【摘要】：本文采用國際上通用的萼花臂尾輪蟲(Brachionus calyciflorus)雄體作為研究對象,研究了睪丸酮、氟他胺和孕酮對雄體萼花臂尾輪蟲的行為學(xué)(游泳行為、交配行為)、受精率、壽命以及體型的影響。分析了雄體運動能力與生殖能力的關(guān)系,并研究了睪丸酮、氟他胺和孕酮分別兩兩聯(lián)合作用對雄體萼花臂尾輪蟲游泳行為和受精率的影響。為雄體輪蟲作為雄性無脊椎動物生殖毒理學(xué)受試動物提供了一定的參考。主要研究結(jié)果如下:1、萼花臂尾輪蟲有性生殖誘導(dǎo)研究。在25℃實驗室培養(yǎng)下,將萼花臂尾輪蟲孤雌生殖群體通過300目細胞篩富集,用雙蒸水沖洗數(shù)次,去除培養(yǎng)過程中產(chǎn)生的原生動物與微小雜質(zhì),得到高密度輪蟲群體,投喂密度為1×106cells/mL的小球藻(Chlorella pyrenoidosa),研究其不同初始種群密度對有性生殖的誘導(dǎo)效果。結(jié)果顯示:50、100、500、1000ind/mL組4日內(nèi)種群密度穩(wěn)定,無顯著差異,2000ind/mL組在第2d種群密度顯著下降。500、1000、2000ind/mL組在第2d以后均有大量雄體出現(xiàn)并產(chǎn)生休眠卵。從維護種群穩(wěn)定的方面看,當初始種群密度達到500ind/mL時,輪蟲有性生殖誘導(dǎo)效果最佳。2、環(huán)境激素對雄體萼花臂尾輪蟲游泳行為影響從有性誘導(dǎo)后的輪蟲群體中,挑取出生4h內(nèi)游泳迅速的雄性個體利用奧林巴斯 BX41 顯微鏡、DP70 image capture system 和 Cellsens Standard 軟件拍攝和捕捉輪蟲的運動狀態(tài),分別暴露在睪丸酮(0.5-6.0mg/L)、氟他胺(0.5-6.0mg/L)和孕酮(0.5-6.0 mg/L)中處理2h后,再次拍攝記錄輪蟲的運動狀態(tài)。結(jié)果顯示:睪丸酮、氟他胺、孕酮對雄體游泳曲折率均無顯著影響(P0.05)。暴露睪丸酮處理下,雄體的游泳速率受到顯著提高,相對應(yīng)的游泳速率變化率回歸方程為 Y=-3.9597X2+28.4066X-6.5309, R2=0.89 P=0.020.05;暴露在孕酮處理下,雄體的游泳速率受到顯著抑制,相對應(yīng)的游泳速率變化率回歸方程為Y=-0.1692X--7.7092X+0.4543,R2=0.98P=0.000.01;暴露在氟他胺處理下,雄體的游泳速率受到顯著抑制,相對應(yīng)的游泳速率變化率回歸方程為:Y=-0.1667X2-8.9862X+1.3892,R2=0.99 P=0.000.01。結(jié)果表明萼花臂尾輪蟲雄體游泳速率指標對環(huán)境激素較為敏感。從有性誘導(dǎo)后的輪蟲群體中,挑取出生4h內(nèi)新出生雌雄個體,以10:3的雌雄比分別暴露在三種激素下進行交配行為觀察實驗。與對照組相比,睪丸酮暴露處理時,在1、2和3h以內(nèi),對雄體交配識別能力均有顯著提高(P0.05),隨著暴露時間延長,暴露4、5、6h時,各組雄體識別能力均有下降,對照組也表現(xiàn)出同樣特征;孕酮暴露處理6h的結(jié)果顯示,雄體交配識別能力均顯著被抑制,暴露6h時,各濃度組交配識別率均達到最低水平,氟他胺的結(jié)果與孕酮相似。結(jié)果表明,萼花臂尾輪蟲雄體交配識別率指標對環(huán)境激素敏感,但與雄體壽命和個體差異的關(guān)系也較大。