高效纖維素降解復(fù)合菌劑的篩選及在秸稈沼氣發(fā)酵中的應(yīng)用
發(fā)布時(shí)間:2021-09-18 06:12
纖維素是地球上資源最豐富、來源最廣泛的有機(jī)物質(zhì)。由于缺乏相關(guān)技術(shù)等諸多因素,纖維素這一類寶貴資源不僅未能得到充分利用,而且還有相當(dāng)大的一部分被廢棄,成為環(huán)境污染物之一,這樣既造成了資源浪費(fèi)又對生態(tài)環(huán)境造成了嚴(yán)重的破壞。將秸稈作為沼氣發(fā)酵的原料,不但可以變廢為寶還可以在一定程度上解決農(nóng)村能源不足的問題。然而秸稈在沼氣發(fā)酵過程中表現(xiàn)出的發(fā)酵啟動慢、原料利用不充分等問題由來已久,利用微生物對秸稈進(jìn)行預(yù)處理來解決上述問題是最根本的途徑,篩選出高效纖維素降解菌株,并構(gòu)建適用于秸稈沼氣發(fā)酵預(yù)處理階段的復(fù)合菌劑具有重要意義。本研究從牛糞與稻草堆腐物、腐熟的豬糞、菌渣、土壤及枯枝落葉、垃圾堆腐物等6種不同材料分離出纖維素降解菌194株,其中有細(xì)菌79株,放線菌53株,真菌62株。通過纖維素剛果紅培養(yǎng)基測定其生長速度與水解圈大小,以及測定濾紙崩解率,并剔除有拮抗作用的菌株后,復(fù)篩出高效纖維素降解菌15株。將篩選出的15株高效纖維素降解菌進(jìn)行正交試驗(yàn),結(jié)果有5個(gè)組合表現(xiàn)出較高的酶活性,CMC酶活力大小依次為:組合16>組合10>組合13>組合2>組合11。其中,通過對組合16的一系...
【文章來源】:四川農(nóng)業(yè)大學(xué)四川省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:49 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線
3.4.1培養(yǎng)起始pH對復(fù)合系產(chǎn)酶的影響將液體發(fā)酵培養(yǎng)基的起始pH分別調(diào)到5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0,在30oC,120r/min恒溫振蕩培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)4天后,測定CMC酶活,結(jié)果見圖3一1。由圖可知,pH為6.5時(shí)復(fù)合系產(chǎn)生的酶活最大,在pHS.5一pHS.o范圍內(nèi),CMC酶活變化較大,在 pHS.5~PH6.5范圍內(nèi)呈上升趨勢,pH6.5一pHS.o范圍內(nèi)呈下降趨勢,且在弱酸性條件下產(chǎn)酶能力大于中性及弱堿性條件。一今一CMC酶活n甘 nnUCUCUnCUU︸nU曰八︸只︸匕左八01山nU︵X八bd工9口︵fl︶避鵝O一 5.566.577.58PH圖3一1不同pH對復(fù)合系產(chǎn)酶的影響Fig.3一 1CellulaseactivitiesofeellulosedegradingmieroorganismsgrownatdifferentPH3.4.2培養(yǎng)溫度對復(fù)合系產(chǎn)酶的影響將復(fù)合系菌株接種于裝有10OmL液體發(fā)酵培養(yǎng)基的250mL三角瓶中,將三角瓶分別置于25℃、30℃、35℃、40℃、45℃下
