隨著內(nèi)分泌干擾物在環(huán)境中引起的問題越來越嚴重，其對生物體的生長發(fā)育的影響也逐漸成為人們關注的焦點。乙炔基雌二醇(EE2)與鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)作為兩種重要的內(nèi)分泌干擾物，已受到了很多學者的關注。通過研究鄰苯二甲酸酯和雌激素對斑馬魚生長發(fā)育的毒性，可以了解環(huán)境中主要內(nèi)分泌干擾物對魚類的干擾效應的基本模式，并為這兩類物質(zhì)在環(huán)境中的潛在風險評價提供依據(jù)。 本文首先研究了EE2和DBP對斑馬魚胚胎發(fā)育的單一及聯(lián)合毒性，觀察斑馬魚胚胎發(fā)育的變化，統(tǒng)計各暴露組斑馬魚胚胎死亡率和孵化率，并對聯(lián)合作用類型進行了探討。結果表明，斑馬魚的胚胎發(fā)育對EE2和DBP的毒性作用較為敏感，均表現(xiàn)出顯著的濃度依賴性和時間的累加效應，可以造成胚胎發(fā)育畸形（尾畸、水腫、脊柱彎曲、孵化延遲等）甚至死亡；DBP的毒性作用高于EE2，DBP和EE2的96h-LC50分別為2.219mg/L，3.975mg/L；EE2和DBP組合在不同時間和濃度有不同的效應類型，在80h時二者之間表現(xiàn)出拮抗作用，96h時則表現(xiàn)出協(xié)同作用。 為了了解二者對斑馬魚的復合內(nèi)分泌干擾效應，本文分別研究了EE2與DBP對斑馬魚幼魚及成年雄魚卵黃蛋...

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【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 環(huán)境內(nèi)分泌干擾物概述
        1.1.1 分類及理化性質(zhì)
        1.1.2 來源及危害
        1.1.3 作用機制
        1.1.4 雌激素類概述
        1.1.5 鄰苯二甲酸酯類概述
    1.2 斑馬魚及其在環(huán)境內(nèi)分泌干擾物研究中的應用
        1.2.1 斑馬魚的生物學特性及優(yōu)勢
        1.2.2 在環(huán)境內(nèi)分泌干擾物研究中的應用
    1.3 環(huán)境內(nèi)分泌干擾物復合效應研究進展
        1.3.1 環(huán)境污染物復合作用理論
        1.3.2 同類內(nèi)分泌干擾物的聯(lián)合效應
        1.3.3 不同種類內(nèi)分泌干擾物的復合效應
        1.3.4 內(nèi)分泌干擾物復合效應研究中的生物標志物
    1.4 研究意義和內(nèi)容
        1.4.1 研究意義
        1.4.2 研究內(nèi)容
        1.4.3 創(chuàng)新點
        1.4.4 技術路線
第二章 EE2 與 DBP 對斑馬魚胚胎發(fā)育的聯(lián)合毒性
    2.1 材料與方法
        2.1.1 試驗用斑馬魚
        2.1.2 試劑及儀器
        2.1.3 試驗方法
        2.1.4 觀察指標
        2.1.5 數(shù)據(jù)分析
    2.2 結果與分析
        2.2.1 DBP、EE2 單一或聯(lián)合暴露對斑馬魚胚胎死亡率的影響
        2.2.2 DBP、EE2 單一或聯(lián)合暴露對斑馬魚胚胎孵化率的影響
        2.2.3 DBP、EE2 單一或聯(lián)合暴露對斑馬魚胚胎發(fā)育的影響
        2.2.4 DBP、EE2 等毒性效應聯(lián)合作用
    2.3 討論
        2.3.1 DBP、EE2 對斑馬魚胚胎的單一毒性
        2.3.2 DBP、EE2 對斑馬魚胚胎的聯(lián)合毒性
    2.4 本章小結
第三章 EE2 與 DBP 對斑馬魚卵黃蛋白原的聯(lián)合效應
    3.1 材料與方法
        3.1.1 試驗用斑馬魚
        3.1.2 試劑及儀器
    3.2 試驗方法
        3.2.1 毒性試驗
        3.2.2 全組織勻漿液的制備
        3.2.3 BCA 法測蛋白含量
        3.2.4 VTG 的 ELISA 檢測
        3.2.5 SDS-PAGE 蛋白電泳及 Western Blotting 免疫印跡檢測
        3.2.6 析因設計
        3.2.7 數(shù)據(jù)分析
    3.3 結果與討論
        3.3.1 DBP、EE2 聯(lián)合暴露對幼魚 VTG 含量的影響
        3.3.2 DBP、EE2 聯(lián)合暴露對成年雄魚 VTG 含量的影響
        3.3.3 不同生長階段對 VTG 的不同響應
    3.4 本章小結
第四章 EE2 和 DBP 長期暴露對斑馬魚生長發(fā)育和性別分化的聯(lián)合效應
    4.1 材料與方法
        4.1.1 試驗用斑馬魚
        4.1.2 試劑及儀器
    4.2 試驗方法
        4.2.1 毒性試驗
        4.2.2 實際暴露濃度的測定
        4.2.3 數(shù)據(jù)分析
    4.3 結果與討論
        4.3.1 EE2 與 DBP 實際暴露濃度
        4.3.2 存活率、體長、體重及肥滿度變化
        4.3.3 DBP、EE2 聯(lián)合暴露對斑馬魚組織結構的影響
        4.3.4 DBP、EE2 聯(lián)合暴露對斑馬魚性別比例的影響
    4.4 本章小結
第五章 EE2 和 DBP 對成年雄性斑馬魚生長發(fā)育和生殖功能的聯(lián)合毒性
    5.1 材料與方法
        5.1.1 試驗用斑馬魚
        5.1.2 試劑及儀器
    5.2 試驗方法
        5.2.1 毒性試驗
        5.2.2 AOX 的 ELISA 檢測
        5.2.3 實際暴露濃度的測定
        5.2.4 數(shù)據(jù)分析
    5.3 結果與討論
        5.3.1 EE2 與 DBP 實際暴露濃度
        5.3.2 DBP、EE2 聯(lián)合暴露對成年雄魚存活率、體長、體重及肥滿度指數(shù)的影響
        5.3.3 DBP、EE2 聯(lián)合暴露對斑馬魚 AOX 蛋白含量的影響
        5.3.4 DBP、EE2 聯(lián)合暴露對斑馬魚組織結構的影響
        5.3.5 DBP、EE2 聯(lián)合暴露對雄性斑馬魚生殖功能的影響
    5.4 本章小結
第六章 結論與展望
    6.1 結論
    6.2 展望
參考文獻
攻讀碩士學位期間發(fā)表的論文
致謝



本文編號：3843079