大鼠視神經(jīng)挫傷后GAP-43表達(dá)與PRVEP檢測(cè)的時(shí)序性研究
本文關(guān)鍵詞:大鼠視神經(jīng)挫傷后GAP-43表達(dá)與PRVEP檢測(cè)的時(shí)序性研究
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【摘要】:【研究背景】眼外傷導(dǎo)致的視功能下降是法醫(yī)學(xué)鑒定時(shí)最常見的臨床表現(xiàn)之一,其嚴(yán)重程度與被鑒定人的損傷程度和傷殘等級(jí)直接相關(guān)。由于此類案件一般都涉及到經(jīng)濟(jì)賠償問題,因此,大部分被鑒定人在檢測(cè)過程中往往出現(xiàn)不同程度的掩飾、夸大癥狀或偽裝視功能損害。視覺誘發(fā)電位(Visual evoked potential,VEP)是目前臨床上應(yīng)用較為廣泛的一種評(píng)估視功能的檢測(cè)方法,它從電生理水平上客觀反映了眼外傷后視功能的狀況。但其檢測(cè)結(jié)果易受受試者精神狀態(tài)、注視度等多因素的影響,從而限制了其在臨床上的廣泛應(yīng)用。生長(zhǎng)相關(guān)蛋白(Growthassociated protein, GAP-43)作為神經(jīng)再生的特異性標(biāo)志物,其在傷后的時(shí)序性表達(dá)可在一定程度上反映傷后視功能恢復(fù)的情況,能從蛋白水平闡述視功能變化的分子機(jī)制。傷后不同時(shí)間點(diǎn)視功能可能不同,目前尚缺乏眼外傷后VEP檢測(cè)與GAP-43表達(dá)的聯(lián)合研究,深入研究?jī)烧咧g的聯(lián)系對(duì)于全面評(píng)價(jià)視功能有著重要的意義。 【目的】從電生理及蛋白分子水平探討視神經(jīng)損傷后視功能變化規(guī)律,為準(zhǔn)確評(píng)價(jià)視神經(jīng)損傷及傷后視功能提供有力的依據(jù)。 【材料與方法】SD成年大鼠42只,分為對(duì)照組(正常對(duì)照組和假手術(shù)組)及損傷組,損傷組再按不同時(shí)間分為5組(1d、3d、7d、14d、28d),每組6只,同期行模式翻轉(zhuǎn)視覺誘發(fā)電位(Patternreversal evoked potential, PRVEP)檢測(cè)傷眼及正常眼視功能狀況,而后灌流固定,眼球取材切片,光鏡觀察視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(Retinal ganglion cells, RGCs)的改變,免疫組化方法檢測(cè)RGCs中GAP-43的表達(dá)水平。對(duì)GAP-43表達(dá)的時(shí)間規(guī)律進(jìn)行分析,并與傷后模式翻轉(zhuǎn)視覺誘發(fā)電位的檢查結(jié)果進(jìn)行比較,,分析其與PRVEP的相關(guān)性。 【結(jié)果】(1)正常對(duì)照組大鼠P100潛伏期73.532.11ms,波幅13.342.88uv,假手術(shù)組與其相比無顯著性差異(P0.05)。傷后1d組P100潛伏期明顯延長(zhǎng)(106.377.33ms),延長(zhǎng)率44.7%,較對(duì)照組有顯著性差異(P0.05),此后逐漸延長(zhǎng),14d組潛伏期最長(zhǎng)(120.6713.11ms),延長(zhǎng)率64.1%。此后逐漸縮短,28d組變化已不明顯(74.073.59ms),與對(duì)照組相比無顯著性差異(P0.05)。傷后1d組P100波幅較正常組明顯降低(4.79uv),下降64.1%。3d組波幅降至谷底(4.09 1.23uv),下降69.3%。此后逐漸上升,28d組基本趨于穩(wěn)定(13.064.49uv),與對(duì)照組相比無顯著性差異(P0.05)。(2)正常對(duì)照組及假手術(shù)組大鼠視網(wǎng)膜僅有少量GAP-43表達(dá)(平均光密度值0.241±0.068),主要位于內(nèi)叢狀層。傷后1d組,GAP-43表達(dá)不明顯(平均光密度值0.275±0.068),3d組在RGCs中表達(dá)明顯增加(平均光密度值0.304±0.110,較正常組增加26.1%),7d組在RGCs中達(dá)到峰值(平均光密度值0.389±0.182,較正常組增加61.8%),隨后開始下降,28d組表達(dá)已不明顯(平均光密度值0.269±0.099),同對(duì)照組相比無顯著性差異(P0.05)。(3)損傷組GAP-43的平均光密度值與P100潛伏期和波幅間存在相關(guān)關(guān)系,但不同組間有較大差別。GAP-43平均光密度值與P100潛伏期相關(guān)系數(shù)分別為:r1d=0.183,r3d=0.356,r7d=-0.524,r14d=0.498,r28d=0.233,相關(guān)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。GAP-43平均光密度值與P100波幅的相關(guān)系數(shù)分別為r1d=-0.123, r3d=-0.243,r7d=0.424,r14d=0.408,r28d=0.134,相關(guān)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 【結(jié)論】PRVEP潛伏期在傷后1天開始出現(xiàn)顯著變化,在傷后14天開始恢復(fù),在傷后28天時(shí)已基本穩(wěn)定,其變化規(guī)律對(duì)于法醫(yī)學(xué)正確運(yùn)用VEP評(píng)價(jià)視功能、估計(jì)預(yù)后及掌握鑒定時(shí)機(jī)有明確的指導(dǎo)意義,也為臨床治療及神經(jīng)保護(hù)研究提供了理論依據(jù)。GAP-43在正常大鼠的視網(wǎng)膜中僅有少量表達(dá),損傷早期GAP-43表達(dá)的上調(diào)是視功能恢復(fù)的重要基礎(chǔ)。在傷后不同時(shí)間大鼠視網(wǎng)膜出現(xiàn)特異性的GAP-43表達(dá)上調(diào)和下調(diào),并且與PRVEP的變化具有明顯的時(shí)間關(guān)聯(lián)性,能從分子水平客觀反映視神經(jīng)挫傷后視功能恢復(fù)的狀況。
【關(guān)鍵詞】:視神經(jīng)損傷 生長(zhǎng)相關(guān)蛋白 視覺誘發(fā)電位 視網(wǎng)膜 視功能
【學(xué)位授予單位】:華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:D919.4
【目錄】:
- 中文摘要5-7
- Abstract7-10
- 引言10-12
- 材料與方法12-17
- 結(jié)果17-23
- 討論23-31
- 小結(jié)31-32
- 參考文獻(xiàn)32-35
- 附照及說明35-39
- 綜述39-46
- 參考文獻(xiàn)44-46
- 致謝46-47
- 附錄 課題研究相關(guān)圖片47
【參考文獻(xiàn)】
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本文編號(hào):833527
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