雙殼貝類對麻痹性貝毒的代謝轉(zhuǎn)化及其生理生化響應(yīng)
發(fā)布時(shí)間:2023-06-08 18:42
近年來,有害赤潮在全球近岸海域頻繁暴發(fā),其中有毒赤潮發(fā)生的頻次和規(guī)模呈明顯的上升態(tài)勢。藻毒素作為一種新型微污染物,通過食物鏈傳遞至貝類體內(nèi)后經(jīng)生物轉(zhuǎn)化生成成分更復(fù)雜的貝毒素,潛在威脅近海貝類養(yǎng)殖業(yè)的持續(xù)發(fā)展和消費(fèi)者的身體健康。其中麻痹性貝毒(ParalyticShellfishToxins,PST)是一類毒性強(qiáng)、分布廣、衍生物多的貝毒素,曾多次引發(fā)人中毒及死亡事件,造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。因此,PST毒素是貝類水產(chǎn)品進(jìn)出口貿(mào)易中必檢項(xiàng)目之一。近年研究發(fā)現(xiàn),PST產(chǎn)毒甲藻赤潮污染的貝類體內(nèi)含有一類新型化合物(如M1-4),它們是PST毒素C11位羥基或二羥基衍生物,具有相對低的毒性,被認(rèn)為是貝類解毒過程的代謝中間體或終產(chǎn)物。該類新型代謝物的發(fā)現(xiàn),為闡釋貝類體內(nèi)PST毒素的代謝輪廓提供了新靶標(biāo),為開展毒素“代謝組學(xué)”的研究指明了方向。 本論文以這些新型代謝物為靶標(biāo),選擇蝦夷扇貝(Patinopecten yessoensis)和紫貽貝(Mytilusgalloprovincialis)這兩種重要的經(jīng)濟(jì)貝類為研究對象,通過模擬貝類濾食產(chǎn)毒甲藻過程,監(jiān)測PST毒素組分的變化和貝類機(jī)體抗氧化酶系統(tǒng)的響...
【文章頁數(shù)】:90 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
0 前言
1 文獻(xiàn)綜述
1.1 麻痹性貝毒的分類及性質(zhì)
1.1.1 麻痹性貝毒的分類
1.1.2 麻痹性貝毒的性質(zhì)
1.2 麻痹性貝毒的來源和分布
1.3 麻痹性貝毒的分析方法
1.3.1 小鼠生物測試法
1.3.2 酶聯(lián)免疫分析法
1.3.3 高效液相色譜法
1.3.4 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法
1.4 麻痹性貝毒在雙殼貝類體內(nèi)的生物轉(zhuǎn)化過程研究
1.5 麻痹性貝毒在貝類組織體外的生物轉(zhuǎn)化過程研究
1.6 研究內(nèi)容的目的、意義及路線
1.6.1 研究內(nèi)容的目的與意義
1.6.2 技術(shù)路線
2 雙殼貝類體內(nèi)麻痹性貝毒的代謝轉(zhuǎn)化
2.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 ATHK 的培養(yǎng)
2.2.2 ATHK 藻毒素的提取
2.2.3 麻痹性貝毒在雙殼貝類體內(nèi)生物轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)
2.2.4 樣品制備
2.2.5 麻痹性貝毒的 LC-MS/MS 分析
2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.3.1 ATHK 藻毒素的毒素成分
2.3.2 麻痹性貝毒在紫貽貝體內(nèi)的生物轉(zhuǎn)化
2.4 討論
2.5 小結(jié)
3 麻痹性貝毒在離體貝類組織培養(yǎng)中的轉(zhuǎn)化及其影響因素
3.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
3.2 實(shí)驗(yàn)方法
3.2.1 離體貝類組織的制備
3.2.2 麻痹性貝毒混合標(biāo)準(zhǔn)的配制
3.2.3 麻痹性貝毒標(biāo)準(zhǔn)毒素與離體貝類消化腺組織的混合培養(yǎng)
3.2.4 ATHK 藻毒素與離體貝類消化腺組織的混合培養(yǎng)
3.2.5 谷胱甘肽還原酶(GR)對毒素轉(zhuǎn)化的影響
3.2.6 麻痹性貝毒的 LC-MS/MS 分析
3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.3.1 麻痹性貝毒標(biāo)準(zhǔn)毒素與離體貝類消化腺組織的混合培養(yǎng)
3.3.2 ATHK 藻毒素與離體貝類消化腺組織的混合培養(yǎng)
3.3.3 谷胱甘肽還原酶(GR)對麻痹性貝毒轉(zhuǎn)化的影響
3.4 討論
3.5 小結(jié)
4 麻痹性貝毒暴露條件下貝類抗氧化酶系統(tǒng)的響應(yīng)
4.1 實(shí)驗(yàn)試劑和儀器
4.2 實(shí)驗(yàn)方法
4.2.1 ATHK 的培養(yǎng)
4.2.2 貝類濾食 ATHK 的模擬實(shí)驗(yàn)
4.2.3 分析方法
4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4.3.1 活性氧(ROS)的含量變化
4.3.2 丙二醛(MDA)的含量變化
4.3.3 過氧化物歧化酶(SOD)的活力變化
