發(fā)布時間：2017-03-24 23:04

  本文關(guān)鍵詞：植物促生菌Pseudomonas monteilii PN1對對硝基酚降解及其聯(lián)合苜蓿對污染土壤的修復(fù)，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：近年來,硝基酚類化合物作為原材料或中間體被廣泛應(yīng)用于化工生產(chǎn)中,工業(yè)廢水的不達標(biāo)排放以及有機磷殺蟲劑等的大量使用使硝基酚類物質(zhì)的污染日益嚴(yán)重,不僅破壞了環(huán)境還對人類健康以及哺乳動物的生存產(chǎn)生了惡劣的影響。由于硝基酚類物質(zhì)比較穩(wěn)定,易被土壤吸附難以移動,在自然界中極難降解,而一些微生物經(jīng)過長期的接觸馴化,具有了一定的降解硝基酚的能力,也具備了與植物聯(lián)合修復(fù)對硝基酚污染土壤的潛力,所以生物修復(fù)成為越來越多的學(xué)者研究的課題,生物修復(fù)法不僅高效快速,經(jīng)濟實用,而且避免了污染物的二次轉(zhuǎn)移,具有廣闊的開發(fā)應(yīng)用前景。本研究從長春市周邊一個噴灑農(nóng)藥的農(nóng)田土樣中分離篩選出一株高效的對硝基酚(P-Nitrophenol,簡稱PNP)降解菌,能以PNP作為唯一碳源和氮源進行生長和繁殖,經(jīng)16S rDNA序列分析鑒定為假單胞菌,命名為PN1,PN1能夠降解PNP的濃度范圍為0~200 mg/L,而且降解過程中表現(xiàn)出較高的疏水性和良好的通透性。同時PN1還具有卡那霉素和氯霉素抗性以及Cd2+、Pb2+、Zn2+和Cr6+四種重金屬耐性,其最低抑制濃度(MIC)分別為700、500、800和100 mg/L。根據(jù)PN1具有的抗生素抗性,對其進行了綠色熒光蛋白標(biāo)記,且標(biāo)記后的PN1的質(zhì)粒具有良好的穩(wěn)定性。然后將PN1-gfp投入實驗室模擬的含污染物PNP的土壤微宇宙中,探究其在復(fù)雜的環(huán)境中能否正常發(fā)揮其降解功能,結(jié)果證明,復(fù)雜的外界環(huán)境雖然延長了PN1-gfp的適應(yīng)期,但PN1-gfp仍能在160個小時之后將141.61 mg/L的PNP完全降解,并發(fā)出的穩(wěn)定的綠色熒光,說明PN1-gfp具備生物修復(fù)實際污染土壤的潛力。其次對PN1-gfp的植物促生特性進行了探究,證明其能夠分泌植物生長激素吲哚乙酸(IAA)、產(chǎn)生鐵載體來獲取鐵離子,溶解難溶性的有機磷、產(chǎn)生1-氨基環(huán)丙烷-1-羧酸(ACC)脫氨酶來降低乙烯的含量,是一株具有多種促生功能的植物促生菌(PGPR)。然后在MS固體培養(yǎng)基中進行苜蓿的生長實驗,未浸菌的苜蓿的最大PNP耐受濃度為20 mg/L。當(dāng)PNP濃度為20 mg/L時,對于接菌的苜蓿,由于PN1-gfp對PNP的降解減輕了毒害作用,植株的長勢遠遠好于未接菌的苜蓿,且PN1-gfp對莖的促進作用較為明顯。最后在溫室中進行盆栽試驗,苜蓿在土壤中生長的最適PNP濃度為100mg/kg,且經(jīng)30天的培養(yǎng)后,PNP的自然降解率約為18.1%,加入植物的作用后,根際和非根際土壤的PNP降解率分別為31.0%和29.9%,再加入PN1-gfp的降解及促生作用后,根際和非根際土壤的PNP降解率分別為89.0%和85.8%,對于經(jīng)PN1-gfp處理過的苜蓿盆栽,根際土壤中的生物量明顯大于非根際土壤,在植株內(nèi)部,生物量的大小順序為根㧐葉㧐莖。
【關(guān)鍵詞】：PNP 生物降解 微宇宙 植物促生菌 土壤修復(fù)
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：X172;X53
【目錄】：

