目的 探討在肺泡上皮細(xì)胞模型中甲型H1N1流感病毒（H1N1病毒）誘導(dǎo)低氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）核轉(zhuǎn)位的分子機(jī)制。方法 體外培養(yǎng)人肺腺癌上皮細(xì)胞（A549細(xì)胞）,選取對數(shù)生長期細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。①實(shí)驗(yàn)1：采用感染復(fù)數(shù)（MOI）1.0的H1N1病毒感染細(xì)胞24 h,建立H1N1病毒感染的A549細(xì)胞模型（H1N1病毒感染組）；并設(shè)立空白對照組。采用蛋白質(zhì)免疫印跡試驗(yàn)（Western Blot）檢測細(xì)胞中核轉(zhuǎn)運(yùn)受體蛋白（Importin 4、Importin 7）表達(dá),探討HIF-1α核轉(zhuǎn)位是否依賴Importin 4、Importin 7。②實(shí)驗(yàn)2：采用不同MOI（0、0.1、0.5、1.0、2.0、4.0）的H1N1病毒感染細(xì)胞24 h；采用MOI 1.0的H1N1病毒感染細(xì)胞0、3、6、12、18、24、36 h。采用實(shí)時(shí)熒光定量反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）檢測細(xì)胞中胞裂蛋白9基因變異剪接體1（SEPT9_i1）mRNA表達(dá),探討不同MOI和感染時(shí)間對SEPT9_i1表達(dá)的影響。③實(shí)驗(yàn)3：采用小干擾RNA（siRNA）轉(zhuǎn)染細(xì)胞24 ... 

【文章來源】：中華危重病急救醫(yī)學(xué). 2020,32(01)

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【參考文獻(xiàn)】：
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