本文選題：多功能微球 + 同軸流動聚焦　； 參考：《重慶醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：第一部分?jǐn)y氧載吲哚菁綠微球的制備及其性質(zhì)檢測目的:制備一種攜氧載吲哚菁綠微球并評價其特性。方法:采用同軸流動聚焦法制備攜氧載吲哚菁綠微球,觀察其形態(tài)和顏色,檢測其粒徑、粒度分布、光學(xué)性質(zhì)、穩(wěn)定性、釋氧能力、包封率及載藥量。結(jié)果:攜氧載吲哚菁綠微球為圓形,大小均勻,呈淡綠色,平均粒徑為(37.5±4.3)μm、包封率為(98.39±1.18)%、載藥量為(0.02±0.005)%,攜氧載吲哚菁綠微球在超聲下具有釋氧能力。與吲哚菁綠水溶液相比,熒光穩(wěn)定性顯著提高。結(jié)論:用同軸流動聚焦的方法能成功制備攜氧載吲哚菁綠微球,有望成為卵巢癌的一種新型雙模態(tài)顯影和治療方式。第二部分超聲介導(dǎo)攜氧載吲哚菁綠微球雙模態(tài)顯影的研究目的:觀察超聲介導(dǎo)攜氧載吲哚菁綠微球作為熒光及超聲顯影劑的顯像效果。方法:用低強(qiáng)度聚焦超聲輻照攜氧載吲哚菁綠微球溶液,在顯微鏡下觀察微球相變情況,用超聲顯像儀檢測相變前后的超聲影像情況,用小動物成像儀檢測攜氧載吲哚菁綠微球的熒光顯像深度,觀察相變前后的熒光顯像,并與同濃度的吲哚菁綠水溶液相比,熒光顯像的變化情況。然后運(yùn)用圖像后處理軟件對圖像的熒光強(qiáng)度進(jìn)行量化分析。結(jié)果:在超聲參數(shù)為1 MHz,1 W/cm2連續(xù)作用30 s的情況下,攜氧載吲哚菁綠微球相變?yōu)槲⑴?粒徑增大約6倍,同時觀察到超聲顯影明顯增強(qiáng);與吲哚菁綠溶液及激發(fā)后的攜氧載吲哚菁綠微球相比,激發(fā)前的攜氧載吲哚菁綠微球在瓊脂糖凝膠各個深度的熒光強(qiáng)度都是最強(qiáng)的,且最大深度達(dá)1.5 cm,而攜氧載吲哚菁綠微球在低強(qiáng)度聚焦超聲輻照后,熒光強(qiáng)度變?nèi)?但仍然顯著高于同濃度下的吲哚菁綠水溶液,吲哚菁綠水溶液的熒光強(qiáng)度最深只有1 cm。結(jié)論:低強(qiáng)度超聲輻照攜氧載吲哚菁綠微球可以致其發(fā)生液氣相變,同時能夠顯著增強(qiáng)超聲的顯影,攜氧載吲哚菁綠微球能顯著增強(qiáng)熒光的組織穿透性,可用于超聲/熒光雙模態(tài)顯像。第三部分超聲介導(dǎo)攜氧載吲哚菁綠微球?qū)β殉舶┘?xì)胞凋亡和殺傷效應(yīng)的研究目的:探討超聲介導(dǎo)攜氧載吲哚菁綠微球?qū)β殉舶㏒KOV-3細(xì)胞毒性作用及機(jī)制。方法:用單線態(tài)氧檢測試劑盒在無細(xì)胞溶液中檢測超聲介導(dǎo)對照組、攜氧載吲哚菁綠微球組和攜氧載吲哚菁綠+疊氮化鈉組的單線態(tài)氧產(chǎn)生情況。采用對數(shù)生長期的SKOV-3細(xì)胞,隨機(jī)分成3組:(1)培養(yǎng)液空白對照組(對照組),(2)超聲組(US組),(3)攜氧載吲哚菁綠微球+超聲組(OI-MPs+US組)分別給予相應(yīng)處理,6h后用Hochest 33342/PI染色,在顯微鏡下觀察各組的細(xì)胞形態(tài)和凋亡特異性熒光顯像,并用Annexin V-FITC/PI雙染法檢測各組凋亡情況,24小時后用MTT法檢測各組細(xì)胞的增殖抑制率。結(jié)果:與對照組(16.66±2.89)%和Na N3+OI-MPs+US組(21.30±5.04)%相比,OI-MPs+US組(107.39±8.01)%的單線態(tài)氧產(chǎn)生量顯著增高(P0.05)。熒光顯微鏡結(jié)果表明,各處理因素作用6 h后,對照組顯示淡藍(lán)色熒光,基本沒有紅色熒光,與對照組相比,US組基本無明顯變化,而OI-MPs+US組可見大量細(xì)胞皺縮、變圓和明顯的亮藍(lán)色熒光和和紅色熒光。流式細(xì)胞實驗結(jié)果顯示陰性對照組、US組和OI-MPs+US組的凋亡率分別為(3.10±0.52)%,(5.93±0.94)%和(34.11±3.57)%,OI-MPs+US組的細(xì)胞凋亡率顯著高于對照組和US組(P0.05),各處理組分別作用24小時后MTT結(jié)果顯示OI-MPs+US組的細(xì)胞存活率為(49.97±6.29)%,顯著低于超聲組(96.73±3.14)%(P0.05)。結(jié)論:超聲介導(dǎo)的攜氧載吲哚菁綠微球能顯著增強(qiáng)單線態(tài)氧的產(chǎn)量,促進(jìn)細(xì)胞凋亡,降低卵巢癌SKOV-3細(xì)胞的存活率,機(jī)制可能與超聲介導(dǎo)OI-MPs產(chǎn)生單線態(tài)氧和空化作用有關(guān)。
[Abstract]:A new type of indocyanine green microsphere was prepared by using co - axial flow focusing method . The results showed that the fluorescence intensity of the indocyanine green microspheres was ( 98.39 鹵 1.18 ) % , the entrapment efficiency was ( 98.39 鹵 1.18 ) % , the entrapment efficiency was ( 98.39 鹵 1.18 ) % , the fluorescence intensity of the indocyanine green microspheres was only 1 cm at the same concentration . In comparison with control group ( 16.66 鹵 2.89 ) % and NaN3 + OI - MPs + US group ( 21.30 鹵 5.04 ) % , the apoptosis rate of OI - MPs + US group was ( 3.10 鹵 0.52 ) % , ( 5.93 鹵 0.94 ) % and ( 34.11 鹵 3.57 ) % , respectively .
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R737.31

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1905424