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CASC19調控miR-449b-5p表達對子宮頸癌細胞增殖、凋亡和輻射敏感性的影響

發(fā)布時間:2021-10-10 02:14
  目的 探討癌易感性候選基因19(CASC19)調控微小RNA-449b-5p(miR-449b-5p)的表達后對子宮頸癌細胞增殖、凋亡和輻射敏感性的影響。方法 (1)培養(yǎng)子宮頸癌細胞系HeLa細胞,予不同劑量(分別為0、2、4、6、8 Gy)的X線照射,實時熒光定量PCR技術檢測HeLa細胞中CASC19 mRNA和miR-449b-5p的表達水平。(2)不同條件處理后HeLa細胞增殖、凋亡、輻射敏感性及其相關蛋白表達的檢測,其中,不同處理條件包括沉默CASC19表達、過度表達miR-449b-5p、下調miR-449b-5p并沉默CASC19表達,相關蛋白包括細胞周期蛋白D1(cyclin D1)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved-caspase-3)和組蛋白變異體H2AX(γ-H2AX);采用四甲基偶氮唑藍(MTT)比色法檢測細胞增殖情況,流式細胞儀檢測細胞凋亡情況,細胞克隆形成實驗檢測細胞的輻射敏感性(以存活分數(shù)表示)。(3)采用雙熒光素酶報告基因實驗(結果以熒光素酶活性表示)和實時熒光定量PCR技術驗證CASC19和miR-449b-5p之間的靶向調控關系。結果 ... 

【文章來源】:中華婦產科雜志. 2020,55(01)

【文章頁數(shù)】: 頁


本文編號:3427446

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