目的 探討癌易感性候選基因19（CASC19）調(diào)控微小RNA-449b-5p（miR-449b-5p）的表達(dá)后對(duì)子宮頸癌細(xì)胞增殖、凋亡和輻射敏感性的影響。方法 （1）培養(yǎng)子宮頸癌細(xì)胞系HeLa細(xì)胞,予不同劑量（分別為0、2、4、6、8 Gy）的X線(xiàn)照射,實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)HeLa細(xì)胞中CASC19 mRNA和miR-449b-5p的表達(dá)水平。（2）不同條件處理后HeLa細(xì)胞增殖、凋亡、輻射敏感性及其相關(guān)蛋白表達(dá)的檢測(cè),其中,不同處理?xiàng)l件包括沉默CASC19表達(dá)、過(guò)度表達(dá)miR-449b-5p、下調(diào)miR-449b-5p并沉默CASC19表達(dá),相關(guān)蛋白包括細(xì)胞周期蛋白D1（cyclin D1）、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（cleaved-caspase-3）和組蛋白變異體H2AX（γ-H2AX）；采用四甲基偶氮唑藍(lán)（MTT）比色法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況,細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的輻射敏感性（以存活分?jǐn)?shù)表示）。（3）采用雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)（結(jié)果以熒光素酶活性表示）和實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)驗(yàn)證CASC19和miR-449b-5p之間的靶向調(diào)控關(guān)系。結(jié)果 ... 

【文章來(lái)源】：中華婦產(chǎn)科雜志. 2020,55(01)

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