• 摘要4-6
• abstract6-10
• 第1章 緒論10-16
• 1.1 硝基酚類化合物的性質(zhì)10-11
• 1.2 硝基酚類化合物的土壤污染修復(fù)方法11-12
• 1.3 植物促生菌的研究及應(yīng)用現(xiàn)狀12-14
• 1.4 論文的立題依據(jù)和主要內(nèi)容14-15
• 1.5 技術(shù)路線15-16
• 第2章 PNP降解菌的分離與鑒定及其降解特性研究16-25
• 2.1 材料與方法16-17
• 2.1.1 實驗設(shè)備16-17
• 2.1.2 主要試劑及培養(yǎng)基17
• 2.1.3 試劑配制17
• 2.2 實驗方法17-20
• 2.2.1 對硝基酚降解菌的分離篩選17-18
• 2.2.2 降解菌的鑒定18-19
• 2.2.3 菌株對PNP的降解特性研究19-20
• 2.2.4 菌株的重金屬和抗生素耐性20
• 2.3 結(jié)果與討論20-24
• 2.3.1 PNP降解菌的分離與鑒定20-21
• 2.3.2 分光光度法測定PNP濃度21
• 2.3.3 不同初始PNP濃度對菌株生長的特性的影響21-22
• 2.3.4 PN1的疏水性和通透性分析22-23
• 2.3.5 PN1的重金屬及抗生素耐性分析23-24
• 2.4 結(jié)論24-25
• 第3章 PN1的熒光蛋白標(biāo)記及微宇宙實驗25-31
• 3.1 材料與方法25-26
• 3.1.1 實驗設(shè)備25
• 3.1.2 主要試劑及培養(yǎng)基25-26
• 3.1.3 試劑配制26
• 3.2 實驗方法26-28
• 3.2.1 PN-1 的熒光蛋白標(biāo)記26-27
• 3.2.2 標(biāo)記假單胞菌PN1的穩(wěn)定性檢測27
• 3.2.3 標(biāo)記假單胞菌PN1在微宇宙中的存活及降解活性27
• 3.2.4 分析方法27-28
• 3.3 結(jié)果與討論28-30
• 3.3.1 熒光蛋白標(biāo)記結(jié)果及質(zhì)粒的穩(wěn)定性檢測28-29
• 3.3.2 土壤微宇宙實驗29-30
• 3.4 結(jié)論30-31
• 第4章 PN1-gfp與苜蓿聯(lián)合修復(fù)PNP污染的土壤31-46
• 4.1 材料與方法31-33
• 4.1.1 實驗設(shè)備31
• 4.1.2 培養(yǎng)基31-32
• 4.1.3 試劑配制及種子的處理32-33
• 4.2 實驗方法33-36
• 4.2.1 PN1-gfp的植物促生特性鑒定33-34
• 4.2.2 PN1-gfp的MS固體培養(yǎng)基試驗34-35
• 4.2.3 PN1-gfp的盆栽試驗35-36
• 4.2.4 分析方法36
• 4.3 結(jié)果與討論36-45
• 4.3.1 PN1-gfp的植物促生特性分析36-38
• 4.3.2 PN1-gfp的MS固體培養(yǎng)基試驗分析38-41
• 4.3.3 PN1-gfp的盆栽試驗分析41-45
• 4.4 結(jié)論45-46
• 第5章 結(jié)論與建議46-48
• 5.1 結(jié)論46-47
• 5.2 建議47-48
• 參考文獻48-54
• 攻讀碩士期間所取得的科研成果54-55
• 致謝55

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 董云波;李波;彭榮;姜延青;紀(jì)實剛;;高壓靜電場處理對苜蓿種子及幼苗抗旱性的影響[J];高師理科學(xué)刊;2007年03期

2 朱遐;;干燥“人造”苜蓿種子的長期貯存[J];生物技術(shù)通報;1991年07期

3 李振國,倪君蒂;乙烯消減鹽抑制苜蓿種子萌發(fā)的機理研究[J];應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報;2001年01期

4 魏學(xué)紅,鄭維列;草原2號苜蓿在西藏林芝地區(qū)引種栽培初探[J];西藏科技;2003年09期

5 劉紅平;金j;王曉娟;;苜蓿與傳粉昆蟲的互作[J];草業(yè)科學(xué);2008年03期

6 賴憲明;高金芳;包玉梅;韓秀全;莊長楠;吳樹林;;公農(nóng)1號苜蓿種子生產(chǎn)栽培技術(shù)規(guī)程[J];科協(xié)論壇(下半月);2007年10期

7 新雨;;紫花3號苜蓿高產(chǎn)栽培技術(shù)要點[J];科技致富向?qū)?2002年09期

8 張青文,張巍巍,蔡青年,陳合明;苜蓿切葉蜂授粉擴散行為及苜蓿種子增產(chǎn)效應(yīng)的研究[J];應(yīng)用生態(tài)學(xué)報;1999年05期

9 征榮,許月英,楊體強,呂劍剛,潘宇苗;電場處理苜蓿種子對其幼苗期生長的影響[J];內(nèi)蒙古大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2002年03期

10 柴春山;蔡國軍;孟少童;陳煒青;薛睿;;樹苜蓿引種育苗栽培技術(shù)[J];中國野生植物資源;2008年05期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 于洪柱;王志鋒;金春花;徐安凱;;苜蓿雜交育種研究進展[A];中國草學(xué)會牧草育種委員會第七屆代表大會論文集[C];2009年