3、環(huán)境激素對萼花臂尾輪蟲雄性個體生殖力影響雄輪蟲暴露在睪丸酮(0.5-6.0 mg/L)、氟他胺(0.5-6.0 mg/L)和孕酮(0.5-6.0 mg/L)中,處理24h的受精率的實驗表明:結(jié)果環(huán)境雄激素睪丸酮暴露處理后,能顯著提高雄體的受精能力(P0.05),2mg/L處理組達到最高,受精成功率為48.61±3.18%;環(huán)境雌激素孕酮和雄激素拮抗劑氟他胺各濃度組暴露處理后,雄體受精成功率均受到顯著抑制(P0.05),且隨著藥物濃度的上升,抑制作用越強。單個體壽命實驗中,雄激素睪丸酮(0.5-6.0mg/L)顯著縮短輪蟲雄體個體壽命(P0.05),但隨著睪丸酮的濃度上升,縮短幅度變化不顯著,這可能是因為睪丸酮是雄性激素,它能促進雄體的游泳速率,同時消耗了更多的能量,由于雄體不具有消耗系統(tǒng),全部能量只來自于胚胎,這種能量分配必然會導(dǎo)致雄輪蟲壽命的縮短。反觀雌激素孕酮和雄激素拮抗劑氟他胺對輪蟲雄體的壽命影響并不顯著(P0.05)。通過結(jié)合不同激素在不同濃度下對游泳速率和雄體受精能力影響的綜合分析,得到雄體游泳速率與雄體受精成功率指標關(guān)系曲線,回歸方程為:Y=42.17/(1+(9.51-X)0.0525) +4.29,R2=0.9456P= P=82×10-110.01。利用此回歸方程可較好的闡述雄體運動能力與生殖能力之間的關(guān)系。4、激素聯(lián)合作用對雄體萼花臂尾輪蟲雄體行為以及生殖能力的影響激素組合實驗結(jié)果顯示:環(huán)境雄激素睪丸酮與其拮抗劑氟他胺組合處理組合處理、雄激素睪丸酮和雌激素孕酮組合處理對輪蟲雄體受精成功率,表現(xiàn)為拮抗效應(yīng),但組合效應(yīng)在雄輪蟲游泳行為上無顯著差異。氟他胺和孕酮在受精率和游泳行為上無交互作用。孕酮和氟他胺均為1mg/L時抑制作用最強,游泳速率變化率為-10.5%,受精率為3.1%。
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【學(xué)位授予單位】：南京師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：X171.5

【參考文獻】

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1 沙婧婧;王悠;王鴻;陳悅;李曉紅;徐寧寧;唐學(xué)璽;;2種多溴聯(lián)苯醚(BDE-47、BDE-209)對褶皺臂尾輪蟲單一和聯(lián)合毒性效應(yīng)研究[J];中國海洋大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2015年09期

2 胡夢桑;陳毅斐;徐營;;胚胎發(fā)育與環(huán)境激素的影響[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2011年11期

3 孟海濤,王麗君,由京周,陳明,任仁;環(huán)境激素類農(nóng)藥的危害[J];職業(yè)衛(wèi)生與應(yīng)急救援;2003年03期

4 金解敏,楊家新,陳立僑;銅鋅離子對褶皺臂尾輪蟲的急性毒性試驗[J];水產(chǎn)科技情報;1999年03期

5 楊家新,黃祥飛;密度和溫度對萼花臂尾輪蟲產(chǎn)卵量和混交雌體的影響[J];湖泊科學(xué);1996年04期

6 于建平，，日野明德;添加維生素B_（12）生產(chǎn)菌高密度培養(yǎng)褶皺臂尾輪蟲的效果[J];青島海洋大學(xué)學(xué)報;1994年02期

本文編號：2414135