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基于蛋白質(zhì)組學(xué)和免疫學(xué)技術(shù)的絲綢文物分析研究

發(fā)布時(shí)間:2021-01-31 01:54
  絲綢,是古代中華文明的重要組成部分,為后世傳達(dá)著各個(gè)歷史階段重要的政治、經(jīng)濟(jì)和文化信息。近幾十年來(lái),隨著考古人員的不斷探索,越來(lái)越多的古代絲綢文物在中國(guó)及其他國(guó)家的文明遺址中被發(fā)現(xiàn),引發(fā)科研工作者對(duì)絲綢起源的討論和絲綢傳播路徑的分析。同時(shí),出土絲織品文物的老化降解狀況,也是眾多研究者關(guān)注的重點(diǎn)。因此,鑒定絲綢文物的種屬、分析絲綢文物的降解機(jī)理,對(duì)探究絲綢的起源和保證絲綢文物的流傳具有重要意義。本論文首先采用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)對(duì)蠶繭蛋白質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析,篩選出不同蠶絲的標(biāo)志性蛋白,然后將該蛋白質(zhì)(或其中的特異性序列)作為抗原(或半抗原),通過(guò)動(dòng)物免疫獲得不同蠶絲的特異性抗體,并成功鑒定出不同種屬的蠶絲蛋白,從而建立起基于蛋白質(zhì)組學(xué)和免疫學(xué)技術(shù)的蠶絲蛋白研究體系;并將該體系用于人工酶解樣品、堿老化樣品和古代絲織品的降解分析中,從分子水平探究絲綢文物的老化降解規(guī)律。1)采用定量蛋白質(zhì)組學(xué)對(duì)不同方法提取的桑蠶和柞蠶蠶繭蛋白進(jìn)行分析,根據(jù)蛋白質(zhì)的功能,將桑蠶繭蛋白劃分為7類(lèi);柞蠶繭蛋白劃分為和5類(lèi);分別篩選出具有高豐度和特異性的蛋白質(zhì)P05790和蛋白質(zhì)O76786作為桑蠶絲和柞蠶絲的標(biāo)志性蛋白... 

【文章來(lái)源】:浙江理工大學(xué)浙江省

【文章頁(yè)數(shù)】:82 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

基于蛋白質(zhì)組學(xué)和免疫學(xué)技術(shù)的絲綢文物分析研究


圖1.1研宄技術(shù)路線示意圖??1.7.2研宄難點(diǎn)??(1)抗體的制備:根據(jù)蛋白質(zhì)組學(xué)結(jié)果,篩選出不同種屬蠶絲的特異性蛋白或特異性??序列作為免疫原,以保證抗體的高效性和特異性

示意圖,蛋白質(zhì)組學(xué),桑蠶,蛋白質(zhì)組


圖2.1基于蛋白質(zhì)組學(xué)和免疫學(xué)技術(shù)的桑蠶繭蛋白質(zhì)組研宄示意圖??溫培養(yǎng)箱中孵育14?h

光譜圖,蛋白,桑蠶,蠶繭


^jVV??^?\?1652?1525?1235?Y?5?\?1657?1623?1543?1240?/?Y?1????,??i?i???"l_r—1?■?"TT--- ̄???i?■?i? ̄i???^???i?_?蜃?■?i?_??2000?1800?1600?1400?1200?1000?800?2000?1800?1600?1400?1200?1000?800??Wavenumber?(cm?*)?Wavenumber?(cm?*)??圖2.2蠶繭蛋白的紅外光譜圖(a)桑蠶繭蛋白,(b)柞蠶繭蛋白??傅里葉紅外變換光譜(FTIR)常用于蛋白質(zhì)分子構(gòu)象的表征。圖2.2是不同溶解方法??得到的蠶繭蛋白的紅外光譜,其特征區(qū)域包括酰胺I區(qū)(1700-1590cm-1)、酰胺II區(qū)(1590-??1460?cm-1)和酰胺III區(qū)(1300-1180?cm-1)?[24】s在所有桑蠶樣品的紅外光譜中(圖2.2a),??均在1652cm-1、1525cm-1和1235cm-1附近出現(xiàn)吸收峰。其中,WSZcrrT1處的吸收峰代表??酰胺I區(qū)的無(wú)規(guī)卷曲和a-螺旋結(jié)構(gòu)。1525?cnr1處的吸收峰代表酰胺II區(qū)的P-折疊結(jié)構(gòu)。??1235?cm-1處的吸收峰代表酰胺III區(qū)的無(wú)規(guī)卷曲構(gòu)象。此外,桑蠶繭對(duì)照樣在977?cm-1附??近出現(xiàn)明顯的吸收峰,是由肽鏈結(jié)構(gòu)“Gly-Gly”和“Gly-Ala”中C-C鍵的伸縮振動(dòng)產(chǎn)生,??與結(jié)晶區(qū)的重復(fù)氨基酸序列“GAGAGS”和“GAGAGY”密切相關(guān)[69]。但在溶解的絲素蛋??白中未出現(xiàn)此吸收峰,說(shuō)明溶解過(guò)程對(duì)蠶繭蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu),特別是結(jié)晶區(qū)結(jié)構(gòu),具有


本文編號(hào):3009996

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