將復(fù)合系菌株接種于裝有IOOmL液體發(fā)酵培養(yǎng)基的250mL三角瓶中,將三角瓶置于恒溫振蕩器內(nèi)連續(xù)培養(yǎng),培養(yǎng)溫度設(shè)為30℃、轉(zhuǎn)速設(shè)為120r/min,同時(shí),每24h測定一次CMC酶活,結(jié)果如圖3一3。由圖可知,培養(yǎng)第2天到第5天該復(fù)合系產(chǎn)酶均處于較高水平,第4天時(shí)CMC酶活達(dá)到最大值巧0.26,超過第5天,酶活力呈下降趨勢。一刁.一一CMC酶活n︺n︸﹄日﹃UC劃n以nU 649﹄n曰R戶 0A工︵己譽(yù)華4日寸間(d)圖3一3不同培養(yǎng)時(shí)間對菌株復(fù)合系產(chǎn)酶的影響 F19.3一 3Cellulaseaetivitiesofeellulosedegradingmicroorganismseulturedfordifferenttime3.4.4碳源對復(fù)合系產(chǎn)酶的影響將復(fù)合系菌株接種于裝有IOOmL液體發(fā)酵培養(yǎng)基的25OmL三角瓶中,液體培養(yǎng)基中加入不同的0.5%可溶性碳源或1%不可溶性碳源,并置于恒溫振蕩器內(nèi)培養(yǎng)4d
本文編號:3399627
【文章來源】:四川農(nóng)業(yè)大學(xué)四川省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:49 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線
3.4.1培養(yǎng)起始pH對復(fù)合系產(chǎn)酶的影響將液體發(fā)酵培養(yǎng)基的起始pH分別調(diào)到5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0,在30oC,120r/min恒溫振蕩培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)4天后,測定CMC酶活,結(jié)果見圖3一1。由圖可知,pH為6.5時(shí)復(fù)合系產(chǎn)生的酶活最大,在pHS.5一pHS.o范圍內(nèi),CMC酶活變化較大,在 pHS.5~PH6.5范圍內(nèi)呈上升趨勢,pH6.5一pHS.o范圍內(nèi)呈下降趨勢,且在弱酸性條件下產(chǎn)酶能力大于中性及弱堿性條件。一今一CMC酶活n甘 nnUCUCUnCUU︸nU曰八︸只︸匕左八01山nU︵X八bd工9口︵fl︶避鵝O一 5.566.577.58PH圖3一1不同pH對復(fù)合系產(chǎn)酶的影響Fig.3一 1CellulaseactivitiesofeellulosedegradingmieroorganismsgrownatdifferentPH3.4.2培養(yǎng)溫度對復(fù)合系產(chǎn)酶的影響將復(fù)合系菌株接種于裝有10OmL液體發(fā)酵培養(yǎng)基的250mL三角瓶中,將三角瓶分別置于25℃、30℃、35℃、40℃、45℃下
將復(fù)合系菌株接種于裝有IOOmL液體發(fā)酵培養(yǎng)基的250mL三角瓶中,將三角瓶置于恒溫振蕩器內(nèi)連續(xù)培養(yǎng),培養(yǎng)溫度設(shè)為30℃、轉(zhuǎn)速設(shè)為120r/min,同時(shí),每24h測定一次CMC酶活,結(jié)果如圖3一3。由圖可知,培養(yǎng)第2天到第5天該復(fù)合系產(chǎn)酶均處于較高水平,第4天時(shí)CMC酶活達(dá)到最大值巧0.26,超過第5天,酶活力呈下降趨勢。一刁.一一CMC酶活n︺n︸﹄日﹃UC劃n以nU 649﹄n曰R戶 0A工︵己譽(yù)華4日寸間(d)圖3一3不同培養(yǎng)時(shí)間對菌株復(fù)合系產(chǎn)酶的影響 F19.3一 3Cellulaseaetivitiesofeellulosedegradingmicroorganismseulturedfordifferenttime3.4.4碳源對復(fù)合系產(chǎn)酶的影響將復(fù)合系菌株接種于裝有IOOmL液體發(fā)酵培養(yǎng)基的25OmL三角瓶中,液體培養(yǎng)基中加入不同的0.5%可溶性碳源或1%不可溶性碳源,并置于恒溫振蕩器內(nèi)培養(yǎng)4d
本文編號:3399627
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