[目的]:臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(umbilical-cord derived mesenchymal stem cells,UC-MSCs)可以通過(guò)便捷無(wú)害的方法獲得,在體外可長(zhǎng)期傳代培養(yǎng),在再生治療領(lǐng)域有廣泛的應(yīng)用前景。在體內(nèi),干細(xì)胞生長(zhǎng)在細(xì)胞外基質(zhì)(extracelluarmatrix,ECM)中,而脫離了體內(nèi)生長(zhǎng)微環(huán)境后,干細(xì)胞受到體外各種不利因素的影響下容易發(fā)生過(guò)早衰老,極大地降低了干細(xì)胞的實(shí)際應(yīng)用效果。脫細(xì)胞的細(xì)胞外基質(zhì)(decelluarizedextracelluarmatrix,DECM)能夠在體外模擬干細(xì)胞的體內(nèi)生長(zhǎng)微環(huán)境。人紅系衍生的核因子-2(nuclear factor erythroi d-2-related factor 2,NRF-2)調(diào)控細(xì)胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)和抗衰老相關(guān)基因表達(dá)。本課題旨在研究DECM是否能夠通過(guò)NRF-2來(lái)防止過(guò)氧化氫(hydrogen peroxid,H2O2)造成的UC-MSCs早衰。[研究方法]:首先確定200 μM是適合誘導(dǎo)UC-MSCs早衰的H2O2亞致死濃度。分別使用普通組織培養(yǎng)聚苯乙烯(tissue culture polystyre...

【文章頁(yè)數(shù)】：85 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２：?Ｈ２〇２對(duì)ＵＣ－ＭＳＣｓ增殖能力的影響

結(jié)果?細(xì)胞外基質(zhì)預(yù)防氧化應(yīng)激誘導(dǎo)干細(xì)胞早衰的機(jī)制研宄??結(jié)果??３．１檢測(cè)Ｈ２０２對(duì)ＵＣ－ＭＳＣｓ衰老的影響??為了檢測(cè)吐０２對(duì)ＵＣ－ＭＳＣｓ增殖能力的影響，我們首先將ＵＣ－ＭＳＣｓ按照１０００??個(gè)細(xì)胞／ｃｍ２的密度接種在普通９６孔板中，待貼細(xì)胞密度達(dá)到５０％左右時(shí)，以１００?....

圖３：在Ｈ２〇２造成的細(xì)胞氧化應(yīng)激微環(huán)境中，以不同濃度Ｈ２〇２?（１０〇ｎＭ，?２０〇ｍＭ，４００＾Ｍ）??預(yù)處理ＵＣ－ＭＳＣｓ，以ａＭＥＭ（１０°／〇ＦＢＳ，ｌＯＯＵ／ｍＬ青霉素，ｌＯＯｊｘｇ／ｍＬ鏈霉素）培養(yǎng)作為對(duì)照??組，在預(yù)處理后７２小時(shí)后進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)分析

１１１?１?Ｍ??ＣＴＴＦＪＬ?１００?ｍｍ?２〇ｏ?ｍｍ??ｈ２〇２??（Ｂ）??１００－１?＊?ｍｍ?ｃｔｒｌ??ｒ＾－ｊ?ｈ２〇２?１００?ｍｍ??〇ｑ．?ｒ．?Ｈ２Ｏ２?２００?ｍＭ??＇ｆ“?：．?Ｈ２Ｏ２?４００?ｍＭ??ｆ?６〇－｜?１??爸４０－?■畫(huà)?★??ＣＬ....

圖４：在Ｈ２〇２造成的細(xì)胞氧化應(yīng)激微環(huán)境中，以不同濃度Ｈ２〇２（１〇〇＾Ｍ，?２００＾Ｍ，４００ｐＭ）??預(yù)處理ＵＣ－ＭＳＣｓ，以ａＭＥＭ?（１０％ＦＢＳ，?１００Ｕ／ｍＬ青霉素，１０〇ｎｇ／ｍＬ鏈霉素）培養(yǎng)作為對(duì)照??

細(xì)胞外基質(zhì)預(yù)防氧化應(yīng)激誘導(dǎo)干細(xì)胞早衰的機(jī)制研宄?結(jié)果??±１．３９％，較２００?＿組沒(méi)有進(jìn)一步上調(diào)，且貼壁細(xì)胞較別組明顯減少。??（Ａ）?（Ｂ）??ＣＴＲＬ??＾???１００?（ＩＭ?２００?ｍＭ?４００?ｕＭ??＿?麵一—＿??ｄａｐｉ?ｍ?ｍ?§?ｉ?１?－??Ｈ?■■■■■....

圖５：對(duì)ＵＣ－ＭＳＣｓ來(lái)源的ＤＥＣＭ材料形態(tài)分析

結(jié)果?細(xì)胞外基質(zhì)預(yù)防氧化應(yīng)激誘導(dǎo)干細(xì)胞早衰的機(jī)制研究??（Ａ）?（Ｂ）??．?■＇??、々：＼?＜、，八入＼／?？?，?＇、：＇：ｉ?：…?＇?ｃ?１?，?？?／?，??：二；??＇■?＊ｔ??????圖５：對(duì)ＵＣ－ＭＳＣｓ來(lái)源的ＤＥＣＭ材料形態(tài)分析。（Ａ）在光學(xué)顯微鏡下觀察，Ｄ....

本文編號(hào)：4042012