2 毛培勝;;苜蓿種子及其草產(chǎn)品質(zhì)量檢測技術(shù)的應(yīng)用與發(fā)展[A];第三屆中國苜蓿發(fā)展大會論文集[C];2010年

3 李紅;楊偉光;黃新育;;苜蓿良種繁育關(guān)鍵技術(shù)的研究[A];中國草學(xué)會青年工作委員會學(xué)術(shù)研討會論文集(上冊)[C];2010年

4 閔繼淳;;新疆的苜蓿種子生產(chǎn)[A];第二屆中國苜蓿發(fā)展大會暨牧草種子、機械、產(chǎn)品展示會論文集[C];2003年

5 劉貴林;楊世昆;;我國苜蓿種子收獲工藝及配套機具研究剖析[A];第二屆中國苜蓿發(fā)展大會暨牧草種子、機械、產(chǎn)品展示會論文集[C];2003年

6 閔繼淳;;新疆的苜蓿種子生產(chǎn)[A];第二屆中國苜蓿發(fā)展大會論文集——S02苜�；A(chǔ)研究[C];2003年

7 米福貴;云錦鳳;;苜蓿遺傳改良的進展及前景[A];首屆中國苜蓿發(fā)展大會論文集[C];2001年

8 劉貴林;楊世昆;;我國苜蓿種子收獲工藝及配套機具研究剖析[A];農(nóng)業(yè)機械化與全面建設(shè)小康社會——中國農(nóng)業(yè)機械學(xué)會成立40周年慶典暨2003年學(xué)術(shù)年會論文集[C];2003年

9 敖學(xué)成;傅平;柳茜;陳艷;;西昌生態(tài)區(qū)苜蓿種子產(chǎn)量性狀的初步研究[A];2009中國草原發(fā)展論壇論文集[C];2009年

10 鄧一兵;楊體強;那日;張偉華;;苜蓿幼苗期的生物效應(yīng)與電場處理時間的關(guān)系[A];中國物理學(xué)會第十一屆靜電、電磁防護與電磁兼容學(xué)術(shù)年會論文集[C];2003年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 宗邊;美國苜蓿種業(yè)生產(chǎn)及貿(mào)易[N];中國畜牧報;2004年

2 王番;美國的苜蓿種子產(chǎn)業(yè)[N];中國畜牧獸醫(yī)報;2005年

3 ;苜蓿的種植[N];山西科技報;2005年

4 ;苜蓿的種植與利用[N];云南科技報;2005年

5 灤縣農(nóng)業(yè)畜牧水產(chǎn)局 王希會;玉米套苜蓿 農(nóng)牧增效益[N];河北科技報;2006年

6 河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院 李運起 （教授）;種草養(yǎng)畜說苜蓿（下）[N];河北農(nóng)民報;2007年

7 陳光耀;加拿大苜蓿種子生產(chǎn)管理[N];中國畜牧報;2003年

8 劉海元;準(zhǔn)格爾苜蓿高產(chǎn)栽培技術(shù)[N];中國畜牧報;2002年

9 杜華斌;加拿大農(nóng)場主反對美國轉(zhuǎn)基因苜蓿入境[N];糧油市場報;2011年

10 米厚民;襄汾小草長成大產(chǎn)業(yè)[N];山西日報;2002年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王聰;植物促生菌Pseudomonas monteilii PN1對對硝基酚降解及其聯(lián)合苜蓿對污染土壤的修復(fù)[D];吉林大學(xué);2016年

2 李麗;水氮調(diào)控對苜蓿種子產(chǎn)量影響的研究[D];新疆農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

3 李雪鋒;灌溉對苜蓿種子生產(chǎn)的影響及其需水規(guī)律的研究[D];新疆農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

4 祁娟;苜蓿種子內(nèi)生根瘤菌篩選及其促生能力研究[D];甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué);2006年

5 李瑛;不同時期和不同水量灌溉對苜蓿種子產(chǎn)量影響的研究[D];新疆農(nóng)業(yè)大學(xué);2004年

6 王斯琴花;苜蓿種子萌發(fā)期耐鹽性及遺傳多樣性研究[D];內(nèi)蒙古師范大學(xué);2012年

7 陳述明;種植密度和苜蓿種子產(chǎn)量關(guān)系的研究[D];新疆農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

8 孟季蒙;地下滴灌對苜蓿種子生產(chǎn)的影響[D];新疆農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

9 武志敏;甜菜堿和苜蓿皂甙對斷奶仔豬生長性能及免疫功能的影響[D];黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué);2010年

10 劉長月;苜蓿種子田節(jié)肢動物群落結(jié)構(gòu)組成及苜蓿籽蜂生物學(xué)生態(tài)學(xué)研究[D];新疆農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

  本文關(guān)鍵詞：植物促生菌Pseudomonas monteilii PN1對對硝基酚降解及其聯(lián)合苜蓿對污染土壤的修復(fù)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：266285