孢桿菌SK-1抑藻物質(zhì)的酸堿穩(wěn)定性分析
        2.5 側(cè)孢芽孢桿菌SK-1抑藻物質(zhì)的溶解性質(zhì)分析
        2.6 側(cè)孢芽孢桿菌SK-1抑藻物質(zhì)的紫外吸收光譜
        2.7 側(cè)孢芽孢桿菌SK-1抑藻物質(zhì)的初步分離
        2.8 分析方法
    3 結(jié)果與分析
        3.1 側(cè)孢芽孢桿菌SK-1抑藻物質(zhì)的耐熱性分析
        3.2 側(cè)孢芽孢桿菌SK-1抑藻物質(zhì)的酸堿穩(wěn)定性分析
        3.3 側(cè)孢芽孢桿菌SK-1抑藻物質(zhì)的溶解性質(zhì)分析
        3.4 側(cè)孢芽孢桿菌SK-1抑藻物質(zhì)的紫外吸收光譜
        3.5 側(cè)孢芽孢桿菌SK-1抑藻物質(zhì)的初步分離
    4 小結(jié)
第六章 側(cè)孢芽孢桿菌對養(yǎng)殖水體中藍(lán)藻水華的生態(tài)防控
    1 材料與方法
        1.1 試驗材料
        1.2 儀器與試劑
        1.3 側(cè)孢芽孢桿菌菌液的制備
        1.4 側(cè)孢芽孢桿菌菌液對斑馬魚的急性、亞急性毒性及胚胎毒性試驗
        1.5 側(cè)孢芽孢桿菌對養(yǎng)殖水體中藍(lán)藻水華的生態(tài)防控
        1.6 分析方法
    2 結(jié)果與討論
        2.1 側(cè)孢芽孢桿菌菌液對斑馬魚的急性、亞急性毒性及胚胎毒性試驗
        2.2 側(cè)孢芽孢桿菌對養(yǎng)殖水體中藍(lán)藻水華的生態(tài)防控
    3 小結(jié)
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
科研情況



本文編號:3882209

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