本文關(guān)鍵詞：溺死大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A和水通道蛋白5表達(dá)的初步研究

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【摘要】：【研究背景、目的】 水尸是法醫(yī)學(xué)鑒定的重要內(nèi)容之一，其鑒定的關(guān)鍵是判斷生前溺死還是死后拋尸。目前溺死的鑒定主要依賴于病理形態(tài)學(xué)改變和實(shí)驗(yàn)室檢查。在病理形態(tài)學(xué)中，蕈樣泡沫和水樣肺氣腫具有重要的意義，但其缺乏特異性，且受死后時(shí)間和腐敗的影響較大。硅藻檢查是常用溺死診斷常用的輔助方法，但存在易污染、工作量大以及檢出率低等問題，因此尋找有診斷價(jià)值的溺死鑒定指標(biāo)仍然是法醫(yī)學(xué)研究的一大主題。 隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，有學(xué)者嘗試將分子生物學(xué)方法應(yīng)用于溺死的鑒定。肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A（SP-A）和水通道蛋白5（AQP-5）在穩(wěn)定肺組織結(jié)構(gòu)及代謝等方面發(fā)揮了重要作用，推測(cè)其可能在溺死過程中發(fā)生改變。SP-A是由II型肺泡上皮細(xì)胞分泌的一種蛋白質(zhì)，其通過與肺表面活性物質(zhì)磷脂相互作用而發(fā)揮降低肺泡表面張力、防止肺泡過度膨脹或萎縮的作用。AQP-5是廣泛分布于肺泡上皮和支氣管上皮細(xì)胞的一種膜蛋白，研究顯示其主要作用是清除肺泡腔內(nèi)多余液體。關(guān)于這兩種蛋白在不同原因死亡的研究主要以案例回顧性為主，針對(duì)溺死的研究及相關(guān)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)則較少。此外，國(guó)外學(xué)者溺死模型多采用麻醉后氣道注水的方法，該方法在模擬真實(shí)溺死過程存在局限性。因此，關(guān)于AQP-5及SP-A在溺死中的研究仍需進(jìn)一步深入研究。 在溺死過程中，由于溺液進(jìn)入體內(nèi)使血液稀釋可導(dǎo)致部分器官重量發(fā)生改變，因此，有學(xué)者認(rèn)為可將器官重量作為鑒定溺死的指標(biāo)之一。Hamann S等提出了溺死指數(shù)的概念，即肺臟、胸腔積液重量之和與脾臟重量的比值，但目前溺死指數(shù)尚未得到普遍認(rèn)可和法醫(yī)學(xué)應(yīng)用。 因此，本研究建立溺死大鼠動(dòng)物模型，通過研究肺組織SP-A和AQP-5的分布和表達(dá)量，并結(jié)合肺組織的病理形態(tài)學(xué)改變、肺濕干比例以及主要臟器系數(shù)改變，來探討這兩種蛋白在溺死肺組織中的改變及其在法醫(yī)學(xué)鑒定中潛在的應(yīng)用價(jià)值。 【材料和方法】 將21只雌雄不限的SD大鼠完全隨機(jī)分為溺死組、死后拋尸組和對(duì)照組。溺死組大鼠放入籠中沉入水中溺死；拋尸組大鼠先脫頸處死后拋入水中；對(duì)照組大鼠直接脫頸處死。取肺、肝、脾及雙腎組織稱重，并計(jì)算各臟器系數(shù)（臟器/體重比值）。肺組織標(biāo)本分三部分檢測(cè)，①取少量肺組織稱重后放入85℃烘箱內(nèi)烘烤24小時(shí)，待水分充分烘干后進(jìn)行稱重，以測(cè)量肺濕干比例。②肺組織經(jīng)多聚甲醛固定后，制成石蠟切片，蘇木素-伊紅（HE）染色后進(jìn)行組織學(xué)觀察；③肺組織SP-A、AQP-5免疫組織化學(xué)染色觀察；④通過免疫印跡技術(shù)（Western-Blotting）研究SP-A和AQP-5在肺組織中蛋白表達(dá)情況。 【結(jié)果】 （1）與拋尸組和對(duì)照組相比，溺死組肺濕干比例、肺臟器系數(shù)、肝臟器系數(shù)值顯著高于其他兩組（P＜0.01），而其他兩組之間無顯著性差異（P＞0.05）。三組之間腎臟器系數(shù)和脾臟器系數(shù)無顯著性差異（P＞0.05）。 （2）組織學(xué)觀察顯示，相較于對(duì)照組和拋尸組，，溺死組可見明顯肺氣腫。各實(shí)驗(yàn)組之間均可見輕度的肺水腫。 （3）SP-A在大鼠肺泡壁呈小片狀表達(dá)，在支氣管上皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞胞漿內(nèi)呈顆粒樣表達(dá)。溺死組表達(dá)強(qiáng)度弱于其他兩組，以肺氣腫區(qū)域表達(dá)最弱。 （4）AQP-5表達(dá)位于肺泡上皮細(xì)胞、支氣管上皮細(xì)胞以及少數(shù)血管內(nèi)皮細(xì)胞頂膜。溺死組表達(dá)強(qiáng)度略弱于其他兩組。 （5）溺死組AQP-5及SP-A蛋白表達(dá)量顯著低于其他兩組（P＜0.01）；而拋尸組和對(duì)照組兩組之間無顯著性差異（P＞0.05）。 【結(jié)論】 （1）溺死大鼠肺氣腫嚴(yán)重，肺、肝重量顯著增加。其中，肺含水量增加參與了肺重量的改變。 （2）SP-A和AQP-5蛋白在溺死大鼠肺組織中表達(dá)量均顯著降低，其在法醫(yī)學(xué)溺死鑒定中的潛在應(yīng)用價(jià)值尚待深入研究。
【關(guān)鍵詞】：法醫(yī)病理學(xué) 溺死 肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A 水通道蛋白5
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：D919.1
【目錄】：

• 主要縮略語英文對(duì)照6-7
• 摘要7-10
• ABSTRACT10-13
• 第一部分 溺死大鼠的病理形態(tài)學(xué)研究13-22
• 前言13-15
• 1 材料和方法15-17
• 2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果17-21
• 3 討論21-22
• 第二部分 溺死大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白 A 及水通道蛋白 5 表達(dá)的初步研究22-35
• 前言22-24
• 1 材料和方法24-28
• 2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果28-33
• 3 討論33-35
• 結(jié)論35-36
• 綜述36-41
• 參考文獻(xiàn)41-50
• 在校期間參與課題和發(fā)表論文情況50-51
• 致謝51

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 楊春章;李卉麗;劉爽;于常海;;水通道:從結(jié)構(gòu)到功能[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2006年25期

本文編號(hào)：794152