隨著生存環(huán)境的不斷惡化,腫瘤和金屬離子污染已經(jīng)嚴(yán)重威脅到人類的健康�；瘜W(xué)發(fā)光分析法因其操作方便、靈敏度高、設(shè)備簡單等優(yōu)點(diǎn),受到越來越多科研工作者的廣泛關(guān)注。本論文研制了兩種新型適體生物傳感器,分別應(yīng)用于腫瘤細(xì)胞的高靈敏度檢測(cè)和微量金屬離子的檢測(cè),本文所建立的方法具有高選擇性、高靈敏度等優(yōu)點(diǎn),在環(huán)境保護(hù)、臨床研究、體外診斷等方面具有十分廣泛的應(yīng)用前景。本論文主要研究內(nèi)容如下：一、金屬離子觸發(fā)滾環(huán)復(fù)制放大反應(yīng)以及它在分子邏輯門體系中的應(yīng)用Hg2+能使錯(cuò)配的T-T堿基對(duì)形成穩(wěn)定的T-Hg2+-T堿基對(duì),Ag+能使錯(cuò)配的C-C堿基對(duì)形成穩(wěn)定的C-Ag+-C堿基對(duì),這些特性為用于金屬離子檢測(cè)的分子機(jī)器的組裝和邏輯門體系的執(zhí)行提供了一種新型通用的技術(shù)平臺(tái)。首先,將探DNA與引物DNA雜交,然后,加入Hg2+或Ag+,在連接酶的作用下將模板DNA連接成環(huán),然后在DNA聚合酶和dNTPs作用下進(jìn)行滾環(huán)復(fù)制放大反應(yīng),用標(biāo)記有熒光素的分子信標(biāo)與滾環(huán)復(fù)制的產(chǎn)物雜交,連接上大量的信號(hào)探針,大大增強(qiáng)了產(chǎn)物的熒光信號(hào),實(shí)現(xiàn)了對(duì)Hg+、Ag+金屬離子的高靈敏度檢測(cè),同時(shí),由于Hg2+、Ag+與T-T、C-C堿基對(duì)之... 

【文章來源】：青島科技大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1 生物傳感器
        1.1 生物傳感器概述
            1.1.1 生物傳感器的組成與檢測(cè)原理
            1.1.2 生物傳感器的定義與分類
            1.1.3 生物傳感器的特點(diǎn)
            1.1.4 生物傳感器的應(yīng)用研究
        1.2 細(xì)胞傳感器
            1.2.1 細(xì)胞傳感器的種類與應(yīng)用
            1.2.2 傳統(tǒng)細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)
            1.2.3 細(xì)胞傳感器的發(fā)展方向
    2 滾環(huán)擴(kuò)增
        2.1 滾環(huán)DNA擴(kuò)增的概念
        2.2 滾環(huán)DNA擴(kuò)增的原理
        2.3 滾環(huán)擴(kuò)增體系應(yīng)用研究進(jìn)展
            2.3.1 滾環(huán)擴(kuò)增在核酸測(cè)序中的應(yīng)用
            2.3.2 滾環(huán)擴(kuò)增在蛋白質(zhì)芯片中的應(yīng)用
            2.3.3 滾環(huán)擴(kuò)增在DNA芯片中的應(yīng)用
        2.4 滾環(huán)擴(kuò)增的發(fā)展前景
    3 核酸適體探針檢測(cè)腫瘤細(xì)胞的研究
        3.1 核酸適體探針的篩選-SELEX技術(shù)
            3.1.1 SELEX的概念
            3.1.2 SELEX的技術(shù)原理
            3.1.3 SELEX技術(shù)的發(fā)展
        3.2 核酸適體探針在腫瘤診斷和治療中的應(yīng)用
            3.2.1 在腫瘤診斷中的應(yīng)用
            3.2.2 在腫瘤治療中的應(yīng)用
    4 本論文的研究目的和內(nèi)容
第二章 滾環(huán)復(fù)制放大技術(shù)在分子邏輯門體系中的應(yīng)用
    1 引言
    2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.1 試劑與儀器
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 儀器裝置
        2.2 試驗(yàn)方法
            2.2.1 YES和NYES邏輯門中Hg~(2+)的檢測(cè)
            2.2.2 金屬離子檢測(cè)的選擇性
            2.2.3 AND邏輯門
            2.2.4 OR、INHIBIT、XOR邏輯門
            2.2.5 NAND、NOR、NXOR邏輯門
    3 結(jié)果與討論
        3.1 方法的靈敏性-不同濃度Hg~(2+)的測(cè)定
        3.2 方法的靈敏性-不同濃度Ag~(2+)的測(cè)定
        3.3 金屬離子的選擇性
        3.4 AND邏輯門
        3.5 OR、INHIBIT、XOR邏輯門
        3.6 NAND、NOR、NXOR邏輯門
    4 小結(jié)
第三章 滾環(huán)復(fù)制放大技術(shù)在腫瘤細(xì)胞檢測(cè)中的應(yīng)用
    1 引言
    2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.1 試劑與儀器
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 儀器裝置
        2.2 試驗(yàn)方法
            2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
            2.2.2 AuNPs的合成
            2.2.3 親和素修飾的酶標(biāo)板的制備
            2.2.4 核酸適體探針的制備
            2.2.5 luminol-H_2O_2-HRP-PIP發(fā)光體系反應(yīng)時(shí)間的選擇
            2.2.6 各組分的紫外可見吸收光譜性質(zhì)
            2.2.7 方法的靈敏性——不同個(gè)數(shù)Ramos細(xì)胞的測(cè)定
            2.2.8 Ramos細(xì)胞檢測(cè)的選擇性
    3 結(jié)果與討論
        3.1 實(shí)驗(yàn)原理
        3.2 AuNPs的表征
        3.3 luminol-H_2O_2-HRP-PIP發(fā)光體系反應(yīng)時(shí)間的選擇
        3.4 各組分的紫外可見吸收光譜性質(zhì)
        3.5 方法的靈敏性—不同數(shù)量的Ramos細(xì)胞的測(cè)定
        3.6 方法的選擇性
    4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表及待發(fā)表學(xué)術(shù)論文目錄


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3353230