4.3.4 過氧化氫酶(CAT)的活力變化
4.3.5 谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的活力變化
4.3.6 谷胱甘肽還原酶(GR)的活力變化
4.3.7 谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶(GSTs)的活力變化
4.4 討論
4.5 小結(jié)
5 結(jié)論
6 創(chuàng)新與展望
6.1 本文創(chuàng)新之處
6.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡歷
在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與研究成果
本文編號:3832288
【文章頁數(shù)】:90 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
0 前言
1 文獻(xiàn)綜述
1.1 麻痹性貝毒的分類及性質(zhì)
1.1.1 麻痹性貝毒的分類
1.1.2 麻痹性貝毒的性質(zhì)
1.2 麻痹性貝毒的來源和分布
1.3 麻痹性貝毒的分析方法
1.3.1 小鼠生物測試法
1.3.2 酶聯(lián)免疫分析法
1.3.3 高效液相色譜法
1.3.4 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法
1.4 麻痹性貝毒在雙殼貝類體內(nèi)的生物轉(zhuǎn)化過程研究
1.5 麻痹性貝毒在貝類組織體外的生物轉(zhuǎn)化過程研究
1.6 研究內(nèi)容的目的、意義及路線
1.6.1 研究內(nèi)容的目的與意義
1.6.2 技術(shù)路線
2 雙殼貝類體內(nèi)麻痹性貝毒的代謝轉(zhuǎn)化
2.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 ATHK 的培養(yǎng)
2.2.2 ATHK 藻毒素的提取
2.2.3 麻痹性貝毒在雙殼貝類體內(nèi)生物轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)
2.2.4 樣品制備
2.2.5 麻痹性貝毒的 LC-MS/MS 分析
2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.3.1 ATHK 藻毒素的毒素成分
2.3.2 麻痹性貝毒在紫貽貝體內(nèi)的生物轉(zhuǎn)化
2.4 討論
2.5 小結(jié)
3 麻痹性貝毒在離體貝類組織培養(yǎng)中的轉(zhuǎn)化及其影響因素
3.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
3.2 實(shí)驗(yàn)方法
3.2.1 離體貝類組織的制備
3.2.2 麻痹性貝毒混合標(biāo)準(zhǔn)的配制
3.2.3 麻痹性貝毒標(biāo)準(zhǔn)毒素與離體貝類消化腺組織的混合培養(yǎng)
3.2.4 ATHK 藻毒素與離體貝類消化腺組織的混合培養(yǎng)
3.2.5 谷胱甘肽還原酶(GR)對毒素轉(zhuǎn)化的影響
3.2.6 麻痹性貝毒的 LC-MS/MS 分析
3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.3.1 麻痹性貝毒標(biāo)準(zhǔn)毒素與離體貝類消化腺組織的混合培養(yǎng)
3.3.2 ATHK 藻毒素與離體貝類消化腺組織的混合培養(yǎng)
3.3.3 谷胱甘肽還原酶(GR)對麻痹性貝毒轉(zhuǎn)化的影響
3.4 討論
3.5 小結(jié)
4 麻痹性貝毒暴露條件下貝類抗氧化酶系統(tǒng)的響應(yīng)
4.1 實(shí)驗(yàn)試劑和儀器
4.2 實(shí)驗(yàn)方法
4.2.1 ATHK 的培養(yǎng)
4.2.2 貝類濾食 ATHK 的模擬實(shí)驗(yàn)
4.2.3 分析方法
4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4.3.1 活性氧(ROS)的含量變化
4.3.2 丙二醛(MDA)的含量變化
4.3.3 過氧化物歧化酶(SOD)的活力變化
4.3.4 過氧化氫酶(CAT)的活力變化
4.3.5 谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的活力變化
4.3.6 谷胱甘肽還原酶(GR)的活力變化
4.3.7 谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶(GSTs)的活力變化
4.4 討論
4.5 小結(jié)
5 結(jié)論
6 創(chuàng)新與展望
6.1 本文創(chuàng)新之處
6.2 展望
參考文獻(xiàn)
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在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與研究成果
本文編號:3832288
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