大鼠腦挫傷后細(xì)胞間粘附因子1的表達(dá)與損傷時(shí)間推斷的研究
發(fā)布時(shí)間:2017-08-18 14:00
本文關(guān)鍵詞:大鼠腦挫傷后細(xì)胞間粘附因子1的表達(dá)與損傷時(shí)間推斷的研究
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【摘要】:目的觀察大鼠腦挫傷后不同損傷時(shí)間段ICAM-1蛋白的表達(dá),采用免疫組織化學(xué)方法(SABC)和免疫印跡法(Western Bloting)定性定量檢測(cè)大鼠腦挫傷后ICAM-1表達(dá),尋找ICAM-1蛋白表達(dá)與損傷時(shí)間變化的規(guī)律,為腦損傷時(shí)間推斷提供新的方法。 方法選取健康成年Wistar大鼠56只(雌雄不限),隨機(jī)分成7組,對(duì)照組和腦挫傷后1h,6h,24h,48h,72h,7d組,每組8只。正常對(duì)照組動(dòng)物經(jīng)假手術(shù)處理后直接處死,實(shí)驗(yàn)組分別在大鼠腦損傷1h,6h,24h,72h,7d處死,常規(guī)消毒后打開(kāi)頭骨,取出挫傷區(qū)腦組織,稱重80mg,-80℃液氮密封保存,用于免疫印跡檢測(cè)提取蛋白。剩余腦組織用10!的甲醛溶液中固定,用于HE染色和免疫組織化學(xué)染色。 結(jié)果:(1)HE染色結(jié)果:HE染色結(jié)果:對(duì)照組腦組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)正常,細(xì)胞核核藍(lán)染清晰,損傷組挫傷區(qū)可見(jiàn)腦組織間隙中聚集大量紅細(xì)胞,蛛網(wǎng)膜下腔出血嚴(yán)重,神經(jīng)元細(xì)胞腫脹,胞漿變空,核染色逐漸變淡,甚至消失,神經(jīng)元壞死消失。 (2)免疫組織化學(xué)染色傷后1 h即可觀察到血管內(nèi)皮細(xì)胞和膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)少量棕黃色反應(yīng)物,挫傷24 h陽(yáng)性表達(dá)物逐漸增多;72h后棕黃色反應(yīng)物大量聚集,達(dá)到頂點(diǎn),大鼠腦組織中幾乎所有的神經(jīng)細(xì)胞均有陽(yáng)性反應(yīng)物,一些淡染的神經(jīng)元胞核內(nèi)也有微量表達(dá),隨后棕黃色反應(yīng)物逐漸減少,挫傷7 d后仍可觀察少量棕黃色反應(yīng)物,且明顯多于對(duì)照組。 (3)Western Bloting法結(jié)果:,經(jīng)內(nèi)參β-actin的校正,使用Image-.Pro Plus 6.0圖像分析軟件對(duì)ICAM-1免疫印跡條帶進(jìn)行分析,以IOD值作為相對(duì)含量,可見(jiàn)大損腦損傷1h可見(jiàn)ICAM-1蛋白微量表達(dá),,隨著損傷時(shí)間的延長(zhǎng),ICAM-1的表達(dá)逐漸增多,到72h達(dá)到最高峰,其后ICAM-1表達(dá)降低,傷后7d仍有表達(dá),且高于對(duì)照組水平。 結(jié)論:大鼠腦挫傷后組織中ICAM-1的表達(dá)與損傷時(shí)間有一定關(guān)聯(lián),,兩種方試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果顯示,ICAM-1蛋白的表達(dá)隨著損傷時(shí)間的變化表現(xiàn)出一定的規(guī)律性,可望為腦損傷早期損傷時(shí)間推斷提供新的敏感指標(biāo)
【關(guān)鍵詞】:法醫(yī)學(xué) 腦挫傷 ICAM-1 損傷時(shí)間
【學(xué)位授予單位】:山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2012
【分類號(hào)】:D919
【目錄】:
- 摘要5-6
- Abstract6-8
- 前言8-9
- 實(shí)驗(yàn)主儀器試劑和方法9-14
- 結(jié)果14-22
- 討論22-24
- 結(jié)論24-25
- 參考文獻(xiàn)25-27
- 綜述27-32
- 參考文獻(xiàn)30-32
- 個(gè)人簡(jiǎn)介32-33
- 致謝33
【參考文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前9條
1 張麗慧;魏爾清;;ICAM-1、VCAM-1在腦缺血損傷炎癥機(jī)制中的作用及調(diào)控[J];中國(guó)藥理學(xué)通報(bào);2005年11期
2 周官恩;劉宗超;饒明俐;;實(shí)驗(yàn)性腦出血后ICAM-1和IL-1β的表達(dá)與p38MAPK通路關(guān)系研究[J];中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志;2011年01期
3 王
本文編號(hào):694933
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