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上游序列轉(zhuǎn)錄復合物(USTC)調(diào)控piRNA轉(zhuǎn)錄的機制研究

發(fā)布時間:2024-06-05 00:37
  小RNA是重要的基因調(diào)控分子。自RNA干擾現(xiàn)象被發(fā)現(xiàn)以來,在秀麗隱桿線蟲中發(fā)現(xiàn)了多種小RNA。其中,piRNAs(Piwi-interacting RNAs)是一種在動物中高度保守的小RNA。在多種動物中,piRNA抑制轉(zhuǎn)座子與非我基因的表達,維持基因組穩(wěn)定性,是配子形成的重要因素。在秀麗隱桿線蟲中,piRNA開啟了基因沉默的代際遺傳。大多數(shù)piRNA前體從基因組上含有上千個獨立的piRNA轉(zhuǎn)錄單元的兩個基因簇中轉(zhuǎn)錄。之后,piRNA轉(zhuǎn)錄本經(jīng)過一系列加工過程,并結(jié)合到Piwi蛋白上。盡管我們已經(jīng)知道一些基因參與piRNA的生成過程,但是,piRNA的轉(zhuǎn)錄與加工過程并不完全明朗。本文利用遺傳學,細胞生物學,分子生物學中的多種技術(shù)來研究秀麗隱桿線蟲中的piRNA生成機制。首先,我們利用MosSCI技術(shù)構(gòu)建了單拷貝GFP::3xFLAG標記的TOFU(Twenty-One-u Fouled Ups)基因的轉(zhuǎn)基因線蟲。我們發(fā)現(xiàn)TOFU-1,TOFU-2和TOFU-7定位在生殖腺細胞質(zhì)中。TOFU-3,TOFU-4和TOFU-5在生殖腺細胞核中與piRNA生成因子PRDE-1蛋白共定位。利用顯微...

【文章頁數(shù)】:108 頁

【學位級別】:博士

【部分圖文】:

圖1.1線蟲的生命周期((Corsietal.,2015)

圖1.1線蟲的生命周期((Corsietal.,2015)

圖注:秀麗隱桿線蟲的生命周期。順時針方向依次為成年線蟲,蟲卵,L1時期幼蟲,L2時??期幼蟲,L3時期幼蟲,Darer蟲,L4時期幼蟲在體式解剖顯微鏡下的形態(tài)。并列的??上下兩個上為雌雄同體線蟲,下為雄蟲。??2??


圖1.6在RNA干擾遺傳中WAGO-4和HRDE-1的不同角色(Xu?et?aL,?2018a)??圖注:GFP基因RNA干擾的表型

圖1.6在RNA干擾遺傳中WAGO-4和HRDE-1的不同角色(Xu?et?aL,?2018a)??圖注:GFP基因RNA干擾的表型

會延續(xù)到子代。而/jr也-/突變體中,GFP在F1代卵中處于沉默狀態(tài),在Larva丨??幼蟲中微量表達。在hy^o-4突變體中,GFP在F1代的卵中就開始重新表達(如??圖1.6A)。這說明HRDE-丨蛋白可能不參與到RNA干擾在F1代卵和幼蟲中的沉??默,而WAG0-4蛋白參與....


圖1.7秀麗隱桿線蟲中piRNA與PRG?

圖1.7秀麗隱桿線蟲中piRNA與PRG?

會延續(xù)到子代。而/jr也-/突變體中,GFP在F1代卵中處于沉默狀態(tài),在Larva丨??幼蟲中微量表達。在hy^o-4突變體中,GFP在F1代的卵中就開始重新表達(如??圖1.6A)。這說明HRDE-丨蛋白可能不參與到RNA干擾在F1代卵和幼蟲中的沉??默,而WAG0-4蛋白參與....


圖1.8果蠅中的piRNA生成通路((CzechetaL,2018)

圖1.8果蠅中的piRNA生成通路((CzechetaL,2018)

--1.7)?(Buckley?et?al.,?2012;?Das?et?al.,?2008;?Lee?et?al.,?2012;?Mao?et?al.,?2015;??ShirayamaetaL,?2012)。而部分的內(nèi)源靶標基因與CSR-1的部分靶標基因重疊,??PRG-1抑....



本文編號:3989398

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