發(fā)布時間：2017-10-18 04:11

  本文關鍵詞：PPARγ、NF-κB及COX-2在大鼠肝損傷模型中的表達及法醫(yī)學意義

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【摘要】：目的： 研究大鼠肝臟損傷后不同時間過氧化物酶體增殖物激活受體y(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)、細胞核因子-KB(nuclear factor kappa B, NF-κB)及環(huán)氧合酶2(cyclooxygenase2, COX-2)在肝臟組織中的表達變化,分析其時序性變化與損傷時間的關系,探討其是否可以作為法醫(yī)學工作實踐中推斷早期肝臟損傷時間的敏感指標。 方法： 健康成年雄性清潔級Sprague-Dawley大鼠54只,體重250±30g(由山西醫(yī)科大學實驗動物中心提供),隨機分為對照組(n=6)、生前損傷組(n=42)及死后損傷組(n=6)。大鼠稱重后,10%水合氯醛以3ml/kg的劑量腹腔注射麻醉,采用自由落體撞擊法復制出大鼠肝臟鈍性撞擊傷模型,并于損傷后0.5h、1h、2h、4h、8h、12h、24h機械性處死,提取肝臟組織迅速放入4%多聚甲醛中固定16h。死后損傷組為死后1h制模,均取相同部位肝臟,同上述方法處理。用蘇木素-伊紅染色技術(hematoxylin and eosin, HE)觀察肝臟組織在損傷后的病理組織學改變,Super Vision兩步法檢測損傷后不同時間PPARγ、NF-κB及COX-2的表達。利用MIAS-2000醫(yī)學圖像分析系統(tǒng)測定免疫組化未復染切片的陽性單位,并將各損傷組與對照組及死后損傷組進行比較,用SPSS16.0對所得數據進行統(tǒng)計學分析。 結果： (1)HE染色結果：正常對照組可見肝小葉結構清晰,肝細胞形態(tài)結構正常,排列整齊,未見炎性細胞浸潤。損傷組可見隨著損傷時間的延長,肝小葉結構紊亂,肝竇擴張充血并出現逐漸加重的肝細胞水腫變性壞死,肝細胞核深染固縮,大量炎性細胞浸潤。 (2)對照組肝細胞僅有低水平NF-κB陽性表達,隨損傷時間的推移肝細胞染色增強,于8h時棕黃色反應物聚集成簇,陽性單位達峰值。12-24h仍可見大量粗大棕黃色顆粒沉積,陽性表達有所下降但仍維持在一個相對穩(wěn)定的高水平。 COX-2的陽性表達主要定位在Kupffer細胞、血管內皮細胞、膽管內皮細胞和肝細胞,黃色或棕黃色顆粒彌漫于細胞漿。COX-2在正常肝組織僅有少量表達,陽性表達于損傷后依次升高,2h達高峰,后持續(xù)回落。 PPARγ主要表達在肝細胞,集中于中央靜脈及匯管區(qū)。對照組即可見陽性表達,傷后陽性表達出現小幅度升高,4h達高峰,隨后顯著下調,降至對照組水平以下。 經統(tǒng)計學方差分析：各損傷組與對照組及與相鄰上組的陽性單位比較差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05),死后損傷組與對照組無明顯表達差異(P0.05)。 結論： (1)檢測PPARγ、NF-κB及COX-2蛋白的表達可鑒別肝臟生前傷和死后傷； (2)大鼠肝損傷后24h內PPARγ、NF-κB與COX-2的表達呈現規(guī)律性,可望作為肝臟早期損傷時間推斷的參考指標。
【關鍵詞】：法醫(yī)學 損傷時間 PPARγ NF-κB COX-2
【學位授予單位】：山西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：D919.4
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 前言9-11
• 實驗材料和方法11-16
• 結果16-19
• 附圖19-22
• 附表22-24
• 討論24-30
• 結論30-31
• 參考文獻31-35
• 綜述35-43
• 參考文獻40-43
• 個人簡介43-44
• 致謝44

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前10條

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本文編號：1052862