禽白血病(avian leukosis,AL)是指由反轉(zhuǎn)錄病毒科甲型反轉(zhuǎn)錄病毒屬的禽白血病病毒(avian leucosis viruses,ALVs)引起的以禽類造血組織中某些細胞成分過度增生為主的一類可傳染的腫瘤性疾病。ALVs為線性的單股正鏈RNA病毒,基因組長約7.0-7.8kb,基因組兩端有長末端重復(fù)序列(LTR),為非編碼區(qū),中間為含有5’-gag–pol-env-3’順序的結(jié)構(gòu)基因,可編碼多種蛋白。2019年,在沒有外源性禽白血病病毒和任何其他致腫瘤病毒感染的情況下,從江蘇一家商品蛋雞場中發(fā)現(xiàn)了一起疑似禽白血病的腫瘤病例。本研究對該病例進行了病毒檢測,進而對檢測到的病毒做分離鑒定、全基因組序列測定與比較分析,確定引起該病的病原為一株重組E亞群禽白血病病毒(ALV-E)。本研究共分三部分:一、病料收集與病毒檢測2019年12月,江蘇一家蛋雞場發(fā)生一起腫瘤性傳染病,發(fā)病率為40%,病死率為10%,剖檢時發(fā)現(xiàn)肝臟上有腫瘤。本研究設(shè)計了馬立克病毒、禽白血病病毒、禽戊型肝炎病毒、網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病毒等雞致腫瘤病毒的特異性檢測引物,對可能引起該病的病原進行了檢測。PCR檢測和擴增產(chǎn)物...

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【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1-1 ALV的基因組模式圖

ALVs為線性的單股正鏈RNA病毒,基因組長約7.0-7.8kb,為二倍體,含有兩段相同的RNA(Coffinetal.,1982)。病毒粒子中的RNA的單體結(jié)構(gòu)近似于真核生物mRNA,但不具備感染能力�；蚪M兩端有長末端重復(fù)序列(LTR),不能夠編碼蛋白質(zhì)。中間為含有5’-....

圖3-1臨床樣品的病理和組織病理學(xué)病變。(A)是膽囊破裂的照片,(B)是肝臟腫瘤,(C)是卵巢萎縮,(D)是肝臟腫大和出血

該批病例臨床表現(xiàn)為抑郁、食欲不振和消瘦的癥狀。剖檢時發(fā)現(xiàn)腹腔充滿血水,肝脾腫脹并伴有腫瘤,部分病死雞出現(xiàn)膽囊破裂和卵巢的萎縮的癥狀(圖3-1),發(fā)病率為40%。3.1.2病料的PCR檢測結(jié)果

圖3-2 ALV檢測結(jié)果電泳圖

PCR檢測的結(jié)果顯示,禽戊型肝炎病毒,網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病毒、馬立克氏病毒和腺病毒等都為陰性(圖略),測序結(jié)果顯示有且僅有一種內(nèi)源性禽白血病病毒的感染。目的條帶的位置為302bp,電泳結(jié)果如圖3-2所示:3.2病毒分離鑒定

圖3-3禽白血病病毒的電子顯微鏡照片(150000×)

感染病毒的CEF細胞上清在經(jīng)過超速離心后,在透射電子顯微鏡下觀察病毒顆粒。我們觀察到病毒粒子為球形,有囊膜,直徑約為100nm左右,將該毒株命名為JS1208。電鏡照片如圖3-3所示:3.2.3JS1208毒株gp85原核表達及單因子血清的制備

本文編號：4033636