AGR2通過誘導線粒體自噬發(fā)生改善腸黏膜屏障功能
發(fā)布時間:2022-01-13 18:26
目的 旨在探討人前梯度蛋白2(anterior gradient-2,AGR2)在腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)誘導的腸黏膜屏障損傷中的作用及其機制。方法 通過體外培養(yǎng)人結腸腺癌細胞株Caco-2細胞建立腸黏膜屏障模型,預先轉染AGR2質粒和對照質粒,24 h后實驗組加入TNF-α刺激細胞,通過實時定量PCR及Western blot檢測AGR2表達,通過跨膜電阻檢測細胞膜通透性,透射電鏡下觀察線粒體自噬的發(fā)生。結果 Caco-2細胞培養(yǎng)21 d,跨膜電阻值(transepithelial electrical resistance,TEER)大于600 Ω·cm2,趨于穩(wěn)定,證實體外腸黏膜屏障模型成功構建。在TNF-α誘導的腸上皮屏障損傷模型中,AGR2 mRNA及蛋白表達明顯下調,TEER下降至200 Ω·cm2左右,透射電鏡下顯示線粒體形態(tài)破壞。而預先轉染AGR2質?梢种芓NF-α引起的跨膜電阻值下降,TEER維持在400 Ω·cm2左右,透射電鏡下可見線粒體自噬小體產生。結論 體外實驗證實AGR2基因可抑制TNF-α誘導的腸黏膜...
【文章來源】:國際兒科學雜志. 2020,47(03)
【文章頁數(shù)】: 頁
本文編號:3586929
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