褐藻酸寡糖具有很強的促進動、植物生長作用,同時還具有其他多種生理活性,是一種極具開發(fā)潛力的功能性寡聚糖醛酸。本文主要從以下幾個方面對酶解褐藻酸鈉制備褐藻酸寡糖進行了研究。采用Dowex1×8強堿型陰離子交換樹脂對褐藻酸鈉水解液進行分離,乙酸水溶液梯度洗脫,可以成功地從褐藻酸鈉硫酸水解液中分離純化出L-古洛糖醛酸和D-甘露糖醛酸,兩組分經(jīng)HPLC檢測純度分別達到99%以上;將其作為標準品采用HPLC檢測,褐藻酸鈉和海帶中的L-古洛糖醛酸及D-甘露糖醛酸的含量分別為11.48%和63.06%以及4.67%和21.65%。采用中科院大連化物所酶解制得褐藻酸寡糖作為樣品,對三種常用的寡聚糖醛酸檢測方法進行比較:TLC,HPLC和FACE,結(jié)果顯示三種方法均能對褐藻酸寡糖進行分離檢測。選定本實驗用檢測褐藻酸寡糖的方法主要為TLC和HPLC,其中TLC展開劑為正丁醇︰甲酸︰水（4︰6︰1,v/v/v）,上行展開2次;HPLC方法如下色譜系統(tǒng):Waters 2695;檢測器:Waters PAD紫外檢測器;色譜柱:TSK-GEL DEAE-2SW 4.6mm×250mm（Tosoh Corp. ,T... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學院北京市

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

不同結(jié)構(gòu)的二糖結(jié)構(gòu)式(NicolaVolpietal，2009)

圖 1.2 褐藻膠分子結(jié)構(gòu)式Fig.1.2 The molecular structure of alginate目前實驗室及生產(chǎn)中獲得褐藻酸寡糖的方法有（Taku et al，2010）：①褐藻膠酸水解（陳麗等2007）；②褐藻膠堿水解；③褐藻膠酶水解；④褐藻膠熱處理。其中主要采取酶水解法制備褐藻寡糖，如從土壤或是海帶的病爛部位經(jīng)過分離純化培養(yǎng)可以得到產(chǎn)褐藻酸裂解酶的菌種，再經(jīng)最優(yōu)條件的發(fā)酵培養(yǎng)，得到粗酶液。劉濤等（2003）將從海帶（Laminaria iaponica）的病爛部得到的菌株，進行海藻酸裂解酶的發(fā)酵條件優(yōu)化的實驗，并測定發(fā)酵液的酶活力。Kim 等（200通過基因重組得到的褐藻酸裂解酶，主要酶解產(chǎn)物為聚合度為 2~5 的褐藻酸寡糖。1.2.3 褐藻酸裂解酶1.2.3.1 酶的來源和分類褐藻酸裂解酶主要有 3 個來源：海洋軟體動物、海藻，海洋細菌和土壤細菌（Suzuki et al，2006）。褐藻酸鹽裂解酶按照其降解褐藻酸鹽部位與片斷的不同分為兩類：專一性裂解 β-1，4 糖苷連接 β-D-甘露糖醛酸段的裂解酶（poly（M）lyase）和專一性裂解 β-1，4 糖苷鍵連接 α-L-古洛

技術(shù)路線

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
[1]褐藻膠寡糖的制備、分析及其應(yīng)用研究[D]. 歐昌榮.中國海洋大學 2003



本文編號：3481020