三聚氰胺是一種三嗪類含氮雜環(huán)化工原料，因其含氮量高達66.6%，所以被非法添加到蛋白類食品、飼料甚至牛奶中，從而導致了2007年美國的寵物中毒事件以及2008年震驚中外的三鹿奶粉事件，社會反響極其惡劣。盡管有關三聚氰胺的急性毒性，亞慢性毒性和慢性毒性研究較多，但都集中在泌尿系統，對其遺傳毒效應的研究報道卻很少，此外，傳統的三聚氰胺色譜檢測方法和目前研發(fā)的拉曼散射，熒光，吸收光譜等光學檢測法，均因儀器昂貴，操作繁瑣，無法滿足現場檢測要求。因此，本論文深入研究了三聚氰胺及其主要代謝產物三聚氰酸的遺傳毒效應，為探明三聚氰胺對人體健康的影響提供了科學依據；同時，利用的納米金和適配體修飾的納米金為傳感器，開發(fā)了三聚氰胺簡便、快速的檢測方法，為嚴格控制和監(jiān)管三聚氰胺的濫用情況提供了技術依托。 主要研究結果如下： 采用不同濃度的三聚氰胺進行Ames試驗，無論有沒有大鼠肝勻漿S-9混合液，其對TA97，TA98，TA100，TA102四種菌株的誘變回變菌落數均沒有超過自發(fā)回變菌落數的2倍（MR小于2）。在Ames試驗的基礎上，又進行三聚氰胺的倉鼠卵巢細胞（CHO）染色體畸變試驗，結果表明，各劑量組的細...

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【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
目錄
圖表清單
縮略表
第一章 緒論
    1.1 三聚氰胺的概述
        1.1.1 三聚氰胺的性質
        1.1.2 三聚氰胺的用途
        1.1.3 國內外三聚氰胺事件
    1.2 三聚氰胺的毒理學研究進展
        1.2.1 三聚氰胺的毒性研究進展
        1.2.2 三聚氰胺的代謝機制
        1.2.3 三聚氰胺的中毒機制
    1.3 三聚氰胺的檢測方法
        1.3.1 容量分析法
        1.3.2 色譜分析法
        1.3.3 免疫化學分析法
        1.3.4 光學分析法
    1.4 納米金和核酸適配體在分析檢測領域的應用
        1.4.1 納米金在分析檢測領域的應用
        1.4.2 適配體傳感器技術在分析領域的應用
    1.5 研究目的意義及主要研究內容
        1.5.1 論文研究背景及意義
        1.5.2 論文主要研究內容
        1.5.3 論文的技術路線
第二章 三聚氰胺的 Ames 試驗和倉鼠卵巢細胞染色體畸變試驗
    2.1 引言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 材料
        2.2.2 試驗方法
    2.3 結果與分析
        2.3.1 三聚氰胺 Ames 試驗結果
        2.3.2 染色體畸變試驗結果
    2.4 小結
        2.4.1 Ames 試驗方法評價
        2.4.2 染色體畸變試驗方法評價及注意事項
        2.4.3 試驗結果討論
第三章 三聚氰胺及其代謝產物對小鼠骨髓嗜多染紅細胞的微核效應
    3.1 引言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 材料
        3.2.2 試驗方法
    3.3 結果與分析
        3.3.1 三聚氰酸對小鼠骨髓嗜多染紅細胞的微核效應
        3.3.2 三聚氰胺對小鼠骨髓嗜多染紅細胞的微核效應
    3.4 小結
        3.4.1 試驗方法評價及注意事項
        3.4.2 試驗結果討論
第四章 三聚氰胺對小鼠睪丸細胞的 DNA 損傷
    4.1 引言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 材料
        4.2.2 試驗方法
    4.3 結果與分析
        4.3.1 細胞顯微圖像與 DNA 損傷
        4.3.2 三聚氰胺對小鼠睪丸細胞 DNA 損傷程度的影響
    4.4 小結
        4.4.1 SCGE 技術評價
        4.4.2 三聚氰胺對小鼠睪丸細胞 DNA 損傷評價
        4.4.3 三聚氰胺的遺傳毒效應綜合評價
第五章 納米金比色法檢測牛奶中三聚氰胺
    5.1 引言
    5.2 儀器與試劑
        5.2.1 試驗儀器
        5.2.2 試劑
    5.3 實驗方法
        5.3.1 AuNPs 的制備
        5.3.2 反應條件對 AuNPs 顆粒粒徑大小的影響
        5.3.3 AuNPs 檢驗牛奶中三聚氰胺原理及表征試驗
        5.3.4 基于 AuNPs 的快速檢測方法的優(yōu)化
        5.3.5 快速檢測方法的建立及驗證
        5.3.6 牛奶樣品的前處理研究
    5.4 結果與分析
        5.4.1 反應條件對 AuNPs 顆粒粒徑大小的影響結果
        5.4.2 AuNPs 檢驗牛奶中三聚氰胺的原理及表征試驗結果
        5.4.3 基于 AuNPs 的快速檢測方法的優(yōu)化結果
        5.4.4 牛奶中三聚氰胺檢測標準曲線的建立
        5.4.5 牛奶樣品中三聚氰胺的檢測
        5.4.6 牛奶樣品的前處理研究
    5.5 小結
        5.5.1 納米金制備的注意事項
        5.5.2 納米金比色法檢測牛奶中三聚氰胺方法綜合評價
第六章 適配體修飾的納米金比色法檢測三聚氰胺
    6.1 引言
    6.2 儀器與試劑
        6.2.1 試驗儀器
        6.2.2 試劑
    6.3 試驗方法
        6.3.1 AuNPs 的制備
        6.3.2 樣品前處理
        6.3.3 反應體系的表征試驗
        6.3.4 基于適配體修飾的納米金快速檢測方法的優(yōu)化
        6.3.5 檢測方法的建立及方法學考察
    6.4 結果與分析
        6.4.1 適配體修飾的 AuNPs 檢測三聚氰胺的原理
        6.4.2 圓二色譜光譜特征
        6.4.3 AuNPs 的透射電鏡掃描
        6.4.4 溶液離子強度對反應體系的影響
        6.4.5 體系 aptamer 和 PDDA 濃度的優(yōu)化結果
        6.4.6 反應時間的優(yōu)化結果
        6.4.7 檢測方法的靈敏度
        6.4.8 檢測方法的專一性
        6.4.9 本傳感器與類似傳感器的比較
        6.4.10 牛奶樣品的加標回收率試驗及與傳統方法的比較
    6.5 小結
第七章 總結與展望
    7.1 總結
    7.2 創(chuàng)新點
    7.3 展望
參考文獻
致謝
攻讀學位期間發(fā)表的學術論文
授權專利



本文編號：3837701