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北京中心城區(qū)硅藻分布的調(diào)查研究及破機(jī)罐消化法在溺死鑒定中的應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2018-06-30 10:28

  本文選題:法醫(yī)病理學(xué) + 溺死; 參考:《華中科技大學(xué)》2012年博士論文


【摘要】:[背景] 溺死(death by drowning或drowning)是機(jī)械性窒息死亡的一種,溺死的法醫(yī)學(xué)鑒定一直都是科研、檢案的重點(diǎn)、難點(diǎn)問題。在法醫(yī)實(shí)踐中,診斷溺死的生物學(xué)和鑒證化學(xué)指標(biāo)至今沒有得到科學(xué)的證實(shí)與接受。當(dāng)前,硅藻檢驗(yàn)仍然是溺死診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)(golden standard)"。在實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)硅藻的多種方法中,較為成熟且使用廣泛的方法是硝酸乙醇消化法,但該法也有其自身的局限性。近年來新興的破機(jī)罐消化法,對(duì)傳統(tǒng)的硝酸乙醇消化法進(jìn)行了改良,提高了實(shí)驗(yàn)操作的安全性,明確界定了實(shí)驗(yàn)用時(shí)、檢材和試劑的消耗量,為法醫(yī)學(xué)溺死鑒定的定性和定量檢測(cè)帶來了新的契機(jī)。此外,由于各水域環(huán)境復(fù)雜迥異,而硅藻種類繁多、形態(tài)迥異,不同水源的硅藻種屬構(gòu)成亦不相同,因此可以通過將檢測(cè)出的硅藻種屬及構(gòu)成比,與水域中的硅藻進(jìn)行對(duì)比,來推斷死者的落水位置,從而為檢案提供幫助。但迄今為止,無論是法醫(yī)學(xué)領(lǐng)域還是環(huán)境生態(tài)學(xué)領(lǐng)域,都未見對(duì)北京地區(qū)硅藻種屬分布進(jìn)行研究的文獻(xiàn)報(bào)道。 [目的] 1.研究北京市中心城區(qū)(西城區(qū)、東城區(qū)、朝陽區(qū)、海淀區(qū)、豐臺(tái)區(qū)、石景山區(qū))的主要河流及湖泊所含硅藻的種屬分布; 2.從法醫(yī)學(xué)角度,對(duì)北京、貴州省貴陽市、山東省濱州市、上海長(zhǎng)江口海域、漢江流域(武漢段)、新疆烏倫古河流域、山西省娘子關(guān)泉域的硅藻優(yōu)勢(shì)種屬進(jìn)行橫向比對(duì); 3.鑒定并詳細(xì)描述北京中心城區(qū)各水域所含硅藻的形態(tài)構(gòu)造、生態(tài)習(xí)性; 4.摸索應(yīng)用破機(jī)罐消化法檢測(cè)家兔心臟、肺、肝、腎四種器官硅藻含量的最優(yōu)實(shí)驗(yàn)條件(硝酸用量、消化溫度、消化時(shí)間); 5.比較破機(jī)罐消化法與硝酸乙醇消化法的差異。 [方法] 1.在北京市西城區(qū)、東城區(qū)、朝陽區(qū)、海淀區(qū)、豐臺(tái)區(qū)、石景山區(qū)的主要河流及湖泊設(shè)置16個(gè)采水點(diǎn),共采集80份水樣;取水樣置于破機(jī)罐中,加濃硝酸后放入鼓風(fēng)干燥箱100℃消化0.5h,將罐中液體離心、洗滌、涂片;利用全景智能化掃描數(shù)字切片工作站(OLYMPUS-DotSlide)記取水樣涂片中的硅藻數(shù)量,采集圖像,對(duì)硅藻種屬進(jìn)行鑒別,統(tǒng)計(jì)分析各水域硅藻構(gòu)成比,繪制硅藻分布圖,比對(duì)北京、貴州省貴陽市、山東省濱州市、上海長(zhǎng)江口海域、漢江流域(武漢段)、新疆烏倫古河流域、山西省娘子關(guān)泉域的硅藻優(yōu)勢(shì)種屬差異。 2.空氣栓塞處死健康家兔,取家兔的心臟組織,均分為180份,10g/份。將10g心臟組織剪碎,放入破機(jī)罐中,再向其中加入2mL梅尼小環(huán)藻藻種液待檢。將180份待檢心臟組織依據(jù)不同消化溫度(100℃、105℃、110℃),不同硝酸用量(5mL10mL、15mL、20mL),不同消化時(shí)間(60min、75min、90min、105min、120min)隨機(jī)組合分組。肺、肝、腎組織取材及實(shí)驗(yàn)分組同心臟。 3.