【摘要】：目的 研究呼和浩特地區(qū)夏秋季常見嗜尸性蒼蠅生態(tài)群落組成與演替;利用線粒體DNA(mtDNA)上細(xì)胞色素氧化酶輔酶Ⅰ和Ⅱ(COⅠ和COⅡ)以及16SrDNA中278bp和635bp以及513bp基因序列,鑒定嗜尸性蒼蠅的種類,解決依據(jù)形態(tài)學(xué)方法不能鑒定蒼蠅卵的種類、很難鑒定幼蟲、蛹種類的難題,為法醫(yī)鑒別嗜尸性蒼蠅及其幼蟲、蛹、卵種類提供依據(jù)。同時,探討嗜尸性蒼蠅mtDNA基因序列分析所得的遺傳距離與所處地理緯度變化的相關(guān)與回歸關(guān)系,為法醫(yī)判斷嗜尸性蒼蠅所屬地理種群,進(jìn)一步準(zhǔn)確鑒定其種類、推斷死亡時間和地點創(chuàng)造條件。 方法 連續(xù)兩年用觀察法研究7～10月份,家兔、狗尸體、雞、魚內(nèi)臟等試驗材料上的嗜尸性蒼蠅生態(tài)群落組成與演替;隨機(jī)采集放置在呼和浩特及成都地區(qū)室外草地家兔尸體上的嗜尸性蒼蠅、幼蟲、蛹、蒼蠅腹中的卵。利用改進(jìn)的小型昆蟲DNA勻漿提取方法提取上述樣本mtDNA通過Perkin-Elmer 9600擴(kuò)增儀進(jìn)行PCR擴(kuò)增;瓊脂糖水平電泳以及聚丙烯酰胺非變性凝膠連續(xù)緩沖體系垂直電泳和銀染顯色技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增結(jié)果檢測;PCR膠回收試劑盒純化;ABI 377測序儀測序;DNAMAN 4.0序列分析軟件,進(jìn)行序列比對,截取等長度片段;MEGA2.1軟件包進(jìn)行序列分析和構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹。同時,通過GenBank中BLAST檢索系統(tǒng)檢索世界性研究最為廣泛的23個果蠅mtDNA上COⅠ中278bp基因序列,以及包括本試驗組檢測并上傳的采集于呼和浩特和成都地區(qū)及世界其它地區(qū)的10個絲光綠蠅和10個銅綠蠅的mtDNA上COⅡ中的635bp基因序列;用MEGA2.1軟件包進(jìn)行序列分析和構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹,并將分析所得的各蒼蠅間的遺傳距離與地理緯度差運用SPSS統(tǒng)計軟件進(jìn)行回歸和相關(guān)分析。 結(jié)果 該地區(qū)上述尸體上出現(xiàn)的雙翅目嗜尸性蒼蠅3科8屬10種,主要
[Abstract]:Objective to study the ecological community composition and succession of the common cadaver flies in summer and autumn in Hohhot area, and to identify the species of corpse flies by using mitochondrial DNA (mtDNA) cytochrome oxidase coenzyme I and II (CO I and CO II) and 278bp and 635bp and 513bp gene sequences in 16SrDNA to solve the failure of identification of flies according to the morphological method. The species of eggs is difficult to identify the difficult problem of the larva and the species of pupae. It provides a basis for the forensic identification of the cadaver flies and their larvae, pupae and eggs. At the same time, the correlation and regression relationship between the genetic distance and the geographical latitude of the mtDNA gene of the cadaver fly is discussed. Step by step accurately identify its species and deduce the conditions of death time and place creation.
Methods the ecological community composition and succession of the autopsy flies on the experimental materials such as 7~10 months, rabbits, dog bodies, chicken and fish viscera were observed for two years for 7~10 consecutive years, and the autopsy flies, larvae, pupae and flies in the abdomen of the rabbit bodies in Hohhot and Chengdu area were collected randomly. The improved small insect was used to make use of the improved small insect DNA. MtDNA was amplified by Perkin-Elmer 9600 amplification by homogenate extraction. The agarose level electrophoresis and polyacrylamide gel continuous buffer system vertical electrophoresis and silver staining technique were used to detect the amplification result, PCR gel recovery kit was purified, ABI 377 sequencer was sequenced, and DNAMAN 4 sequence analysis was soft MEGA2.1 software package carries out sequence analysis and constructs a phylogenetic tree. At the same time, the BLAST retrieval system in GenBank is used to retrieve the 278bp gene sequence in CO I of 23 fruit flies, the most widely studied fruit fly mtDNA, as well as the testing and uploading of this test group in Hohhot and Chengdu. The 635bp gene sequences in the mtDNA CO II of 10 mercerizing flies and 10 aeruginosa flies in the region and other regions of the world; the sequence analysis and construction of the phylogenetic tree were carried out by the MEGA2.1 software package, and the genetic distance between the flies was analyzed by the regression and correlation analysis using the SPSS statistical soft parts of the geographical latitude difference.
Results 3 species, 8 genera and 10 species of Diptera fly were found in the above bodies.
【學(xué)位授予單位】：四川大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2005
【分類號】：D919

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本文編號：2150893