SET8介導(dǎo)AKT信號通路在調(diào)控高磷誘導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞鈣化中的作用
發(fā)布時(shí)間:2021-02-26 10:16
目的 探討賴氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶SET8介導(dǎo)AKT信號通路在調(diào)控高磷誘導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞(vascular smooth muscle cells, VSMCs)鈣化中的作用及機(jī)制。方法 (1)選取雄性SD大鼠進(jìn)行體內(nèi)實(shí)驗(yàn)并隨機(jī)分為假手術(shù)組和慢性腎衰竭血管鈣化組。取胸主動脈,采用von Kossa染色檢測鈣化情況;免疫組化法檢測SET8和Caspase-3表達(dá)情況。(2)體外實(shí)驗(yàn)進(jìn)行原代VSMCs培養(yǎng),將細(xì)胞隨機(jī)分為正常組和高磷組(10 mmol/L β-甘油磷酸)。采用鄰甲酚酞絡(luò)合酮比色法及茜素紅染色檢測細(xì)胞鈣化情況;流式細(xì)胞法檢測細(xì)胞凋亡情況;RT-PCR和Western印跡法檢測SET8、AKT和Caspase-3的表達(dá)。(3)為進(jìn)一步驗(yàn)證SET8在VSMCs凋亡中的作用,采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法,分3組:SET8-短發(fā)夾RNA(shRNA)組、空質(zhì)粒組和正常對照組。采用鄰甲酚酞絡(luò)合酮比色法及茜素紅染色檢測細(xì)胞鈣化情況;流式細(xì)胞法檢測細(xì)胞凋亡情況;RT-PCR和Western印跡法檢測SET8、AKT、Caspase-3的表達(dá)。結(jié)果 (1)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中,慢性腎衰竭血管鈣化組的血管鈣鹽沉積量明顯高...
【文章來源】:中華腎臟病雜志. 2020,(03)
【文章頁數(shù)】: 頁
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]異常高密度脂蛋白在慢性腎臟病中的研究進(jìn)展[J]. 王沖,王貴松,李月紅. 中華腎臟病雜志. 2019 (04)
[2]干擾SET8調(diào)節(jié)血管平滑肌細(xì)胞增殖、凋亡促進(jìn)血管鈣化[J]. 張東雪,李同妙,高少輝,張勝雷. 中國動脈硬化雜志. 2018(01)
本文編號:3052448
【文章來源】:中華腎臟病雜志. 2020,(03)
【文章頁數(shù)】: 頁
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]異常高密度脂蛋白在慢性腎臟病中的研究進(jìn)展[J]. 王沖,王貴松,李月紅. 中華腎臟病雜志. 2019 (04)
[2]干擾SET8調(diào)節(jié)血管平滑肌細(xì)胞增殖、凋亡促進(jìn)血管鈣化[J]. 張東雪,李同妙,高少輝,張勝雷. 中國動脈硬化雜志. 2018(01)
本文編號:3052448
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