禽白血病(avian leukosis,AL)是指由反轉(zhuǎn)錄病毒科甲型反轉(zhuǎn)錄病毒屬的禽白血病病毒(avian leucosis viruses,ALVs)引起的以禽類造血組織中某些細(xì)胞成分過度增生為主的一類可傳染的腫瘤性疾病。ALVs為線性的單股正鏈RNA病毒,基因組長約7.0-7.8kb,基因組兩端有長末端重復(fù)序列(LTR),為非編碼區(qū),中間為含有5’-gag–pol-env-3’順序的結(jié)構(gòu)基因,可編碼多種蛋白。2019年,在沒有外源性禽白血病病毒和任何其他致腫瘤病毒感染的情況下,從江蘇一家商品蛋雞場中發(fā)現(xiàn)了一起疑似禽白血病的腫瘤病例。本研究對(duì)該病例進(jìn)行了病毒檢測,進(jìn)而對(duì)檢測到的病毒做分離鑒定、全基因組序列測定與比較分析,確定引起該病的病原為一株重組E亞群禽白血病病毒(ALV-E)。本研究共分三部分:一、病料收集與病毒檢測2019年12月,江蘇一家蛋雞場發(fā)生一起腫瘤性傳染病,發(fā)病率為40%,病死率為10%,剖檢時(shí)發(fā)現(xiàn)肝臟上有腫瘤。本研究設(shè)計(jì)了馬立克病毒、禽白血病病毒、禽戊型肝炎病毒、網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病毒等雞致腫瘤病毒的特異性檢測引物,對(duì)可能引起該病的病原進(jìn)行了檢測。PCR檢測和擴(kuò)增產(chǎn)物...

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1-1 ALV的基因組模式圖

ALVs為線性的單股正鏈RNA病毒,基因組長約7.0-7.8kb,為二倍體,含有兩段相同的RNA(Coffinetal.,1982)。病毒粒子中的RNA的單體結(jié)構(gòu)近似于真核生物mRNA,但不具備感染能力。基因組兩端有長末端重復(fù)序列(LTR),不能夠編碼蛋白質(zhì)。中間為含有5’-....

圖3-1臨床樣品的病理和組織病理學(xué)病變。(A)是膽囊破裂的照片,(B)是肝臟腫瘤,(C)是卵巢萎縮,(D)是肝臟腫大和出血

該批病例臨床表現(xiàn)為抑郁、食欲不振和消瘦的癥狀。剖檢時(shí)發(fā)現(xiàn)腹腔充滿血水,肝脾腫脹并伴有腫瘤,部分病死雞出現(xiàn)膽囊破裂和卵巢的萎縮的癥狀(圖3-1),發(fā)病率為40%。3.1.2病料的PCR檢測結(jié)果

圖3-2 ALV檢測結(jié)果電泳圖

PCR檢測的結(jié)果顯示,禽戊型肝炎病毒,網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病毒、馬立克氏病毒和腺病毒等都為陰性(圖略),測序結(jié)果顯示有且僅有一種內(nèi)源性禽白血病病毒的感染。目的條帶的位置為302bp,電泳結(jié)果如圖3-2所示:3.2病毒分離鑒定

圖3-3禽白血病病毒的電子顯微鏡照片(150000×)

感染病毒的CEF細(xì)胞上清在經(jīng)過超速離心后,在透射電子顯微鏡下觀察病毒顆粒。我們觀察到病毒粒子為球形,有囊膜,直徑約為100nm左右,將該毒株命名為JS1208。電鏡照片如圖3-3所示:3.2.3JS1208毒株gp85原核表達(dá)及單因子血清的制備

本文編號(hào)：4033636