按照實(shí)驗(yàn)設(shè)置消化組織,消化結(jié)束后,稱重剩余液體殘?jiān)|(zhì)量;液體離心、洗滌、涂片;篩選出完全消化組(肉眼觀液體澄清透明,稱量殘?jiān)|(zhì)量50mg);對(duì)完全消化組定量檢測(cè),統(tǒng)計(jì)不同條件下的完整硅藻數(shù)量、硅藻碎片數(shù)量、硅藻總數(shù)、硅藻形態(tài)破壞程度(硅藻碎片/硅藻總數(shù))。 4.在玻璃容器中盛滿混有梅尼小環(huán)藻藻種液的蒸餾水,將家兔置于兔籠中,浸入水下40s,提出水面40s后重新浸入水下,重復(fù)5次后,徹底溺死家兔;取家兔的心臟、肺、肝、腎組織,每只家兔的臟器均分為A、B兩組待檢。 5.A組按照最佳實(shí)驗(yàn)條件設(shè)置行破機(jī)罐消化法,B組行硝酸乙醇消化法檢測(cè)硅藻;稱重兩組剩余液體殘?jiān)|(zhì)量:液體離心、洗滌、涂片;統(tǒng)計(jì)各組完整硅藻數(shù)量、硅藻碎片數(shù)量、硅藻總數(shù)、硅藻形態(tài)破壞程度(硅藻碎片/硅藻總數(shù))。 6.所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 [結(jié)果] 1.北京市西城區(qū)、東城區(qū)、朝陽區(qū)、海淀區(qū)、豐臺(tái)區(qū)、石景山區(qū)主要河流及湖泊共檢見10種硅藻藻屬,分別隸屬2綱5目10屬,各水域所含硅藻種類及硅藻相對(duì)豐富度有所差異,部分河流可觀察到顯著的優(yōu)勢(shì)藻屬;繪制了北京中心城區(qū)硅藻分布圖;對(duì)不同地區(qū)(北京、貴州省貴陽市、山東省濱州市、上海長(zhǎng)江口海域、漢江流域武漢段、新疆烏倫古河流域、山西省娘子關(guān)泉域)的硅藻優(yōu)勢(shì)種屬進(jìn)行橫向比對(duì),證實(shí)不同地區(qū)的硅藻分布差異顯著,認(rèn)為氣候、地勢(shì)、水體、周圍工業(yè)化及社會(huì)化程度不同均會(huì)影響硅藻種屬的構(gòu)成。 2.心臟組織硅藻檢驗(yàn)的最佳實(shí)驗(yàn)條件為:消化溫度110℃,消化時(shí)間90min,組織(g)與硝酸用量(mL)的比例為2:3;肺組織硅藻檢驗(yàn)的最佳實(shí)驗(yàn)條件為:消化溫度100℃,消化時(shí)間105min,組織(g)與硝酸用量(mL)的比例為2:3;肝組織硅藻檢驗(yàn)的最佳實(shí)驗(yàn)條件為:消化溫度105℃,消化時(shí)間105min,組織(g)與硝酸用量(mL)的比例為2:3;腎組織硅藻檢驗(yàn)的最佳實(shí)驗(yàn)條件為:消化溫度110℃,消化時(shí)間120min,組織(g)與硝酸用量(mL)的比例為2:3。 3.破機(jī)罐消化法組織殘?jiān)軌蜻_(dá)到完全消化的客觀標(biāo)準(zhǔn),消化程度穩(wěn)定;硝酸乙醇消化法消化程度不穩(wěn)定,無法達(dá)到完全消化的客觀標(biāo)準(zhǔn);破機(jī)罐消化法的硅藻檢出率高于硝酸乙醇消化法,其硅藻破壞率低于硝酸乙醇消化法。 [結(jié)論] 1.首次將全景智能化掃描數(shù)字切片的理論和技術(shù)應(yīng)用于法醫(yī)學(xué)硅藻鑒定,證實(shí)了利用該技術(shù)鑒定硅藻的可行性。 2.總結(jié)了北京市中心城區(qū)各水域中硅藻分布的特點(diǎn),首次建立了北京中心城區(qū)水域的硅藻形態(tài)及相對(duì)構(gòu)成比數(shù)據(jù)庫,并繪制了相應(yīng)的北京城區(qū)硅藻分布圖,為北京地區(qū)溺死案件中相應(yīng)水域的硅藻比對(duì)提供了基礎(chǔ)檢測(cè)平臺(tái)。 3.首次從法醫(yī)學(xué)角度,將不同地區(qū)(北京、貴州省貴陽市、山東省濱州市、上海長(zhǎng)江口海域、漢江流域武漢段、新疆烏倫古河、山西省娘子關(guān)泉域)的硅藻優(yōu)勢(shì)種屬進(jìn)行橫向比對(duì),進(jìn)一步證實(shí)了硅藻檢驗(yàn)在刑事偵查中用以推斷死者落水位置的重大意義。 4.鑒定并詳細(xì)描述了北京中心城區(qū)河流及湖泊所含硅藻的形態(tài)構(gòu)造、生態(tài)習(xí)性,為法醫(yī)工作者依據(jù)硅藻形態(tài)比對(duì)判斷水中尸體落水位置提供幫助。 5.首次證實(shí)了機(jī)體心、肺、肝、腎組織由于質(zhì)實(shí)程度不同,應(yīng)用的破機(jī)罐消化法需要的硝酸用量、消化溫度及消化時(shí)間各不相同,每種器官在最優(yōu)實(shí)驗(yàn)條件設(shè)置下,能夠獲得硅藻的高檢出率及低形態(tài)破壞率的最佳契合點(diǎn)。 6.與硝酸乙醇消化法比較,破機(jī)罐消化法具有以下幾個(gè)優(yōu)點(diǎn):①硝酸用量少;②環(huán)境污染。虎塾袡C(jī)組織消解完全,消化程度具有穩(wěn)定性;④硅藻破壞程度小;⑤硅藻檢出率高;⑥硅藻定性定量分析的準(zhǔn)確度高。
[Abstract]:Background background
In the practice of forensic medicine , there is no scientific confirmation and acceptance for the diagnosis of drowning . In the practice of forensic medicine , there is no scientific confirmation and acceptance of the biological and quantitative chemical indexes of drowning . Purpose of the project 1 . To study the species distribution of diatoms in the main rivers and lakes in the central urban area of Beijing ( Xiicheng District , East District , Chaoyang District , Haidian District , Fengtai District , Shijingshan District ) ; 2 . From the perspective of forensic medicine , the dominant species of diatoms in Beijing , Guiyang City , Binzhou City of Shandong Province , Shanghai Yangtze River Estuary , Wuhan Section , Xinjiang Urenu River Basin , and Niaoguan Spring in Shanxi Province are laterally aligned ; 3 . identify and detail the morphological structure and ecological habits of the diatoms contained in the waters of the central city of Beijing ; 4 . The optimal experimental conditions ( the amount of nitric acid , digestive temperature and digestion time ) of the four organs of the heart , lung , liver and kidney of rabbits were determined by using the digestion method . 5 . Compare the difference between the digestion method of the broken machine and the digestion of nitric acid . Methodology 1 . A total of 80 water samples were collected in the main rivers and lakes in Xiicheng District , East District , Chaoyang District , Haidian District , Fengtai District and Shijingshan District . 2 . The heart tissues of rabbits were divided into 180 and 10 g / part by air embolism , and 10 g of heart tissue were cut and put into a crusher tank , and 2 mL of megneridium monophyceae liquid was added . 180 samples of cardiac tissue were randomly combined according to different digestive temperature ( 100 鈩,

本文編號(hào):2085972

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